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Sino Biological SMM293-T1培养基,HEK293细胞培养基

产品描述:

SMM 293-TI培养基适用于贴壁、悬浮培养条件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相关的细胞（如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT）的长期生长和瞬时转染。

SMM 293-TI含有细胞生长所需的全部营养成份，无需添加任何添加物即可使用。其化学成分明确，主要包含细胞生长所需的无机盐， HEPES， 碳酸氢钠， 必需和非必需氨基酸， 维生素， 酚红， 微量元素， PluronicÒ F-68和其他无机物（注意：此培养基不包含抗生素以及血清）。

Sino Biological SMM293-T1培养基,HEK293细胞培养基

产品特点:

• HEK293细胞瞬时转染专用培养基 • 即用型完全培养基，不用添加其他组分
• 培养基批次间性能稳定，同类产品性能更优越 • 无动物源组分，无血清，化学成分明确
• 转染前后无需更换培养基 • 上千蛋白表达成功案例
• 适用于瞬时转染和稳定株转染以及培养 • 适用于细胞的悬浮培养和大规模的反应器培养

SMM293-T1培养基,HEK293细胞培养基

 

 

产品参数:

外观 澄清红色溶液 适用细胞株 HEK293EBNA及相关的细胞（如HEK293F、HEK293T、HEK293H 、HEK293S、HEK293FT）
渗透压 275±10 mOsm/kg 细胞接种密度 0.3-0.6×106 cells/mL
pH值 6.0–6.5 倍增时间 < 26 hrs（因细胞类型、状态影响而存在数值变化）
无菌检测 无菌 细胞培养评价 优良
内毒素 < 10 EU/mL 产品用途 仅用于科学研究，不推荐用于人类或动物的诊断和治疗
有效期 6个月 储存条件 2-8 ℃，避光
SMM 293-TI培养基为澄清红色透明液体，2~8℃避光保存，如发现培养基变得浑浊或出现沉淀，请勿使用。

产品使用效果:

细胞密度高
SMM 293-TI培养基在HEK293T 的培养上更具优势。下图从细胞生长曲线以及细胞活率两个方面，展示了四种培养基对HEK293T细胞的培养效果，SMM 293-TI培养基明显具有不亚于国外著名品牌的质量。
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成功表达多种重组蛋白质
SMM 293-TI 成功应用于多种重组蛋白质的表达生产，获得上千个高品质的蛋白质产品。其中一种Fc标签融合蛋白的产量高达2.5g/L。
Sino Biological

产品使用方法:

细胞复苏：
  1. 迅速取出冻存的细胞，在37 ℃水浴条件下进行解冻（可以在水中轻轻晃动，时间控制在30s以内）；
  2. 轻轻地混匀细胞并将融化的细胞全部移至50 mL无菌离心管中，逐滴加入10 mL预热到37℃的培养基，离心换液（100 g，3 min）去除全部上清，加入293新鲜培养基重悬，使得细胞密度达到0.4~0.6×106cells/mL；
  3. 将细胞置于37℃，5%CO2，转速为110~175rpm的恒温摇床中进行培养；
  4. 2-5天后通过人工或仪器测定细胞的密度以及活率，如果细胞密度达到1.0×106cells/mL，活率85%以上则可进行传代培养；
  5. 如果细胞密度低于1.0×106cells/mL，则建议对细胞进行离心（100g，5min），然后重悬于20-30mL 的新鲜培养基中使得细胞密度为0.6×106cells/mL 左右，并继续培养至细胞正常生长则可进行传代培养。
细胞转染：
在SMM 293-TI培养基中，用Sinofection®转染试剂（货号STF01），可以实现 HEK293 细胞的高转染效率。具体细节可以参考Sinofection® 转染试剂说明书。
细胞驯化：
悬浮的HEK293 cells几乎不用驯化就可直接适应SMM 293-TI培养基。如果直接更换培养基失败则推荐下面两种方式来驯化HEK293细胞使其适应SMM 293-TI培养基：1）直接驯化；2）逐步驯化。
1）直接驯化：
  1. 将培养在加有5~10%血清的传统培养基或其他无血清培养基里的细胞，直接稀释传代到SMM 293-TI培养基中，细胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL；
  2. 将细胞置于37 ℃，5% CO2，转速为110~175 rpm的恒温摇床中进行培养；
  3. 4~6天后对细胞培养液进行稀释（或者离心更换上清），保持稀释（或者离心）后细胞密度为0.3~0.4×106cells/mL；
  4. 经过在100%的 SMM 293-TI培养基中的几次传代培养，传代后4~6天细胞的密度可以达到2~3×106cells/mL，细胞活率大于90%。这说明细胞已经完全适应了SMM 293-TI培养基，之后进行细胞的传代培养时，细胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106/ml左右。
注意:如果直接驯化效果欠佳，可采用逐步驯化的方法。
2）逐步驯化：
  1. 将培养在加有5~10%血清的传统培养基或其他无血清培养基里的细胞，直接稀释传代到SMM 293-TI培养基中，细胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL，原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为75:25；
  2. 将细胞置于37℃，5%CO2，转速为110-175rpm的恒温摇床中进行培养；
  3. 4~6天后进行传代，如果细胞生长状态良好，且活率>90% 则传代时原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为50:50，细胞密度仍控制在0.3~0.4×106cells/mL。如细胞生长慢，可离心上清，留20%原培养基，加入80% 的新鲜SMM 293-TI培养基继续培养；
  4. 重复步骤3逐步增加SMM 293-TI培养基所占的比例（原培养基与SMM 293-TI培养基的比例为25:75至10:90）直到100%的SMM 293-TI培养基；
  5. 经过在100%的 SMM 293-TI培养基中的几次传代培养，传代后4~6天细胞的密度可以达到2~3×106cells/mL，细胞活率大于90%。这说明细胞已经完全适应了SMM 293-TI培养基，之后进行细胞的传代培养时，细胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106cells/mL。