热敏磷酸酶–NEB酶试剂

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

热敏磷酸酶                              收藏

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#M0289L
5,000 units
3,149.00元

#M0289S
1,000 units
739.00元

#M0289V
500 units
389.00元

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。  

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。  

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 5 分钟。  

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。  

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使 1 μg 经 HindIII(产生 5´ 突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或 PstI(产生 5´ 凹陷末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

5,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。