Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 货号22659-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659 货号 22659 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 1896
Ex (nm) 597 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可以通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中,该指示剂的溶质是一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被保留在溶酶体内,进入溶酶体后,其荧光显着增强,这一关键特征显着降低了其染色背景。适用于多种不同类型的研究中包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有的必需组分和最佳细胞标记方法,适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。LysoBrite染料的性能明显优于同等的LysoTracker染料(来自Invitrogen)。LysoBrite染料可以在活细胞中停留一周以上,对细胞的毒性极小,而LysoTracker染料只能使用几个小时,LysoBrite染料可以存活几代细胞。此外,LysoBrite染料比LysoTracker染料具有更高的光稳定性,金畔生物是为您提供最优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发:

Texas Red滤波片

发射: Texas Red滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加LysoBriteDeep Red染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至60分钟
  4. 添加染色缓冲液
  5. 室温孵育30分钟
  6. 在荧光显微镜下Ex/Em =590/620nm(Texas Red滤光片组)处进行分析

注意:1)实验前,取出试剂盒进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B、C组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取10μL LysoBrite Deep Red(组分A),用5mL细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 10μL的500X LysoBrite Deep Red(组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500X LysoBrite Deep Red(组分A),避免反复冻融。

2)荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

  • 对于贴壁细胞:

在96孔黑色墙壁/透明底板(50μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入1/2的LysoBrite Deep Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有,它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

  • 对于悬浮细胞:

在1000rpm条件下离心培养液5分钟,得到细胞沉淀并弃去上清液,在预热(37℃)生长培养基例如(100 µL /管)中轻轻重悬细胞沉淀,然后添加1/2体积(50 µL /管)LysoBrite Deep Red工作溶液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:  1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有。它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。 

        2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒LysoBrite Deep Red染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光    货号22659

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

 

参考文献

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说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光.pdf