Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒 货号15991-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒    货号15991 货号 15991 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 tests 价格 5136
Ex (nm) 695 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测MDA的试剂盒,脂质过氧化物的特征在于不饱和脂肪酸,磷脂,糖脂,胆固醇酯和胆固醇的氧化降解。丙二醛(MDA)是脂质过氧化最常用的生物标志物之一。 MDA的测量历史上依赖于与硫代巴比妥酸(TBA)的反应以产生可以在532nm处比色测量的产物或在Ex / Em = 530550nm处以荧光法测量的产物。但是,TBA分析具有相当多的限制。(1)该反应对MDA没有特异性。(2)TBA-MDA反应需要在酸性条件下进行。(3)测定需要在高温下进行,一般在90-100ºC。由于这些限制,商业的基于TBA的MDA测定非常繁琐。这种Cell Meter 比色脂质过氧化(MDA)定量试剂盒提供了最快速,最方便的方法来测量MDA而不需要TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应产生蓝色产物,用吸光度酶标仪在695 nm测量。该测定非常快速并且对MDA具有特异性,而与其他醛的干扰很小。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 695nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准和/或测试样品(50 µL)
2.准备并添加MDA Blue (10 µL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40 µL)
5.监测OD在695 nm处的增加

 

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
MDA标准储备液(100 mM):
将100 µL ddH2O加入MDA标准品(组分C)中,并充分混合。 注意:未使用的MDA储备溶液应以-20℃的形式等次储存。

 

2.标准溶液配制

MDA标准
将4μLMDA标准溶液(100 mM)添加到996μL稀释缓冲液(组分B)中以获得MDA标准溶液(400μM)。

 

样品操作及实验分析

表1.在透明的底部96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准(MDA1-MDA7); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
MDA1 MDA1
MDA2 MDA2
MDA3 MDA3    
MDA4 MDA4    
MDA5 MDA5    
MDA6 MDA6    
MDA7 MDA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
MDA1-MDA7 50ul 连续稀释
BL 50ul 稀释缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样品

MDA测定

1.加入50 µL MDA标准品,空白对照和测试样品以清除底部96孔微孔板(如表1和表2所示)。

2.将10 µL /孔的MDA Blue (组分A)添加到MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 注意:对于384孔板,将25 µL样品,5 µL MDA Blue 溶液添加到每个孔中。 注意:请分装成一次性使用的组分A,并在-20ºC下闲置存放,并避免光照。

3.避光保存,室温下孵育反应10-30分钟。

4.加入40 µL反应溶液(组分D)使总测定体积为100 µL /孔。 注意:对于384孔板,请添加20 µL反应溶液(组分D),使总测定体积为50 µL /孔。

5.使用吸光度板读数器监控吸光度,并在695〜700 nm的OD处进行路径检查校正。

 

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2016): 95

Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
Journal: J Lipid Res (2013): 852

Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
Journal: Life Sci (2007): 51

Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
Authors: Grotto D, Santa Maria LD, Boeira S, Valentini J, Charao MF, Moro AM, Nascimento PC, Pomblum VJ, Garcia SC.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2007): 619

[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

说明书
Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒.pdf