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Buccutite FOL-Dye 650
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货号 | 5372 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 2 umoles | 价格 | 2544 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 1136.50 | 溶剂 | Water | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
Buccutite FOL-Dye 650是美国AAT Bioquest生产的交联剂，我们的Buccutite 交联技术提供了最方便，最有效的交联方法，它以高共轭产率连接两种生物分子。我们的方法使用一对交联剂：Buccutite MTA和Buccutite FOL。MTA被添加到一个分子中，而FOL被添加到另一分子。交联反应是通过将Molecule-1-Buccutite MTA和Molecule-2-Buccutite FOL混合而引发的。该交联反应性能测试结果非常理想，它在极其温和和中性的条件下发生，不需要任何催化剂。此Buccutite FOL试剂用于确定Molecule-2-Buccutite FOL的FOL基团数量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Buccutite FOL-Dye 650。
产品说明书
样品实验方案
溶液配制
储备溶液配制
Buccutite FOL-Dye 650储备溶液（10 mM）：将200 uL DMSO添加到Buccutite FOL-Dye 650小瓶中以制备10 mM储备溶液。注意：Buccutite FOL-Dye 650储备溶液应在制备后储存在-20°C下，如果避免反复的冻融循环，则应稳定保存2个月。
实验步骤
FOL样品制备
- 使用100 ug FOL修饰的样品（例如：用FOL组修饰的抗体或其他蛋白质，分子量应高于15,000）。
- 用PBS将体积调节至100 uL。
运行FOL分析
- 将10 uL 10 mM Buccutite FOL-Dye 650储备溶液添加到FOL样品溶液中。
- 将反应混合物保持在室温下，旋转或摇动60分钟。
- 准备离心柱（Cat＃60500）进行样品纯化。
- 用干净的收集管将反应混合物上样至离心柱。将所有溶液加载到色谱柱后，在顶部添加10 uL PBS，然后以1,000 x g的速度离心色谱柱5分钟。
- 用收集管收集溶液。
- 用0.5 mL石英比色皿或Nanodrop测量吸收光谱。 注意：用PBS将洗脱液稀释5-10倍，测量800 nm至250 nm的吸收光谱，或仅读取280 nm和654 nm处的吸光度值。
- 使用以下公式计算FOL＃（FOL摩尔数/分子摩尔数）。FOL＃=（A654 / 250000）/ {（A280-0.09 X A654）/ EC}
A280：在280 nm处洗脱液的吸光度
A654：在654 nm处洗脱液的吸光度
EC：样品的消光系数（M -1 cm -1）
数据分析
FOL计算：
样品： GxM IgG-FOL，100μLPBS中的100 ug
用Nanodrop分光光度计测量吸光度：
A280 nm = 0.922，A654 nm = 2.270，CF280 = 0.09，654 nm时的
EC（Buccutite FOL-Dye 650）= 250,000 M -1 cm -1
280 nm IgG的IgG EC = 210,000 M -1 cm -1
FOL＃ （每摩尔IgG的FOL摩尔数）=（2.270 / 250000）/ {（0.922-0.09 X 2.270）/ 210000} = 2.6
图示
 图1. Buccutite 交联技术提供了最方便，最有效的交联方法，以高共轭产率连接两个生物分子。我们的方法使用一对交联剂：Buccutite MTA和Buccutite FOL。MTA被添加到一个分子，而FOL被添加到另一分子。交联反应是通过将Molecule-1-Buccutite MTA和Molecule-2-Buccutite FOL混合而引发的。该交联反应在极其温和和中性的条件下发生，不需要任何催化剂。 |