Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22839-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪

Cell Meter  FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪     货号22839 货号 22839 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2544
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光是美国AAT Bioquest研发的用于细胞凋亡和坏死检测的试剂盒,该特定试剂盒旨在同时监测细胞凋亡,坏死和健康。细胞凋亡是一种自主细胞拆解的活跃程序化过程,可避免引发炎症。在细胞凋亡中,磷脂酰丝氨酸(PS)被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标,可以在观察到形态变化之前检测细胞表面上磷脂酰丝氨酸的出现。该试剂盒中使用的PS传感器在与膜PS结合后具有绿色荧光(Ex / Em = 490 / 525nm)。坏死已被描述为由于环境扰动导致的被动,意外细胞死亡,其中炎性细胞内容物不受控制地释放。如通过膜不可渗透的7-AAD(Ex / Em = 546 / 647nm)标记细胞核的能力所证明的,质膜完整性的丧失代表了证明晚期细胞凋亡和坏死的直接方法。此外,该试剂盒还提供活细胞质标记染料,CytoCalcein Violet 450(Ex / Em = 405/450 nm),用于标记活细胞的细胞质。该试剂盒经过优化,可用流式细胞仪或荧光显微镜同时检测细胞凋亡(绿色),坏死(绿色和/或红色)和健康细胞(蓝色)。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的细胞凋亡和坏死检测试剂盒。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
2.添加膜联蛋白V-FITC测定溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用FL1通道(Ex / Em = 490/525 nm)用流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞,得到2 – 5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-FITC(组分A)加入细胞中。

5.可选:加入2μL100X碘化丙啶(成分C)用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟,避光。

7.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测膜联蛋白V-FITC的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-FITC检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-FITC与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,因此导致染色强度增加。

Cell Meter  FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪     货号22839

图1.使用Cell Meter FITC-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中FITC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(蓝色)或用1μM星形孢菌素(红色)处理4-5小时,然后染色加载30分钟。 使用FL1通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量FITC-膜联蛋白V的荧光强度。

 

参考文献

Combined Treatments of Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia with Doxorubicin Promotes Synergistic Anti-Tumoral Activity.
Authors: D Hajj Diab El, P Clerc, N Serhan, D Fourmy, V Gigoux
Journal: Nanomaterials (Basel, Switzerland) (2018)

 

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说明书
Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 .pdf