Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 货号13813-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

货号 13813 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3840
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒,乳酸脱氢酶(LDH )是一种可催化丙酮酸和乳酸的相互转换氧化还原酶。 LDH存在于各种各样的生物体,包括动物和植物的细胞质中。细胞组织的损伤或红细胞溶血后释放的LDH进入血液。因为LDH是相当稳定的酶,它已被广泛地用于评价和组织细胞毒性的存在。乳酸脱氢酶的定量具有广阔的应用范围。 LDH可在某些病理条件下提高,如癌症。这种Amplite 乳酸脱氢酶测定试剂盒提供了用于生物样品中L-乳酸脱氢酶( L- LDH)基于荧光检测的方法,如血清,血浆,尿液,以及细胞培养物的样品。吸收信号可以由吸收酶标仪在〜 575nm处读取。有了这个Amplite L-乳酸脱氢酶测定试剂盒,我们能够探测到低至3 mU/mL的L-乳酸脱氢酶在100 μL的反应体积。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 575/605nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

96孔板测定示例

概述

制备D-乳酸测定混合物(50μL)

加入D-乳酸标准品或测试样品(50μL)

在室温下孵育30分钟~2小时

监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加

注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

 

操作方法

1.准备NAD储备溶液(100X):

向NAD小瓶(组分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD储备溶液。

 

2.准备D-乳酸储备液:

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到D-乳酸盐标准品(组分D)的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:未使用的D-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备D-乳酸标准品(0至1 mM)的连续稀释液:

3.1将10μLD-乳酸储备溶液(来自步骤2)加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:稀释的D-乳酸标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸标准溶液进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸标准品系列稀释液。

3.3如说明书中的表1和2中所述,将含有D-乳酸盐标准品和含D-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微量培养板中。

 

4.准备D-乳酸测定混合物:

4.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。

4.2将50μLNAD储备液(100X,来自步骤1)加入组分A(来自步骤4.1)的瓶中,并且混合均匀。

注意:这种D-乳酸测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的D-乳酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

5.运行D-乳酸测定:

5.1将50μLD-乳酸测定混合物(来自步骤4.2)添加到D-乳酸标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3.3)的每个孔中,以使总D-乳酸测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLD-乳酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。

 

参考文献

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说明书
Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒.pdf