Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒 货号13801-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒

Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒

货号 13801 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3840
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测AST的试剂盒,天冬氨酸氨基转移酶(AST),也称为血清谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT),是转移酶家族的成员。它催化天冬氨酸和谷氨酸之间α-氨基的可逆转移,是氨基酸代谢中的重要酶。AST存在于许多身体组织中,例如肝脏,心脏,肌肉,肾脏,脑。在健康受试者中,血清AST水平低。然而,当细胞受损时,例如急性和慢性肝炎,阻塞性黄疸,肝癌,心肌梗塞,AST可能会渗入血流并且AST水平显着升高。因此,血清AST水平的测定具有重要的临床和诊断意义。

Amplite 荧光天冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒为各种生物样品中AST的测量提供了一种快速而灵敏的方法。 天冬氨酸转氨酶催化天冬氨酸和α-酮戊二酸与草酰乙酸和谷氨酸的反应:

 

天冬氨酸(Asp)+α-酮戊二酸=草酰乙酸+谷氨酸(Glu)

 

通过酶偶联反应循环产生红色荧光产物来测量产物L-谷氨酸。可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm(最佳Ex / Em = 540nm / 590nm)下读取信号。使用Amplite 荧光天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,我们在100μL反应体积中检测到低至2 mU / mL的AST。该测定是稳定的,并且可以容易地适用于各种各样的应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 570/610nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

96孔板测定示例

概述

准备AST反应混合物(50μL)

加入AST标准品或测试样品(50μL)

孵育于37℃,20-30分钟或室温,60分钟

在Ex / Em = 540 / 590nm处监测荧光增加

注意:在开始实验之前,在室温下解冻组分A和B各一瓶。

 

操作方法

1.准备AST标准品的连续稀释液(1至300 mU / mL):

1.1向DPBS缓冲液中加入所需量的AST阳性对照,制成100 U / mL AST标准溶液。

注意:未使用的AST阳性对照(组分D)应始终存储在4℃。 不要冻结。

1.2将3μL100U / mL AST标准溶液(来自步骤1.1)加入含0.1%BSA的997 L DPBS缓冲液中,得到300 mU / mL AST标准溶液。

1.3取300μL300mU / mL AST标准溶液进行1:3连续稀释,得到AST标准品的100,30,10,3,1,0.3和0 mU / mL系列稀释液。

1.4如说明书中的表1和2中所述,将AST标准品和含有AST的测试样品的系列稀释液加入到实心黑色96孔微量培养板中。

注意:如果需要,将测试样品稀释至含有0.1%BSA的DPBS缓冲液中的浓度范围。

 

2.准备AST测定混合物:

2.1将100μLDdH2O加入到NAD小瓶(组分C)中,得到100X NAD溶液。

2.2将10 mL AST测定缓冲液(组分B)加入AST Enzyme Mixture瓶中(组分A),并充分混合。

2.3将整瓶100X NAD溶液(来自步骤2.1)加入到AST Enzyme Mixture溶液中(来自Step2.2)使用AST测定混合物。

注意1:该AST测定混合物足以用于两个96孔板。 在室温下不稳定,应在2小时内及时使用,避免暴露在光线下。

注意2:或者,可以通过向组分A的瓶中加入200μLH2O制备50倍的AST酶混合物原液,然后通过将原液与测定缓冲液(组分B)和100x NAD混合制备AST测定混合物。 按比例解决。 将未使用的50X AST Enzyme Mixture储备液和100X NAD溶液分装并储存在-20℃,避免冻融循环。

 

3.运行AST测定:

3.1将50μL的AST测定混合物(来自步骤2.3)加入AST标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤1.4),使得总AST测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLAST测定混合物。

3.2将反应在37°C下孵育20-30分钟或在室温下孵育60分钟,避光。

注意:空白控制的背景随着时间和温度的增加而增加。 如果在37℃下孵育30分钟,背景将很高。

3.3用Ex / Em = 530-570 / 590-600nm的荧光板读数器监测荧光增加(最佳Ex / Em = 540 / 590nm,在570nm处截止)。

 

参考文献

Reparative effects of astaxanthin-hyaluronan nanoaggregates against retrorsine-CCl4-induced liver fibrosis and necrosis
Authors: Yi Jhen Wu, Yu Chiuan Wu, I-Fen Chen, Yi-Lung Wu, Chin Wen Chuang, Han Hsiang Huang, Shyh Ming Kuo
Journal: Molecules (2018): 726

In vitro and in vivo study of the application of volvox spheres to co-culture vehicles in liver tissue engineering
Authors: Siou Han Chang, Han Hsiang Huang, Pei Leun Kang, Yu Chian Wu, Ming-Huang Chang, Shyh Ming Kuo
Journal: Acta Biomaterialia (2017)

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒 Cat#13800

说明书
Amplite 比色法天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒.pdf