エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

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エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX04  ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥20,000 344-09691

※ 精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 µg/sample、粒子数:10-100×108個/sample

キット内容
5 samples ・Protein Dye-Green
・Filtration tube
×1
×5

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技術情報

このキットだけで蛍光標識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標識エクソソームを調製できます。

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精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従来から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

  回収率
フィルトレーションチューブ(本キット) 50% 程度
ゲルろ過法 10% 程度
※ 小社での実施例:精製前後のエクソソーム粒子数をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認の蛍光画像をよくある質問:標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?に掲載しています。

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。
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①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

■ 検出条件
 Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
 Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
 Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

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取扱条件

取扱条件
1.保存条件:冷蔵
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