兔源Iba1抗体,无标签 Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体,无标签                              Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体,无标签

 


  Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注,除了在神经营养/神经保护中起作用外,也已被证实通过产生NO,TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

  该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体,适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点


● 抗原:对应于Iba1的C末端的合成肽
● 形式:TBS溶液(1 mg/mL)
● 纯化:兔抗血清的抗原亲和层析纯化

● 特异性:对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性,但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

       与人类,小鼠大鼠Iba1反应。
● 用法:
1. 抗Iba1,兔(免疫细胞化学)适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

      2. 抗Iba1,兔(用于Westernblotting)适合于Western blotting(免疫印迹)。0.5-1 μg/mL使用。



应用


大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像


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免疫印迹实验


兔源Iba1抗体,无标签                              Anti Iba1, Rabbit

Lane

1. Iba1 protein (10 ng)

2. 大鼠小胶质细胞 (10 µg)

3. 大鼠神经元 (10 µg)

4. 大鼠大脑皮层 (150 µg)

■ 实验条件

SDS-PAGE:5.5 % stacking gel, 12.5 % running gel, 100V

Blocking:3 % 脱脂奶粉/TBS ,1 h,室温

一抗:抗Iba1抗体(1/1000) ,3 % 脱脂奶粉/TTBS,Overnight,4℃

二抗:过氧化物酶标记抗兔IgG(1/5000),3 % 脱脂奶粉/TTBS,1 h,室温

数据提供:国立研究开发法人 国立精神・神经医疗研究中心 佐栁老师、一戸老师、高坂老师



◆实验步骤


a)石蜡切片

1.  脱蜡
   100%二甲苯10分钟,2次
          ⇓
   100%乙醇5分钟,2次
          ⇓
   80%乙醇5分钟
          ⇓
   70%乙醇5分钟
          ⇓
   dH2O,5分钟,2次


2. 用0.01M PBS洗涤,2次

3. 在0.3%H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4.  用0.01M PBS洗涤,3次

5. 室温(RT)下用封闭缓冲液(1.5%正常山羊血清和0.001M PBS的1%BSA)孵育2小时。

6. 4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体(0.5 μg/mL)(Wako目录号019-19741)孵育过夜。

7. 用0.01M PBS洗涤,3次。

8. 与生物素化的抗兔IgG抗体(1:200)在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9. 用0.01M PBS洗涤,3次。

10. 室温下与Elite ABC试剂(0.01M PBS中的试剂A(1:50)和试剂B(1:50))孵育1小时。

11. 用0.01M PBS洗涤,3次

12. 在过氧化物酶溶液中孵育(0.05M Tris缓冲液的0.01%过氧化氢和0.05%DAB)

b)冰冻切片

  冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4%多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后,将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。



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iba1抗体单页

Iba1抗体概述

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019-19741说明书

016-20001说明书

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神经生物学产品系列

Protocol for IHC-Fr(Anti Iba Rabbit)

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Protocol for IHC-P(Anti Iba, Rabbit)


参考文献

产品编号

产品名称

2017年发表文献引用

019-19741

Anti Iba1, Rabbit 

(for   Immunocytochemistry)

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[3]

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016-20001

Anti Iba1, Rabbit

 (for   Western Blotting)

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
019-19741 Anti Iba1, Rabbit(for Immunocytochemistry)
抗Iba1,兔(免疫细胞化学)
50 μg 免疫化学
016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western blotting)
抗Iba1,兔(用于免疫印迹)
50 μg 免疫化学