磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara

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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ¥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成,适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化,例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠(已终卖)。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
产品详情请点击:磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
 
 

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c-Myc琼脂糖珠酶试剂盒Takara

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c-Myc琼脂糖珠
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631208 c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads 1 ml ¥7,100 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠
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Code No. 产品名称
631208   c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads
 
■ 产品描述
本制品是将能够识别c-Myc标签(人p62-c-Myc蛋白质410-419部分)的单克隆anti-c-Myc抗体(Clone 9E10)交联到固定化proteinA琼脂糖珠的产品。可以用来从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀融合了c-Myc标签的蛋白质。琼脂糖珠上交联的抗体量>0.5 mg/ml。
 
■ 应用
Myc标签蛋白质小量纯化
 
■ 实验例
 
c-Myc琼脂糖珠
使用c-Myc单克隆抗体进行免疫共沉淀检测。在HEK293细胞中共表达以GFP变异体为标签的Max蛋白质和带有c-Myc标签的Myc蛋白质,然后使用anti-GFP抗体(泳道2)或anti-Myc 抗体(泳道4)进行免疫沉淀反应,再使用anti-Myc抗体进行Western Blotting检测。泳道2显示Myc蛋白质能够被Max蛋白质pull down。泳道4显示c-Myc单克隆抗体能够有效的pull down Myc蛋白质。泳道1和3是对照。
 
 
产品详情请点击:c-Myc琼脂糖珠
 
 

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Myc & HA标签抗体酶试剂盒Takara

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Myc & HA标签抗体
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631206 c-Myc Monoclonal Antibody 200 μg ¥4,532 Myc & HA标签抗体 Myc & HA标签抗体 Myc & HA标签抗体
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Code No. 产品名称
631206   c-Myc Monoclonal Antibody
 
■ 产品描述
这些抗体对带有表位标签的蛋白质具有高灵敏度和特异性,可用于Western Blotting、ELISA、免疫荧光染色和免疫细胞化学测定实验,以检测融合了Myc或HA标签的重组蛋白质。
 
c-Myc单克隆抗体
c-Myc单克隆鼠源抗体能够识别人p62-c-Myc蛋白质的410-419残基表位,适用于从细胞裂解液中免疫沉淀融合了c-Myc标签的蛋白质、ELISA、对显微注射或转染的细胞进行免疫细胞化学研究,以及对融合了c-Myc标签的蛋白质进行定位。
 
HA-tag多克隆抗体
HA-tag抗体是用合成的HA肽(YPYDVPDYA,人甲型流感病毒血凝素表位)在兔子体内免疫并用protein A纯化而制备的。适用于Western Blotting、免疫沉淀、免疫荧光以及ELISA实验。
 
■ 特点
HA-tag多克隆抗体:
来源:使用KLH共轭的合成HA表位(YPYDVPDYA)免疫兔子,再用protein A进行纯化签
浓度:0.1 mg/ml
 
c-Myc单克隆抗体:
来源:使用合成的人p62-c-Myc蛋白质的408-439残基肽段进行免疫反应制备的IgG1同种型单克隆抗体
浓度:1 mg/ml
 
■ 应用
Western Blotting、IP、IF、ELISA
 
■ 实验例
Myc & HA标签抗体
使用c-Myc单克隆抗体进行免疫共沉淀检测。在HEK293细胞中共表达以GFP变异体为标签的Max蛋白质和带有c-Myc标签的Myc蛋白质,然后使用anti-GFP抗体(泳道2)或anti-Myc 抗体(泳道4)进行免疫沉淀反应,再使用anti-Myc抗体进行Western Blotting检测。泳道2显示Myc蛋白质能够被Max蛋白质pull down。泳道4显示c-Myc单克隆抗体能够有效的pull down Myc蛋白质。泳道1和3是对照。
 
 
产品详情请点击:Myc & HA标签抗体
 
 

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pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装酶试剂盒Takara

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pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635689 pCMV-Myc Vector Set Each ¥6,297 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
Clontech 635690 pCMV-HA Vector Set Each ¥6,297 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
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Code No. 产品名称
635689   pCMV-Myc Vector Set
635690   pCMV-HA Vector Set
 
■ 产品描述
此类哺乳动物表达载体可以表达融合c-Myc或血凝素(HA)标签的目的蛋白质。这两种标签具有良好表征,高免疫反应性,是做免疫共沉淀研究的理想选择,同时也很容易通过Western Blotting实验进行检测。此外,c-Myc和HA是小标签,通常不会影响目的蛋白质的功能。
 
pCMV载体使用的是CMV启动子,可以在广泛来源的哺乳动物细胞中实现高水平的组成型表达。使用anti-myc抗体可以对带有myc标签的目的蛋白质进行Western Blotting或荧光显微镜检测。
 
pCMV-Myc & pCMV-HA载体套装(Code No. 631604)包含c-Myc单克隆抗体和HA标签多克隆抗体,可以用来做Western Blotting、ELISA检测或免疫染色分析。同时套装里还附带一个测序引物,用来确认插入片段是否在正确的阅读框内。
 
HA Tag sequence: ACC ATG TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT
Myc Tag sequence: ATG GCA TCA ATG CAG AAG CTG ATC TCA GAG GAG GAC CTG
 
■ 特点
· 在哺乳动物细胞中免疫共沉淀myc标签和HA标签蛋白质
· 高水平的组成型表达
· 在哺乳动物细胞中确认酵母双杂交相互作用
· Western Blotting实验得到的条带清晰、明亮、背景干净
 
■ 应用
· 免疫共沉淀研究
· 蛋白质互作确认
· Western Blotting
· 表位标签表达
 
■ 载体图谱示意图
 
pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
 
 
产品详情请点击:pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
 
 

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Magnetic Myc IP试剂盒酶试剂盒Takara

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Magnetic Myc IP试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635698 Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit 50 Rxns ¥8,349 Magnetic Myc IP试剂盒 Magnetic Myc IP试剂盒 Magnetic Myc IP试剂盒
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Code No. 产品名称
635698   Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit
 
■ 产品描述
Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit通过使用交联了anti-Myc单克隆抗体(可识别Myc表位)的磁珠,可以简单、快速地从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀Myc标签蛋白质。试剂盒中还包含磁珠法免疫沉淀的Buffer Set(经过优化,背景值非常低)和ProteoGuard Protease Inhibitor Cocktail(有效抑制细胞裂解过程中释放的内源性蛋白酶)。
 
■ 产品特点
· 纯化myc标签蛋白质简单、快速
· 可得到高纯度的变性蛋白质
· 抗体能够高度特异性地结合myc而不与内源蛋白质产生交叉反应
 
■ 应用
· 从细胞裂解液中纯化和免疫沉淀myc标签的蛋白质
· 鉴定myc标签的蛋白质
· 进行高通量蛋白质互做研究
 
 
产品详情请点击:Magnetic Myc IP试剂盒
 
 

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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara

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磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ¥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成,适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化,例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠(已终卖)。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
产品详情请点击:磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
 
 

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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635717 Capturem Protein A Miniprep 12 Columns ¥2,545
2,036(终卖)
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635720 Capturem Protein A Maxiprep 6 Columns ¥3,803
¥3,042
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635731 Capturem Protein A 24-Well Plate 1 × 24-well plate ¥5,777
¥4,622
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635743 Capturem Protein A 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ¥7,788 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635746 Capturem Protein A Buffer 100 ml ¥934
¥747
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日 *635717从即日起停止销售,推荐使用中等规格纯化柱635720进行替代。

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■ 产品简介
Capturem Protein A 系列产品是基于Protein A* 原理,结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱,特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可,小量纯化仅需5 min,因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造,增加了膜孔表面积,对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小,可在室温下操作,纯化简单快速,可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量(miniprep)、中量(maxiprep)以及高通量(24 well和96 well)四种规格可供选择。
*Protein A是金黄色葡萄球菌的表面蛋白质,对许多物种(如人、大小鼠)的IgG型抗体的Fc片段有很强的亲和力。ProteinA与抗体的结合能力根据抗体同种型(isotype)的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 快速方便:从上样到洗脱,室温下操作小量纯化仅需5 min,无需孵育
· 一次性使用:有效减少样品间的交叉污染,受protein A性质影响,纯化抗体的产量因物种
   和抗体同种型的不同而有所差别
· 高质量:样品停留时间短,从而有效地防止了抗体降解及失活,保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度:柱床体积小,带入污染少,可实现大体积洗涤,小体积洗脱
· 高灵活性:可从广泛来源的样品中纯化抗体,如动物血清、腹水、细胞培养基等
注:Capturem Protein A 24-Well Plate-HC(Code No. 635743)经过优化,与旧版本产品(Code No. 635731)相比,收量更高。
 
■ Capturem 膜原理
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
* 注:Maxiprep需要50 ml tube使用的离心机,24 well、96 well 需要24孔板、96孔板使用的离心机或真空过滤装置
 
Capturem Protein A Miniprep与不同物种来源的抗体的结合能力
 
物种 亲和力 (μg/column)*
Goat 100-150
Horse >150
Human >150
Mouse 100-150
Rabbit 50-100
Rat >150
Sheep >150
 
*使用磷酸盐结合缓冲液(pH8.0)对不同物种来源的总血清进行稀释然后经Capturem Protein A Miniprep 纯化,产物的量通过测定其在280 nm处的吸光度进行计算。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + +
lgD
lgA1 + +
lgA2 + +
Fab + + +
scFv + +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++
lgG2b + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 操作流程
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品性能
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 实验例
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
从杂交瘤培养上清液中筛选Cas9的单克隆抗体。所有克隆均是小鼠IgG1同种型,所以使用高盐法进行纯化。选择Capturem Protein A Maxiprep,使用6 ml buffer (配方10 mM sodium borate, pH 8.9, 3 M NaCl)进行平衡,2,000 x g 离心3 min。向抗体上清原液中加入1/10体积的1 M sodium borate(pH8.9)将NaCl浓度调节至3.3 M。取20 ml上清液上样,2,000 x g 离心3 min,流出液重复上样一次,尽可能多的结合抗体。然后使用10 ml wash buffer(配方3 M NaCl, 10 mM sodium borate, pH8.9)洗涤,最后用0.5 ml的elution buffer(配方100 mM glycine, pH3.0)洗脱,收集管中需预先添加有50 μl 的中性buffer(配方1 M tris, pH8.5),使用少量elution buffer洗脱以便获得高浓度抗体产物。图A,SDS-PAGE 凝胶电泳检测纯化产物。图B,将Cas9表达量低(lane #1)和高(lane #2)的细胞裂解液分别进行凝胶电泳并转膜,再使用Capturem Protein A Maxiprep纯化得到的抗体对其进行免疫印迹反应。图C,使用筛选到的抗体,对不同比例稀释(从左至右: 20 ng, 10 ng, 5 ng, 2.5 ng, 1.25 ng, 0.625 ng)的Cas9 蛋白质进行免疫印迹反应
 
 
实验操作视频:
https://www.takarabio.com/learning-centers/protein-research/his-tag-purification/protocols/video-capturem-his-miniprep
 
 
更多产品信息请点击:protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
 

页面更新:2021-07-06 13:42:46

抗体纯化树脂-嗜硫树脂酶试剂盒Takara

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抗体纯化树脂-嗜硫树脂
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635616 Thiophilic-Superflow Resin 10 ml ¥2,287 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂
Clontech 635617 Thiophilic-Superflow Resin 100 ml ¥17,880 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂
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Code No. 产品名称
635616   Thiophilic-Superflow Resin
635617   Thiophilic-Superflow Resin
 
■ 产品描述
使用嗜硫树脂进行抗体纯化是一种简单有效的方法,也是纯化免疫球蛋白最常用的方法,是Protein A法的经济替代品。尽管Protein A法纯化抗体很常用,但仍有一些种类的抗体,例如单链抗体IgE,IgY和IgM等不能用Protein A的方法纯化,因此嗜硫亲和层析(TAC)就可以作为一种替代方法,是此类抗体以及一般免疫球蛋白(包括IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及C3和C4 补体因子)纯化的理想选择。
 
TAC法可以简单有效地纯化蛋白质,特别适用于免疫球蛋白,可以代替Protein A从血清以及组织培养液中纯化抗体。与Protein A的免疫吸附相比,嗜硫吸附剂对免疫球蛋白有更广泛的亲和力。此外,使用嗜硫吸附剂能达到99%以上的总蛋白质回收率,而使用苯基和辛基琼脂糖吸附剂却只有92%和75%。
 
TAC对广泛物种来源的不同类别和亚类的免疫球蛋白具有广泛的特异性,并且容量与其他亲和方法相似。其优点是样品制备简单,适用于各种来源的材料以及各种浓度表达的蛋白质,洗脱条件温和,不同于洗脱pH比较极端的Protein A/Protein G分离法,可能影响抗体的稳定性。
 
■ 基本结构
 
抗体纯化树脂-嗜硫树脂
 
■ 产品特点
Thiophilic-Superflow Resin基于嗜硫亲和层析技术,通过砜硫醚配基吸附蛋白质。树脂对于不同蛋白质的吸附能力可以通过向混合物中加入不同的盐来操控,改变加入的盐浓度能够影响IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及 C3和C4 补体因子的亲和吸附能力。
与Protein A法相比,使用Thiophilic-Superflow Resin用于免疫球蛋白纯化有如下优势:
· 中性pH条件下纯化
· 选择性更广泛(IgY, IgM, IgE, scAb)
· 高线性流速
· 结合能力强(15-20 mg抗体/ml树脂)
· 可重复使用
· 纯化产物稳定性更高
 
■ 应用
抗体纯化,包括IgG, IgM和鸡的IgY。
 
■ Thiophilic-Superflow Resin的性质
性质 Thiophilic-Superflow Resin
批量法/重力流   适用
FPLC   适用
纯化规模   分析,制备
制备生产能力(mg IgG/ml树脂)   25
基质   交联的6%琼脂糖
最大线性流速 (cm/min)   5.0
最大体积流量 (ml/min)(5 x 1 cm 内径)   4.0
pH稳定性   2-10
保存   4℃,不可冷冻
 
■ 实验例
 
抗体纯化树脂-嗜硫树脂
使用Thiophilic Resin纯化单链抗体。上图为以下组分的SDS-PAGE结果:表达scFv215的细菌裂解液 (Lane 2),周质馏分 (Lane 3),Ni-NTA树脂的洗脱峰部分 (Lane 4),Thiophilic树脂的洗脱峰部分 (Lane 5). (Schulze, R. A. et al. (1994) Anal. Biochem. 220(1):212–214. Permission to reprint obtained.)。
 
 
产品详情请点击:抗体纯化树脂-嗜硫树脂
 
 

页面更新:2019-11-12 10:31:36

protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635725 Capturem Protein G Miniprep 10 Columns ¥2,545
¥2,036
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635726 Capturem Protein G 96-Well Plate 1 × 96-well plate ¥5,499 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635727 Capturem Protein G Maxiprep 6 Columns ¥3,803 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635732 Capturem Protein G 24-Well Plate 1 × 24-well plate ¥5,777
¥4,622
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635745 Capturem Protein G 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ¥7,788 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635744 Capturem Protein G 24-Well Plate – HC 4 × 24-well plate ¥26,358 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 产品简介
Capturem Protein G 系列产品是基于Protein G* 原理,结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱,特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可,小量纯化仅需5 min,因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造,增加了膜孔表面积,对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小,可在室温下操作,纯化简单快速,可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量(miniprep)、中量(maxiprep)以及高通量(24 well、96 well)四种规格可供选择。
*Protein G是来源于Staphylococcus aureus的细胞壁蛋白质,与许多物种(人、大小鼠等)的单克隆或多克隆IgG型抗体分子的Fc段有高亲和性。本制品使用的是重组protein G,去掉了白蛋白结合结构域、细胞壁和细胞膜结合结构域,从而提高了与抗体Fc片段的结合特异性。
 
■ 产品特点
· 快速方便:从上样到洗脱,室温下操作小量纯化仅需5 min,无需上样后孵育
· 结合力强:膜与抗体的结合能力≥75 mg/cm3
· 高质量:样品停留时间短,从而有效地防止了抗体降解及失活,保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度:柱床体积小,带入污染少,可实现大体积洗涤,小体积洗脱
· 高灵活性:可从广泛来源的样品中纯化多种类型的抗体,如动物血清、腹水、细胞培养基等
· 一次性使用:有效减少样品间的交叉污染,单孔的纯化产量因样品类型、物种以及抗体同种型的不同而有所差别。
注:Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(Code No. 635745/635744)经过优化,与旧版本产品(Code No. 635732)相比,收量更高
 
■ Capturem 膜原理
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 操作流程
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
 
  Capturem Protein G Miniprep Capturem Protein G Maxiprep CapturemProtein G 24-Well Plate-HC CapturemProtein G 96-Well Plate
包装量 10次 6次 24 well 96 well
样品上样量*1 100~800 μl 2~20 ml 0.5~4.3 ml/well 200~1,000 μl/well
操作时长 5 min 15 min 15 min 15 min
收量*2 60 μg
protein/column
1.2 mg
protein/column
600 μg*3
protein/well
60 μg
protein/well
洗脱液使用量 100-300 μl 0.5-1.5 ml 1.8 ml 100-300 μl
 
*1. 样品与binding buffer的稀释比例为1:2~1:15。建议杂交瘤样品1:2~1:4稀释,血清样品1:15稀释。
*2. 收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型(isotype)。
*3. 这是在HEK293细胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1时获得的收量。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + +
lgD
lgA1 + +
lgA2 + +
Fab + + +
scFv + +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++
lgG2b + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 各试剂盒组成
 
Capturem Protein G Miniprep(635725)
Miniprep Column      10个
 
Capturem Protein G Maxiprep(635727)
Maxiprep Column      6个
 
Capturem Protein G 96-Well Plate(635726)
96 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate(635732)
24 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(635745)
24 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(635744)
24 well plate          4块
 
【注】由于Capturem Protein G系列产品不包含buffer和收集管,请按以下建议配制buffer和准备材料。
1. 纯化buffer
本制品可搭配使用磷酸盐、柠檬酸盐缓冲液等抗体纯化常用试剂。标准的buffer配方请参考说明书中内容,需要注意的是,buffer的盐浓度和pH值对纯化抗体的收量和纯度的影响会因抗体的同种型不同而不同。
2. 收集tube/plate
使用Miniprep产品进行1次纯化,需要额外准备4个2 ml tube
使用Maxiprep产品进行1次纯化,需要额外准备4个50 ml tube
使用96 well产品进行1次纯化,需要额外准备4个96 well collection plate
使用24 well产品进行1次纯化,需要额外准备4个24 well collection plate
 
 
更多产品信息请点击protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
 
 
 

页面更新:2020-05-29 08:59:04

Capturem™ IP & Co-IP Kit酶试剂盒Takara

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Capturem IP & Co-IP Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635721 Capturem IP & Co-IP Kit 12 Rxns ¥2,545
¥2,036
Capturem™ IP & Co-IP Kit Capturem™ IP & Co-IP Kit Capturem™ IP & Co-IP Kit

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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基于Protein A原理的快速免疫沉淀产品
Capturem IP & Co-IP Kit
IP和Co-IP是研究蛋白质与大分子(例如其他蛋白质)之间相互作用的很有意义的实验手段。Capturem IP & Co-IP Kit应用于IP和Co-IP实验,为快速提取独立蛋白质或提取蛋白质-蛋白质复合物提供了完整、易用性的解决方案。它是一款基于新型膜技术的高性能“抗体-蛋白质”复合物纯化试剂盒,其中包含实验必备试剂,同时也提供结合、洗涤和洗脱buffer。实验从样品上样至洗脱完成仅需5min。
 
■ 产品特点
· 简单和快速的实验流程:抗体与样品孵育,之后在室温下进行的纯化仅需5 min
· 完整的解决方案:kit中包含用于IP和Co-IP实验的Capturem Protein A纯化柱和buffer,
   且均经过优化
· 高浓度:洗脱液体积小,产物浓度高
· 高质量:样品在膜上停留时间短,避免复合物的凝集、解体或失活
· 通用性强:兼容宽泛的IP buffer和实验条件
· 一次性使用:基于新型膜技术的一次性离心柱,能避免污染
 
■ 实验原理
 
Capturem™ IP & Co-IP Kit
Capturem Protein A 技术. 每个Capturem Protein A 纯化柱都含有高性能的改造过的Protein A 膜,表面积更大,与普通树脂相比,单位ml介质对抗体的结合能力更强。
 
■ 快速纯化流程
Capturem™ IP & Co-IP Kit
 
每个柱子最多可加入800 μl包含抗原抗体复合物的样品,然后用100 μl wash buffer洗涤, 30-50 μl elution buffer洗脱。每个步骤之间仅需1,000×g离心1 min,整个操作可在15min内完成。
 
■ 与主流竞争产品提取流程对比
Capturem™ IP & Co-IP Kit
与主流竞争产品相比,使用Capturem IP & Co-IP Kit能够显著缩短操作时间。
 
■ 实验例
实验例1
Capturem™ IP & Co-IP Kit
与在本实验中,将NIH3T3细胞裂解液与1 μg蛋白磷酸酶2A (PP2A) B亚基抗体进行孵育,然后上样至Capturem Protein A纯化柱。用300 μl洗涤buffer洗涤后用100 μl洗脱buffer洗脱,通过凝胶电泳分离各组分,再转移到PVDF膜上,用抗PP2A B抗体探测。结果显示在洗脱液中获得了很强的PP2A B蛋白质检测信号 (52 kDa)。
注:本实验例所使用的buffer与Capturem IP & Co-IP Kit中提供的buffer不同 (参见“实验方法:使用Capturem Protein A 纯化柱进行免疫沉淀实验”)。
 
实验方法:使用Capturem Protein A 纯化柱进行免疫沉淀实验
将1 μg的PP2A B亚基兔多抗与NIH3T3细胞裂解液在室温下孵育10 min,同时不断颠倒混合。使用400 μl的平衡/上样 buffer(1.0 M glycine, 2 M NaCl, pH9.0)对Capturem Protein A纯化柱进行平衡,1,000×g离心1 min。将抗体-裂解复合物用裂解buffer稀释至400 μl然后上样,30×g离心4 min,再用100 μl的wash buffer (PBS) 洗涤,1,000×g 离心1 min。最后使用100 μl的elution buffer (0.1 M glycine, pH2.5)进行洗脱,收集管中预先装有10 μl的中和buffer (1 M tris,pH8.5),1,000×g离心1 min。对各组分进行凝胶电泳分离,转移到PVDF膜上,使用anti-PP2A B兔源多克隆抗体 (Cell Signaling) 进行检测。
注:实验中使用的buffer是Capturem IP & Co-IP kit中优化buffer的早期配方。
 
实验例2
Capturem™ IP & Co-IP Kit
Capturem Protein A 产品具有出色的灵活性,能兼容广泛的实验条件,可以与其他试剂盒中的IP buffer搭配使用。为了测试该性能,将NIH3T3细胞裂解液(100 μl,含有130 μg总蛋白)与0.6 μg蛋白磷酸酶2A (PP2A) B亚基抗体分别在IP kit A,IP kit B或独立的裂解Buffer C中于4℃孵育1小时,总体积为400 μl。然后分别上样至使用对应IP buffer平衡过的Capturem Protein A纯化柱,最终使用30 μl of elution buffer洗脱一次(上图. Capturem Protein A columns A1,B1,C1),为了确保充分回收抗体复合物,重复洗脱一次(上图. Capturem Protein A columns A2,B2,C2)。同时进行的还有完全使用IP kit A和IP kit B的平行实验,按照各自的实验说明进行操作(上图. IP Kit A,IP Kit B),上样量及抗体用量与Capturem组相同。
结果显示,在原始样品(OS)中存在的组分,通过免疫沉淀操作被显著的富集了。Capturem Protein A纯化柱的结果显示,在第一次洗脱时,无论使用何种IP缓冲液,PP2A B蛋白信号都很强,用低pH甘氨酸洗脱缓冲液(A1,C1)的洗脱水平最高。
注:本实验例所使用的buffer与Capturem IP & Co-IP Kit中提供的buffer不同(参见“实验方法:使用Capturem Protein A 纯化柱进行免疫沉淀实验”)。

实验方法:测定Capturem Protein A纯化柱与不同buffer的兼容性
将NIH3T3细胞裂解液(100 μl,含有130 μg 总蛋白质)与0.6 μg的PP2A B亚基抗体在Active Motif (A) 或Thermo Fisher Scientific (B) IP试剂盒中提供的IP buffer或者是Promega 的裂解buffer (C)中进行孵育,总体积为400 μl,于4℃孵育1 h,然后上样至使用100 μl 对应IP buffer平衡过的Capturem Protein A纯化柱,1,000×g离心1 min,100 μl wash buffer洗涤,1,000×g离心1 min,然后使用30 μl的低pH buffer(0.1 M glycine,pH2.5,A和C)或Thermo Fisher Scientific的低pH elution buffer(B)于1,000×g的条件下离心洗脱,再重复洗脱一次,以确保完全洗脱抗体复合物。与此同时,我们也分别使用Active Motif 和Thermo Fisher Scientific 的IP 试剂盒按照说明书的操作步骤单独进行了实验,起始的裂解液和抗体量与使用Capturem纯化柱相同。所有洗脱产物电泳分离后转移到PVDF膜上,使用PP2A B亚基的抗体(Cell Signaling)进行检测。
注:实验中使用的buffer是Capturem IP & Co-IP kit中优化buffer的早期配方。
 
实验例3
Capturem™ IP & Co-IP Kit
p53是一个大小为53 kDa的核磷蛋白,具有抑制肿瘤的作用,并且在DNA损伤后参与抑制细胞增殖。已知野生型p53 能与几种病毒癌基因例如SV40 T 抗原 (SV40 T) 形成特异性复合物。使用293T细胞同时表达p53和SV40 T,我们证明了使用Capturem Protein A纯化柱能在基础水平免疫共沉淀p53和SV40 T。将Anti-SV40 T抗体加入到细胞裂解液中,室温下孵育混合物20 min,并不断颠倒混合。使用Capturem IP & Co-IP Kit中的优化buffer进行IP实验,洗脱产物经电泳分离并转移至PVDF膜。然后使用p53和SV40 T的小鼠单抗进行免疫印迹检测,Capturem Protein A 对SV40 T的IP结果显示对SV40 T进行的免疫沉淀实验在洗脱产物中同时检测到了SV40 T (97 kDa) 和p53 (53 kDa)的条带,证实了二者之间较强的相互作用(上图,E-SV40 T-1和E-SV40 T-2)。

 
实验方法:从293T细胞中免疫共沉淀p53和SV40 T抗原
以同时表达p53 和SV40 T的293T细胞为样本制备细胞裂解液。向100 μg的293T细胞裂解液中加入
1 μg的SV40T抗体 (兔多抗, V-300, SCBT),室温下孵育20 min,同时不断颠倒混合。负对照组,裂解液在不加SV40 T抗体的情况下孵育,然后使用完整的Capturem IP & Co-IP Kit一式两份进行IP实验。洗脱产物电泳分离后转PVDF膜,先用SV40 T的小鼠单抗(SCBT)进行检测,剥离后再用p53的小鼠单抗进行检测(SCBT)。
 
■ 应用
· 免疫沉淀
· 免疫共沉淀
· 蛋白质复合物研究
· 抗体工程研究中筛选抗原
 
产品详情请点击:Capturem™ IP & Co-IP Kit
 
 

页面更新:2019-12-30 13:09:15

糖蛋白富集 & 检测酶试剂盒Takara

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糖蛋白富集 & 检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635647 Glycoprotein Enrichment Resin 10 ml ¥3,163 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
Clontech 635648 Glycoprotein Western Detection Kit 20 Rxns ¥2,442 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
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Code No. 产品名称
635647   Glycoprotein Enrichment Resin
635648   Glycoprotein Western Detection Kit
 
■ 产品描述
Glycoprotein Enrichment Resin用于从血清当中富集糖基化蛋白质,在蛋白质组学研究中能够显著降低样品的复杂性。这种苯基硼酸类的树脂,可以在90 min内富集糖基化蛋白质,产品包装形式灵活,可用于重力流或FPLC纯化。
 
Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的辅助产品,用于在Western Blotting实验中对糖基化蛋白质选择性染色。试剂盒使用的是一种改良的过碘酸希夫法,对糖基化蛋白质的碳水化合物部分进行染色,产生有色条带。过碘酸希夫试剂针对的是存在于糖和唾液酸中相邻的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色剂。因此,本试剂盒的检测不依赖抗体,可以快速、灵敏地检测富集的糖蛋白。
 
■ 原理
 
糖蛋白富集 & 检测
Glycoprotein Enrichment Resin是一种硼酸基树脂,能够从复杂样品(例如人血清)中快速、有效、特异性地富集糖基化蛋白质,可以使用简单的重力流方法或中等压力的方法(例如FPLC)进行操作。树脂是偶联了间氨基苯硼酸配体的琼脂糖珠,该配体能够结合存在于糖蛋白分子糖部分内的残基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,与这些糖残基的顺式二醇基团形成可逆的五元环络合物。这种复合物可通过降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脱buffer使其分离。
 
■ 产品特点
灵活、有效、特异性的富集和检测糖基化蛋白质。
· 灵活——使用本树脂可以应用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本树脂特异性结合糖蛋白能力更强,而非特异性结合很弱
· 特异性——本树脂对血清中的高、低丰度糖蛋白均能够有效富集
· 快速——90 min内即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、灵敏、特异性的不依赖抗体的检测
 
■ 应用
糖蛋白的富集和检测
 
■ 实验例
 
糖蛋白富集 & 检测
通过Western Blotting对Glycoprotein Enrichment Resin纯化产物进行分析,结果显示,该树脂特异性地富集了高丰度和低丰度的血清糖蛋白。图A.使用IgG抗体检测到特异性富集的高丰度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脱液(糖蛋白)。图B和C是通过Western Blotting对纯化得到的两种特异性的低丰度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(图B)和α-1抗胰蛋白酶(图C)进行检测的结果,lane 1是人血清,lane 2是洗脱组分,lane 3是洗脱组分。
 
 
 
产品详情请点击:糖蛋白富集 & 检测
 
 

页面更新:2019-11-12 10:52:12

磷酸肽离心柱酶试剂盒Takara

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磷酸肽离心柱
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635635 Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit Each ¥1,834 磷酸肽离心柱 磷酸肽离心柱 磷酸肽离心柱
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■ 产品描述
我们的Phosphopeptide Enrichment Spin Columns 和 Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit能够增强对一些很难检测的磷酸化肽段的检测能力。简单的实验操作可以帮助实验人员在做质谱或HPLC检测之前富集蛋白质消化片段。
 
离心柱使用的是能够结合磷酸肽的特别的IMAC树脂,可以从哺乳动物细胞和组织中分离磷酸肽,最高可结合250 μg的磷酸肽并且可以容纳高达850 μl的样品量。离心柱与大多数离心机都可以良好匹配,使用时无需预平衡,直接离心去除储存buffer即可。
 
试剂盒中提供优化的上样buffer和洗脱buffer,可以得到理想结果,buffer的量足够与25个离心柱配套使用,无需费时自行配制。
 
■ 产品特点
· 可有效、特异性地富集所有种类的磷酸肽——磷酸化酪氨酸,磷酸化丝氨酸,磷酸化苏氨酸
· 使用方便的预装柱
· 在质谱分析中获得更高的灵敏度
 
■ 应用
富集磷酸肽
 
■ 实验例
磷酸肽离心柱
上图为使用本制品离心柱纯化β-酪蛋白磷酸肽的结果。首先使用trypsin(测序级别)消化β-酪蛋白,消化产物以1:1的比例用Loading Buffer稀释,然后使用本离心柱进行纯化,后用Elution Buffer进行洗脱,产物冻干后溶解在0.1% TFA水溶液中(v/v)。图A是反相HPLC(RP-HPLC)检测粗品蛋白质消化液的结果,图B是对洗脱液(纯化出了磷酸肽)的检测,图C是对去磷酸化样品洗脱液的检测。洗脱的组分使用XTerra RP18 柱 (5 μm,4.6 x 150 mm) 经RP-HPLC进行分离, 在215 nm进行紫外检测 (溶剂A: 0.1% TFA 水溶液[v/v],溶液B: 0.1% TFA乙腈溶液 [v/v]). 对图B中收集到的两个磷酸肽组分进行 MALDI分析。
 
 
 
产品详情请点击:磷酸肽离心柱
 
 

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磷蛋白富集试剂盒酶试剂盒Takara

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磷蛋白富集试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635624 Phosphoprotein Enrichment Kit 6 Preps ¥4,262 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635666 Phosphoprotein Enrichment Starter Kit 1 Purification ¥956 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635626 Phosphoprotein Kit-Buffer A 500 ml ¥2,173 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
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Code No. 产品名称
635624   Phosphoprotein Enrichment Kit
635666   Phosphoprotein Enrichment Starter Kit
635626   Phosphoprotein Kit – Buffer A
 
■ 产品描述
本制品基于亲和原理,为从哺乳动物细胞和组织中提取磷酸化蛋白质提供了有效方法。富集试剂盒中包含了一整套的buffer和6个高结合力的柱子,用于富集胞质中和膜结合的磷酸化蛋白质,无需考虑例如丝氨酸、酪氨酸或苏氨酸等的氨基酸修饰。
 
这种富集方法的优势:
· 实验操作快速,从细胞到样品纯化的平均时间少于2 h。
· 操作简单直接,包括4步,将提取/上样buffer加到细胞或组织沉淀中来提取细胞总蛋白质,
   然后将提取产物加到亲和纯化柱上,洗涤,最后使用不含清洁剂的Elution Buffer将结合的磷酸化
   蛋白质洗脱下来。
 
磷蛋白富集试剂盒
 
· 一种Buffer多个用途,Extraction/Loading Buffer可以用于蛋白质提取和纯化步骤,
   而不需要更换缓冲液,这样便节省了时间也防止样品丢失。
· 实验过程是非变性的,所以整个过程中磷酸化蛋白质是保持折叠构象的,包括提取和洗脱的步骤。
 
每个纯化柱的最大结合能力约为4 mg磷酸化蛋白质。
 
高选择性富集磷酸化蛋白质
本富集试剂盒可以用于任何类型的哺乳动物细胞。已做过测试的细胞系包括NIH 3T3,HEK 293,HeLa,Cos-7和Jurkat细胞。富集效率很高,已经过Western Blotting分析证实。通过使用磷酸盐比色检测法,可以发现大部分的磷酸化蛋白质都在洗脱液中,在洗涤步骤的组分中只检测到痕量,可以忽略。
使用本试剂盒得到的磷酸化蛋白质是浓缩液,可以使用多种不同的方法进行分析,包括质谱、二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)等。
 
■ 特点
· 非变性条件下操作,可保持蛋白质的构象和溶解性
· 适用于质谱和2D-PAGE等多种下游应用
· 提高磷酸化检测实验的灵敏度
 
■ 应用
· 质谱样品制备
· 磷酸化分析
· 2D-PAGE样品制备
 
■ 实验例
磷蛋白富集试剂盒
使用本制品可以高效富集磷酸化蛋白质。提取HEK 293细胞的总蛋白质,取大约3 mg加入到本制品提供的磷酸化蛋白质亲和纯化柱上。Lane1是提取产物,Lane2是流穿液,Lane3是洗涤组分,Lane4是洗脱组分,然后分别使用特异性结合磷酸化AKT、PTEN和GSK3β蛋白质的抗体经Western Blotting检测,结果分别如图A、B、C所示,可以看出在洗脱液部分清晰地检测到了磷酸化蛋白质。请注意,样品在凝胶上样之前没有被稀释或浓缩。
 
 
产品详情请点击:磷蛋白富集试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-12 10:55:07

磷蛋白磁珠试剂盒酶试剂盒Takara

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磷蛋白磁珠试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635641 TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit Each ¥5,651 磷蛋白磁珠试剂盒 磷蛋白磁珠试剂盒 磷蛋白磁珠试剂盒
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Code No. 产品名称
635641   TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit
 
■ 产品描述
本产品结合了TALON-磷酸化蛋白质富集试剂盒的磷酸特异性和磁珠分离法的便利性,与磁力架搭配使用,可为从哺乳动物细胞和组织中提取mg量的磷酸化蛋白质提供了简单快速的基于金属亲和的方法。
 
分离胞质蛋白质和膜结合蛋白质
试剂盒中包含磷酸化蛋白质富集磁珠和一整套的buffer,能够对含有磷酸化氨基酸侧链(包括丝氨酸,酪氨酸或苏氨酸)的所有类型磷酸化蛋白质(包括细胞质蛋白质和膜结合蛋白质)进行组特异性富集。
 
提取/上样buffer中含有非离子型去污剂用于提取胞内蛋白质,洗涤buffer和洗脱buffer不含去污剂。如果需要,可以使用pH9.0的buffer洗脱磷酸化蛋白质,这对有些类型的下游应用更加合适。。
 
小体积洗脱液的微量蛋白质纯化
试剂盒中的磁珠是以5%悬液的形式提供的,已经证实每ml悬液可结合400 μg的α-酪蛋白。磁珠的用量需要根据起始样品的浓度进行调节,富集的磷酸化蛋白质可以通过小体积的洗脱液(50-200 μg)洗脱,以便获得较高浓度的产物。
 
对磷酸化蛋白质的高选择性
在细胞的所有蛋白质中,只有少部分蛋白质会被磷酸化,因此在进行研究之前对磷酸化蛋白质进行富集是非常有必要的。TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可用于任何种类的哺乳动物或组织样品,实际得到的磷酸化蛋白质的产量根据细胞系的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 用于微量磷酸化蛋白质纯化的金属亲和方法,操作简单
· 可以从任意种类的细胞或组织样品中简便快速的进行富集操作
· 非变性的实验条件维持了蛋白质的构象和溶解性
· 洗脱得到的产物是小体积应用的理想选择
 
■ 应用
提取和富集所有种类的磷酸化蛋白质
 
■ 实验例
磷蛋白磁珠试剂盒
使用TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可以高效富集磷酸化蛋白质。使用含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂(10 mM氟化钠)的提取/上样buffer从HEK 293细胞中提取蛋白质,然后与200 μl的磁珠混悬液室温混合30 min,洗涤、洗脱。将各组分电泳并使用对应的磷酸化蛋白质特异性抗体(图A是AKT (Ser 473),图B是P-AKT (Thr 308) ,图C是P-PTEN (Ser 380) ,图D是P-GSK3 beta (Ser 9))做Western Blotting检测,Lane1是提取产物,Lane2是流穿液,Lane3是洗脱液。图D的51 kDa条带是由于抗体与P-GSK3a交叉反应的结果。
 
 
产品详情请点击:磷蛋白磁珠试剂盒
 
 

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Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate酶试剂盒Takara

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Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7101Q Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate 7 ml ¥190 Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
Takara T7101A Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate 250 ml ¥1,889 Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
Takara T7101B (A × 2) Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate 250 ml × 2 ¥3,590 Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
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■ 制品内容 (250 ml, for 2,500 cm2 of membrane)Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
Code No.: T7101A
Western BLoT Chemiluminescence Luminol/Enhancer Solution 125 ml
Western BLoT Chemiluminescence Peroxide Reagent 125 ml
 
■ 制品说明
本制品是辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物,特别适用于X感光底片成像法的Western印迹。本制品是Western BLoT HRP Substrate系列产品中的一个,在短时间曝光下即可产生较强的高灵敏度信号,并且还具有信号持续时间长、可重复检测的优点。
 
■ 保存
4℃。
*在建议温度下保存,一年内用完。
 
■ 关联资料
Western Blotting实验操作指南:
点击图片下载
Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate
 
 

页面更新:2019-12-28 13:58:06

Western BLoT Quant HRP Substrate酶试剂盒Takara

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Western BLoT Quant HRP Substrate
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7102Q Western BLoT Quant HRP Substrate 7 ml ¥189 Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate
Takara T7102A Western BLoT Quant HRP Substrate 100 ml ¥2,409 Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate
Takara T7102B (A × 2) Western BLoT Quant HRP Substrate 100 ml × 2 ¥4,578 Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate Western BLoT Quant HRP Substrate
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■ 制品内容 (100 ml, for 1,000 cm2 of membrane)Western BLoT Quant HRP Substrate
Code No.: T7102A
Western BLoT Quant Luminol/Enhancer Solution 50 ml
Western BLoT Quant Peroxide Reagent 50 ml
 
■ 制品说明
本制品是辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物,特别适用于CCD成像系统的Western印迹。使用本制品产生的信号强度与蛋白浓度在较宽广的范围内呈线性关系,能很好地利用CCD检测方法的高线性、宽动态范围的特点。使用本制品产生的信号不仅强,而且持续时间长,再结合低背景的特点,非常适用于长时间曝光来检测低丰度的蛋白质。本制品也适用于X光片法检测,但X光片法的动力学范围相对于CCD检测法的小,得到的数据结果定量性低。
 
■ 保存
4℃。
*在建议温度下保存,一年内用完。
 
■ 关联资料
Western Blotting实验操作指南:
点击图片下载
Western BLoT Quant HRP Substrate
 

页面更新:2019-12-28 14:01:40

Western BLoT Hyper HRP Substrate酶试剂盒Takara

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Western BLoT Hyper HRP Substrate
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7103Q Western BLoT Hyper HRP Substrate 7 ml ¥190 Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate
Takara T7103A Western BLoT Hyper HRP Substrate 100 ml ¥2,929 Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate
Takara T7103B (A × 2) Western BLoT Hyper HRP Substrate 100 ml × 2 ¥5,566 Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate Western BLoT Hyper HRP Substrate
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■ 制品内容 (100 ml, for 1,000 cm2 of membrane)Western BLoT Hyper HRP Substrate
Code No.: T7103A
Western BLoT Hyper Luminol/Enhancer Solution 50 ml
Western BLoT Hyper Peroxide Reagent 50 ml
 
■ 制品说明
本制品是辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物,特别适用于低丰度蛋白质检测的Western印迹。使用本制品产生的信号不仅强,而且持续时间长,再结合低背景的特点,非常适用于长时间曝光来检测低丰度的蛋白质。另外,使用本制品产生的信号强度与蛋白浓度在较宽广的范围内呈线性关系,可准确地对蛋白质进行定量。Western BLoT Hyper HRP比Western BLoT Quant HRP Substrate更灵敏,不仅适合于检测低丰度蛋白质,也适用于一抗量少、需要稀释倍数大;或者一抗与抗原蛋白质结合能力弱等要求高灵敏度检测的情况。本制品也适用于X光片法检测,但X光片法的动力学范围相对于CCD检测法的小,得到的数据结果定量性低。
 
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Western Blotting实验操作指南:
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Western BLoT Hyper HRP Substrate
 
 

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Western BLoT Immuno Booster酶试剂盒Takara

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Western BLoT Immuno Booster
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7111Q Western BLoT Immuno Booster 20 ml each ¥200 Western BLoT Immuno Booster Western BLoT Immuno Booster Western BLoT Immuno Booster
Takara T7111A Western BLoT Immuno Booster 250 ml each ¥2,188
¥1,750
Western BLoT Immuno Booster Western BLoT Immuno Booster Western BLoT Immuno Booster

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容
Code No.: T7111A
Western BLoT Immuno Booster Solution 1 250 ml
Western BLoT Immuno Booster Solution 2 250 ml
 
■ 制品说明
Western BLoT Immuno Booster包含增强抗原-抗体互作的组份。本制品适用于包括Western印迹和ELISA在内的各种免疫检测,可提高最终的检测灵敏度(从数倍到数十倍)。本制品不影响辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)活性,因此,兼容于交联二抗的酶和使用任何一种检测方法(如:比色检测法或发光检测法)。需要获得用于Western印迹的高检测信号时,请将本制品与Western BLoT HRP Substrate Series结合使用进行HRP化学发光检测。
 
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Western BLoT Rapid Detect v2.0酶试剂盒Takara

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Western BLoT Rapid Detect v2.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7122A Western BLoT Rapid Detect v2.0 50 Rxns ¥4,243 Western BLoT Rapid Detect v2.0 Western BLoT Rapid Detect v2.0 Western BLoT Rapid Detect v2.0
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■ 制品内容 Western BLoT Rapid Detect v2.0
1.IgG Detector Solution v2 (HRP labeled) 250 μl
2.10×Dilution Buffer v2 60 ml
3.Enhancer for Mouse IgG v2 250 μl
4.Marker Detection Reagent v2 50 μl
 
■ 制品说明
本制品是以HRP-labeled IgG Detector替代标记的二抗, 用于Western印迹实验中检测一抗。本制品的主要组份是IgG Detector,一个粒子表面固定约100个蛋白分子, 能与抗体的Fc片断相结合,并已标记上了约50个HRP分子。本制品具有快速、灵敏度高、信号较强、能同时检测多种一抗的特点。另外,试剂盒中自带的Dilution Buffer含有封闭组份,具有使用方便和灵敏度高的优点。
本制品与Western BLot HRP Substrate Series产品(化学发光底物)配套使用,可高灵敏度和快速地进行Western印迹检测。
 
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-20℃
注意 : IgG Detector Solution v2 (HRP labeled)请一直在-20℃保存,使用前再取出,使用完后立即放回-20℃。不要在4℃或室温条件下保存。
 
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Western BLoT Rapid Detect v2.0
 
 

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Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin)酶试剂盒Takara

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Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7131A Western BLoT Blocking Buffer (Fish Gelatin) 1 L ¥1,382
¥1,106
Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin) Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin) Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容
Western BLoT Blocking Buffer (Fish Gelatin) 1 L
 
■ 制品说明
本制品是在TBS-T Buffer中添加了鱼源明胶的封闭缓冲液。由于封闭缓冲液是鱼源的,同哺乳动物来源的奶粉和BSA相比,不会与哺乳动物来源抗体出现非特异性交叉反应。使用本制品可抑制背景,能够明确地检测出特异性抗原。*
本制品是即用型试剂,无需稀释,可直接用于封闭Western印迹膜;也可作为一抗、HRP或AP标记二抗的稀释液。
*:· 不是所有Western印迹都可以通用一种封闭试剂。需要进行预实验确定实验体系中最适封闭试剂。一般情况下使用鱼明胶作为封闭试剂时,可抑制背景,能够明确地检测出抗原。   
· 另一方面,因抗原不同,有时抗原被明胶遮蔽,导致检测灵敏度下降。这种情况下使用BSA、酪蛋白等其他封闭试剂可获得较好的检测结果。
· 另外,需要使用Protein Free的封闭缓冲液时,请使用Western BLoT Blocking Buffer (Protein Free)(Code No. T7132A)。


 
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