DiSH Kit 杂交瘤细胞筛选与克隆 品牌:Enzo


品牌:Enzo
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ENZ-71001-0001

1 Kit

DiSH Kit                                                      杂交瘤细胞筛选与克隆            品牌:Enzo


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DiSH™ Kit是新开发的单克隆抗体筛选系统,试剂盒中含有获得专利的Sp2ab骨髓瘤细胞系,可以使形成的杂交瘤细胞分泌特异性IgG,也可将抗体表达在细胞表面,

表面结合抗体可以使抗原特异性杂交瘤细胞被标记。一旦标记,这些杂交瘤细胞可以通过流式细胞仪或者磁珠进行筛选。从分选完杂交瘤细胞至获得首轮筛选结果,仅需16天,

节省75%时间,大大提高了高度特异性单抗的检测效率。无需有限稀释法,降低实验工作量。

基因修饰的骨髓瘤细胞既可以形成表达分泌型抗体的杂交瘤,也可以形成表达在细胞表面抗体的杂交瘤。

基因编辑后克隆基因型确认酶试剂盒Takara

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基因编辑后克隆基因型确认
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632611 Guide-it Genotype Confirmation Kit 100 Rxns ¥5,910 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
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          基因敲除    
          基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认            
  基因敲入        
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基因编辑后克隆基因型确认
Guide-it Genotype Confirmation Kit
每个细胞中大部分基因都拥有两个等位基因。CRISPR/Cas9基因编辑可以对特定基因的一个或两个等位基因引入插入突变或缺失突变(indels)。Guide-it Genotype Confirmation Kit提供了一种简单的方法,用于确认特定克隆是一个等位基因突变(单等位基因),还是两个等位基因突变(双等位基因突变),或者是未发生变化(野生型)。实验操作中涉及到从Cas9 和single guide RNA (sgRNA)处理的细胞中扩增靶点序列。扩增出的序列被用在重组Cas9和相同的sgRNA的体外剪切反应。剪切产物通过琼脂糖凝胶电泳,确定基因型。
基因编辑后使用该试剂盒,加快了在大量克隆中筛选所需基因型的进程。每个试剂盒包含足够的试剂,用于100次提取、扩增和剪切反应。
 
产品特点:
· Cas9 和sgRNA体外剪切实验,用于确定单等位基因突变和双等位基因突变
· 包括高纯度的重组Cas核酸酶,用于体外剪切实验
· 流程化的操作步骤,使用来自于细胞的目的基因组DNA直接扩增
 
产品应用:
· CRISPR/Cas9 基因编辑
· CRISPR/Cas9 基因编辑后,单等位基因突变和双等位基因突变的确定
 
实验例:
基因编辑后克隆基因型确认
A图:使用Cas9和靶向C4BPB 基因的sgRNA对HEK 293细胞进行基因编辑。使用Guide-it Genotype Confirmation Kit对获得的15个单细胞克隆进行C4BPB位点的基因型鉴定。图中左侧的野生型 (WT),单等位基因 (M),双等位基因 (B)在分析中作为对照。结果表明克隆1,4,10,12是野生型;克隆2是单等位基因突变;以及克隆3,5-9,11和13-15是双等位基因突变。
B图:对A图中挑选的克隆进行测序分析。每个结果中,小写字母代表的是野生型(WT)序列。对于那些在A图中使用基因型鉴定方法确认的双等位基因突变的克隆,进一步测序分析表明克隆7是杂合子,克隆9和11是纯合子。在克隆2中,检测到3种不同的等位基因,可能是因为在HEK 293细胞系中出现拷贝数变异。
(数据来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
 
Code No. 产品名称
632611   Guide-it Genotype Confirmation Kit
 
产品详情请点击:基因编辑后克隆基因型确认
 
 

页面更新:2020-03-19 08:35:48

DNA pMW 219 载体 DNA pMW 219

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pMW 219 DNADNA pMW 219 载体                              DNA pMW 219

克隆载体


原理

  pMW219 DNA由 Cosmid lorist6、质粒 pBR322、质粒 pSC101、质粒 pUC19 的 DNA 片段构建而成。

  下图展示了限制性内切酶图谱。


DNA pMW 219 载体                              DNA pMW 219

par:质粒稳定化区域
ori:DNA复制开始区域
rep:DNA复制调节基因
lacZ:β-半乳糖苷酶基因
Kmr:卡那霉素抗性基因


优点、特色


● 可用于克隆在多拷贝质粒里难以克隆的基因
● (DNA代谢相关的蛋白编码基因,如,聚合酶、连接酶等基因)
● 在同一菌株内拥有pBR系、pUC系的DNA复制开始区域的质粒里,克隆了基因A的同时也想表达其他基因B时,可作为克隆基因B

● 的克隆载体
● 可用于克隆多克隆位点Hind III、Xba I、BamH I、Sma I、Xma I、Kpn I、Sac I、EcoR I的唯一切割部位
● 在多克隆位点里克隆基因,使用宿主大肠杆菌lacZ、N末端有缺陷的菌株(如JM109)并添加X-Gal和IPTG,重组体容易识别白色

● 菌落旁边蓝色的非重组体
● 可在卡那霉素培养基上选择转化的大肠杆菌


来源:有质粒 pMW219 的E. coli JM109

M.W.: 2.55×106 Da(3,923 bp)

试剂制备:有质粒 pMW219 的E. coli JM109 通过溴化乙锭——氯化铯密度梯度离心分离

形状: 10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0), 1 mmol/L EDTA

浓度: 0.1~0.5 μg/μL

纯度:A260/A280 ≒ 1.8(此数值可能因批次不同有异)

碱基配列:EMBL, GenBank, DDBJ Accession No. AB005478(pMW219)

参考:pMW218・219 DNA的限制性内切酶图




参考文献:


  • Bernardi, A. and Bernardi, F. : Nucleic      Acids Res., 12, 94151984

  • Yamaguchi, K. and Masamune, Y. : Mol. Gen.      Genet., 200, 3621985

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
310-02571 DNA pMW 219
 DNA pMW 219载体
10μg

抗Iba1,山羊多克隆抗体 小胶质细胞标记

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  • 参考文献

抗Iba1,山羊多克隆抗体抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

小胶质细胞标记

Iba1是一种约17 kDa的蛋白,在神经系统小胶质细胞中特异性表达,经常被用作小胶质细胞标记物。 本产品是识别Iba1的山羊多克隆抗体。



◆应用实例 1:免疫组织染色(荧光染色)

■ Iba1

■ 

■ Merge

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

数据提供:国立长寿医疗研究中心榊原老师

样品:阿尔茨海默病模型小鼠(APPNL-G-F 小鼠)大脑新皮层冰冻切片

一抗:抗Iba1,山羊多克隆抗体(1:1,000)

二抗:Alexa Fluor488标记抗山羊IgG

Aβ染色:0.001 % FSB溶液(淀粉样蛋白染色荧光探针)

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记


数据提供:创价大学理工学部中嶋老师

样本:大鼠(左)以及小鼠(右)大脑皮质冰冻切片

一抗:抗Iba1,山羊多克隆抗体(1:250)

二抗:Alexa Fluor488标记抗山羊IgG

◆应用实例 2:免疫组织染色(DAB染色)

富士胶片和光产品:011-27991

其他公司产品A

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记


样品:小鼠脑额叶石蜡切片

一抗:抗Iba1,山羊(1:1,000)

二抗:抗山羊IgG,生物素标记

抗原激活:10 mM柠檬酸盐缓冲液(pH 6),90°C,处理10 min


◆应用实例3:蛋白印迹


抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记


数据提供:创价大学理工学部中嶋老师

样品:大鼠原代培养小胶质细胞  10 μg

样品:大鼠原代培养神经元 10 μg

样品:大鼠原代培养星形胶质细胞  10 μg

样品:大鼠大脑皮层  100 μg

一抗:抗Iba1,山羊(1:1,000)

二抗:抗山羊IgG,HRP标记


◆免疫荧光(IF)实验效果

011-27991 Anti Iba1, Goat

(本产品)

A公司

山羊源Anti Iba1抗体

Rat brain

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

Mouse brain

抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记 抗Iba1,山羊多克隆抗体                              小胶质细胞标记

◆抗体信息


抗原

合成肽(Iba1 C端序列相同)

储存缓冲液

TBS

亚型

山羊IgG

物种交叉性

大鼠、小鼠

抗体浓度

0.5-0.6 mg/mL

应用

免疫组化(冰冻切片)1:250-1,000
免疫组化(石蜡切片)1:250-1,000
免疫印迹 1:1,000

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

包装

011-27991

Anti Iba1, Goat

抗Iba1,山羊源多克隆抗体

免疫化学用

100 μL

◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

包装

019-19741

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)

免疫化学用

50 μg

013-27691

Anti Iba1, Rabbit(for Paraffin Section)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白兔源抗体(石蜡切片)

免疫化学用

50 μg

016-26461

Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素)

免疫化学用

100 μL

013-26471

Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635)

免疫化学用

100 μL

016-20001

Anti Iba1,Rabbit (for Western Blotting)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹)

免疫化学用

50 μg

012-26723

Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24)
抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)(鼠源)

免疫化学用

10 μL

017-27591

Anti Human Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP27)
抗人 Iba1,单抗(NCNP27)

免疫化学用

10 μL

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

突变克隆试剂盒酶试剂盒Takara

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息。

突变克隆试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 638909 In-Fusion HD Cloning Plus 10 Rxns ¥3,788 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638910 In-Fusion HD Cloning Plus 50 Rxns ¥15,839 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638911 In-Fusion HD Cloning Plus 100 Rxns ¥27,272 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638912 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 8 Rxns ¥3,795 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638913 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 24 Rxns ¥9,573 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638915 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 96 Rxns ¥19,758 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638916 In-Fusion HD Cloning Plus CE 10 Rxns ¥4,232 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638917 In-Fusion HD Cloning Plus CE 50 Rxns ¥16,630 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638918 In-Fusion HD Cloning Plus CE 100 Rxns ¥26,058 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638920 In-Fusion HD Cloning Plus 96 Rxns ¥26,029 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638956 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 96 Rxns ¥12,295 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638955 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 32 Rxns ¥5,352 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638954 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 8 Rxns ¥1,745 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638947 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 10 Rxns ¥1,155
¥866
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638948 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 50 Rxns ¥5,204
¥3,903
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638949 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 250 Rxns ¥20,747
¥15,560
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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使用In-Fusion Cloning Kits可以进行PCR方法的DNA定点突变。一个精简的反应流程,就可以完成增加、删除或替换DNA区段,插入点突变,插入限制性位点等实验。
In-Fusion方法通过设计引物将突变(碱基变化、删除、增加)引入。以环形质粒作为模板,通过反向PCR即可生成带有突变区域的线性载体。这个线性载体可以通过In-Fusion再进行环化。试剂盒已经附带了高效感受态细胞。
 
产品特点
· 高效突变:体外定点突变,效率≥90%。
· 多用途:一个体系,可以进行替换、增加或删除最多12个碱基。
· 更少步骤:一个PCR反应即可;无需纯化或PCR产物的体外消化;无需连接。
· 方便性:试剂盒已附带高效感受态细胞。
 
突变克隆试剂盒点击图片查看相关资
 
 
产品详情请点击:突变克隆试剂盒
 
 

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