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ISHR Starting Kit
in situ Hybridization用试剂
本产品为首次使用in situ Hybridization（ISH）法的研究者提供石蜡包埋组织切片专用的练习试剂盒。包含RNA探针制备用试剂，ISH用试剂以及对照探针用的模板DNA，组织切片等。研究者也可以同时制备准备的ISH的样本。
◆使用次数
载玻片~20个×2次
◆试剂盒内容
RNA探针制备用试剂
制备对照探针用模板DNA
● 小鼠神经生长因子（NGF）基因（1 μg/μL）
● 反义链用··2 μL
● 正义链用······2 μL
强碱分解缓冲液 室温保存
● 0.1 mol/L 碳酸钠（pH10.2）··800 μL
Ethachinmate
● Ethachinmate················10 μL
● 3 mol/L 醋酸钠（pH5.2）·····100 μL
RNA Synthesis Set
● 5×RNA Polymerase Buffer・・20 μL
● 250 mmol/L NaCl・・・・・・・10 μL
● 10 mmol/L rATP・・・・・・・・5 μL
● 10 mmol/L rGTP・・・・・・・・5 μL
● 10 mmol/L rCTP・・・・・・・・5 μL
● 10 mmol/L rUTP・・・・・・・・5 μL
● RNaselnhibitor・・・・・・・・5 μL
● SP6 RNA Polymerase・・・・・ 5 μL
● T7 RNA Polymerase・・・・・・5 μL
● T3 RNA Polymerase・・・・・・5 μL
● DNase（RT Grade）・・・・・・5 μL
● H2O・・・・・・・・・・・・500 μL
对照用组织切片
● 小鼠（雄性）成年 颌下腺 4个
In situ Hybridization用试剂（载玻片~20个×2次）
试剂名 |
组成 |
|
ISHR 1 |
PBS Buffer・・800 mL×2个 |
0.1 mol/L NaCl, 10 mmol/L 磷酸钠（pH 7.4） |
ISHR 2 |
PBS（Glycine）Buffer・・・400 mL×1个 |
0.1 mol/L NaCl, 10 mmol/L 磷酸钠（pH 7.4），2 mg/mL Glycine |
ISHR 3 |
Acetylation Buffer・・・・800 mL×1个 |
0.1 mol/L Triethanolamine（pH 8.0） |
ISHR 4 |
Acetic Anhydｒide・・・・ 1 mL×2个 |
Acetic Anhydride |
ISHR 5 |
4×SSC・・・・・・・・・・・1 L×2个 |
0.6 mol/L NaCl, 0.06 mol/L Sodium citrate |
ISHR 6 |
Proteinase K Solution・・ 200 μL×1个 |
10 mg/mL Proteinase K |
ISHR 7 |
Hybridization Buffer・・・93 μL×8个 |
50％ Formamide, 2×SSC, 1 μg/μL tRNA, 1 μg/μL Salmon sperm DNA, 1 μg/μL BSA, 10％ Dextran sulfate |
ISHR 8 |
1.2mol/L DTT Solution・・100 μL×1个 |
1.2 mol/L DTT |
ISHR 9 |
NTE Buffer・・・・・・・・800 mL×1个 |
0.5 mol/L NaCl, 10 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）, 1 mmol/L EDTA |
ISHR 10 |
RNase A Solution・・・・0.40 mL×2个 |
10 mg/mL RNase A |
ISHR 11 |
0.1×SSC・・・・・・・・・・600 mL×2个 |
15 mmol/L NaCl, 1.5 mmol/L Sodium citrate |
※本产品不含有以下试剂：
固定剂，组织包埋试剂，载玻片涂层试剂，乙醇，二甲苯，甲酰胺，地高辛（DIG）标记和检测试剂，染色试剂，放射自显影试剂。
（※「ISHR 4」是特定麻药的原料和精神药物的原料）
<使用时注意>
根据切片的大小和数量，所需试剂量会变化。请购买单买短缺的单品。
参考文献
[1] Noji, S. et al. : Nature, 350, 83 （1991）.
[2] Pardue, M. L. : “In situ hybridization in Nucleic acid hybridization”, IRL Press （1985）.
[3] Noji, S., Yamaai, T., Koyama, E. and Taniguchi, S. : Radioisotopes, 38, 366 （1989）.
[4] Noji, S., Takahashi, N., Nohno, T., Koyama, E., Yamaai, T., Muramatsu, M. and Taniguchi, S. :Acta. Histochem.Cytochem.,
23, 353 （1990）.
[5] Kiyama, H., Emson, P. C. and Tohyama, M. :Neurosci. Res., 9, 1 （1990）.
[6] 中根一穂 : 「In situ ハイブリダイゼーション手法」（学際企画）（1989）.
[7] 野村慎太郎 : 実験医学, 7（13）（増刊）（1989）.
[8] 野地澄晴編 : 実験医学別冊 「免疫染色・in situ ハイブリダイゼーション」 （1997）.
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 314-02611 | ISHR启动试剂盒 ISHR Starting Kit |
1 kit | － |
