透明室 用于组织透明化样品的成像室

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用于组织透明化样品的成像室透明室                              用于组织透明化样品的成像室

透明室

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

◆透明化工序(使用SeeDB时)


1. 在4°C下用4%多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。

2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管4~8 h(月4 rpm)。易损的样品

3. 切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。

4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。


透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化


从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。

◆安装方法


1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

◆观察


1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用

*各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。

*(校正公式请参阅参考文献)。

◆观察实例


透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

◆产品列表

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

294-35631

See Through Chamber, 0.3 mm thick
透明室,0.3 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

291-35641

See Through Chamber, 0.5 mm thick
透明室,0.5 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

295-35661

See Through Chamber, 1.0 mm thick
透明室,1.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

292-35671

See Through Chamber, 2.0 mm thick
透明室,2.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

299-35681

See Through Chamber, 3.0 mm thick
透明室,3.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent



◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

规格

291-79601

SeeDB Trial Kit
SeeDB实验试剂盒

1 kit

组织透明化

193-18391

SeeDB:20w/v% Fructose Solution
SeeDB:20w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

196-18401

SeeDB:40w/v% Fructose Solution
SeeDB:40w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

193-18411

SeeDB:60w/v% Fructose Solution
SeeDB:60w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

190-18421

SeeDB:80w/v% Fructose Solution
SeeDB:80w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

197-18431

SeeDB:100w/v% Fructose Solution
SeeDB:100w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

194-18441

SeeDB
深层透明化试剂

250 mL

组织透明化

160-16061

Paraformaldehyde
多聚甲醛

100 g

组织固定用

162-16065

500 g

164-25511

1×PBS(-)
1×PBS(-)平衡缓冲液

5 L

生化学用

045-33421

DiIC18(3)
细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

细胞生物学用

041-33423

50 mg

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


参考文献



1)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T. : Nat Neurosci ,6 (8),1154 (2013).

2)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T.: Bio-protocol 4(3), e1042 (2014).

3)Ke, M. T., and Imai, T. : Curr Protoc Neurosci ,66,2.22.1-2.22.19 (2014).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
294-35631  See Through Chamber, 0.3mm thick
透明室,0.3mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
291-35641  See Through Chamber, 0.5mm thick
透明室,0.5mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
295-35661  See Through Chamber, 1.0mm thick
透明室,1.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
292-35671  See Through Chamber, 2.0mm thick
透明室,2.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
299-35681  See Through Chamber, 3.0mm thick
透明室,3.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent

CUBIC 组织透明化试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

CUBIC 组织透明化试剂CUBIC                              组织透明化试剂

具有单细胞分辨率的全脑/全身成像

CUBIC                              组织透明化试剂

*数据由Etsuo A Susaki博士和

Hiroki R. Ueda, RIKEN博士提供

  Hiroki R. Ueda博士等人开发了一种简单、高效、可扩展的脑/体透明化方法和成像/计算分析方法,CUBIC(clear, unobstructed brain/body imaging cocktails and computational analysis)。

  CUBIC是一种基于亲水溶液(ScaleCUBIC Solutions)的、具有荧光保护、高性能及无需特殊设备等特点的组织透明化方法。

  它可以利用LSFM技术实现可重复的整个器官和全身的透明化以及快速3D成像。CUBIC还提供3D图像的处理和分析,以提取生物信息。

  所以,CUBIC提供了具有单细胞分辨率和图像信息学的全器官/全身成像平台,使广大用户能够针对细胞和器官层进行多个样品的实验。

◆CUBIC的优点


● 易于使用

● 无需特殊设备

● 支持后续的2D H&E染色

● 高透明度

● 适用于多种器官

● 兼容IF(免疫荧光),FP(荧光蛋白)和其他荧光标记

◆CUBIC的应用


CUBIC                              组织透明化试剂


**一般情况下,可使用比例为7:3的固定溶液1和2(RI~1.49)混合溶液。

CUBIC                              组织透明化试剂

图1.使用Scale CUBIC Solution透明化前后小鼠整体器官的透射图像

CUBIC                              组织透明化试剂

图2.使用Scale CUBIC Solution透明化前后小鼠2mm切片的透射图像

◆ CUBIC应用于荧光蛋白表达


CUBIC                              组织透明化试剂

CUBIC                              组织透明化试剂

CUBIC                              组织透明化试剂

CUBIC                              组织透明化试剂

图3CAG-EGFP Tg小鼠(8w雄性)的全脑,全心脏和解剖肝脏的LSFM成像

◆CUBIC应用于病理学方法中


  数据来源于S. Nojima.et al. : Scientific Reports ,7,9269 (2017)/已被收录


CUBIC                              组织透明化试剂

图4.使用CUBIC透明化各种人体器官

使用CUBIC的石蜡样品的组织透明化和3D成像


CUBIC                              组织透明化试剂

图5.使用CUBIC的病理标本的组织透明化和3D成像




CUBIC 鱼类透明化案例


数据提供:东京海洋大学 海洋生物资源学院 二见邦彦老师


CUBIC                              组织透明化试剂

图6使用CUBIC的鱼类透明化案例

实验步骤参见参考文献5)

CUBIC                              组织透明化试剂

图7使用CUBIC处理后的鱼类内脏切片案例

-CUBIC处理后,切片5 μm,可用Mayer’s Hematoxylin染色-

CUBIC                              组织透明化试剂

图8用抗体观察CUBIC处理后斑马鱼鳃的内脏片

◆CUBIC 甲壳类(螃蟹·鼠妇)透明化案例


数据提供:浜松医科大学 医学分光应用寄附研究生 绀野在老师,冈崎茂俊老师


CUBIC                              组织透明化试剂

图9使用CUBIC的甲壳类透明化案例(上:螃蟹,下:鼠妇)

实验步骤参见参考文献6)

CUBIC                              组织透明化试剂

图10观察CUBIC处理后(PI染色)甲壳类的全身(左:螃蟹,右:鼠妇)

实验步骤参见参考文献6)

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

注意:

  列出的产品仅供实验室研究使用,不得用于药物、食品或人体。

组织透明化配套耗材:成像用透明室

CUBIC                              组织透明化试剂

CUBIC trial manual.pdf

CUBIC                              组织透明化试剂

CUBIC                              组织透明化试剂

透明化试剂方法选择流程

CUBIC trial manual

CUBIC                              组织透明化试剂

组织透明试剂化系列

组织透明化试剂Q&A ver1.0

Tissue clearing reagent Q&A ver1.0

Q组织透明化的原则

A:组织透明化通常是按下面的步骤进行的:

A:(a)固定 (b)透化 (c)脱色 (d)折射率匹配

 

Q:组织透明化的优势

A:目前大多数可用的透明化技术,都是通过编码荧光报告蛋白或者用荧光标记抗体进行后标记,从而可视化

A:组织中特定的蛋白。组织透明化成为了具有单细胞分辨率的组织3D成像中重要的一环。

 

Q:透明化技术的比较

A:下面是水性的透明化技术。

CUBIC                              组织透明化试剂


CUBIC                              组织透明化试剂

A:SeeDB(基于果糖的方法)在一些应用中有一定优势。因为SeeDB不含去垢剂,所以对于透明化DiI(细胞膜

A:红色荧光探针,一种神经示踪剂)标记的样品和使用光电关联显微镜(CLEM)的情况下,SeeDB有着一定优

A:势。另外SeeDB会产生自体荧光,有时候会对辨认未标记的神经元结构(如神经毡)起着一定帮助。

A:SeeDB2是为使用高NA物镜的高分辨率成像而优化的技术;因此,当处理较大的组织时,CLARITY或者CUBIC

A:会是更好的选择。

 

Q:切片厚度的最大值和最小值?

A:您应该根据您的物镜的WD(工作距离)来决定切片的厚度。我们建议切片的厚度不要超过3mm。对于十分薄

A:且脆弱的样品,我们建议使用琼脂糖包埋。

A:使用CUBIC,可以让全器官、全身透明化和使用LSFM的快速3D成像具有可重复性。

 

Q:试剂盒成分

A:具体如下:

A:1. SCALEVIEW-S试剂盒(299-79001)适用于20份1-2 mm的切片样品

A:A:1) SCALEVIEW-S0——100 mL

A:A:2) SCALEVIEW-S1——100 mL

A:A:3) SCALEVIEW-S2——100 mL

A:A:4) SCALEVIEW-S3——100 mL

A:A:5) SCALEVIEW-S4——100 mL

A:A:6) SCALEVIEW-SMT——100 mL

 

A:2. CUBIC Trial Kit(290-80801)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) SCaleCUBIC-1 Solution——250 mL

A:A:2) SCaleCUBIC-2 Solution——250 mL

A:A:3) Mounting Solution 1——40 mL

A:A:4) Mounting Solution 2——40 mL

 

A:3. SeeDB试剂盒(299-79901)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) SeeDB:20w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:2) SeeDB:40w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:3) SeeDB:60w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:4) SeeDB:80w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:5) SeeDB:100w/v% Fructose Solution——50mL

A:A:6) SeeDB——50 mL

 

A:4. SeeDB2试剂盒(294-80701)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) Saponin(皂角苷)——5 g

A:A:2) SeeDB2G solution——50 mL

A:A:3) SeeDB2S solution——50 mL

A:A:4) PBS——50 mL

 

Q:样品的保存

A:SCALEVIEW-S处理的样品应在室温下保存2至3周。您可以在2至3周内观察SCALEVIEW-S透明化的样品中的

A:荧光信号。

A:CUBIC处理的样品应在室温下保存1周。您可以在1周内观察CUBIC透明化的样品中的荧光信号。

A:SeeDB2G处理的样品应在冰箱中保存1年,而SeeDB2S处理的样品则可在室温下保存1年。您可以在1年内观

A:察SeeDB透明化的样品中的荧光信号。

 

Q:抗体的荧光标记

A:应在进行透明化前就进行抗体的荧光标记。

 

Q:适用于SCALEVIEW-S的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

 

Q:适用于CUBIC的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Zeiss Lightsheet Z.1(Carl Zeiss)

 

Q:适用于SeeDB2的显微镜

A:Confocal(最好使用高NA的油浸镜头)

A:STED(Leica Microsystems)

A:SR-SIM(Carl Zeiss)

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Airyscan(Carl Zeiss)

A:HyVolution(Leica Microsystems)

A:Two-photon(最好使用复合浸没镜头)

A:Confocal(最好使用高NA的甘油浸镜头)

A:Light-sheet DLS(Leica,最好使用定制镜面的设备)

 

Q:重构

A:对于定量用途,我们建议使用Neurolucida系统(MBF)。我们同样测试了VAST Lite用于成像用途时的表

A:现。重构时也可以使用开源软件。例如,Vaa3d可以处理大量的拼接图像的数据。

 

Q:物镜推荐

CUBIC                              组织透明化试剂

 

Q:其他物种?其他器官?

A:对于昆虫样品和鱼类样品,建议选择CUBIC。

A:昆虫相关文献:Ohuma.et al.: Fish Pathology, 52(2), 96(2017).

A:鱼类相关文献:Konno and S.Okazaki .: Zoological Letters, 4:13(2018).

   

  对于多细胞球状体,选择SCALEVIEW-S会更好。

  https://www.nature.com/articles/s41598-018-29169-0

 

参考文献


[1] E. A. Susaki. et al. : Cell ,157(3),726(2014).

[2] K. Tainaka. et al. : Cell ,159(4),911(2014).

[3] E. A. Susaki. et al. : Nature Protocols ,10,1709(2015).

[4] S. Nojima. et al. : Scientific Reports ,7,9269 (2017).

[5] S. Ohnuma. et al.: Fish Pathology, 52(2), 96(2017).
[6] A. Konno and S. Okazaki.: Zoological Letters, 4:13(2018).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
290-80801 CUBIC Trial Kit
CUBIC试剂盒试用装
1 Kit 组织透明化试剂

SCALEVIEW®-S4 球状体·细胞用透明化试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂球状体·细胞透明化试剂

SCALEVIEW®-S4

SCALEVIEW®-S是组织透明化试剂。可通过使用SCALEVIEW®-S0 – SCALEVIEW®-SMt等六种产品进行组织透明化处理。

其中,可单独使用SCALEVIEW®-S4透明化球状体或细胞。只需将目标样品浸入SCALEVIEW®-S4即可。


◆特点


● 只需浸泡即可实现简单透明化

● 透明化耗时短(1日左右)

● 不需要特殊的设备

● 可配合荧光抗体标记和荧光素观察

◆T47D细胞球状体观察实例

Data by Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).


SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂

图1. SCALEVIEW®-S4透明化T47D细胞球体的图像示例(细胞核使用Hoechst染色)4

       使用共聚焦显微镜Z-堆叠获得的球状体图像。



SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂


2. T47D细胞球状体经诺考达唑处理后,使用组蛋白H3抗体的测量实例。

       通过SCALEVIEW®-S4的透明化处理,可观察药物施用对球状体表面和内部的影响。


◆操作步骤图示


SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂

◆SCALEVIEW®-S4 Neurosphere的观察实例

数据提供:

国立研究开发法人理化学研究所

脑神经科学研究中心细胞技能探索技术研究组/ 光量子工学研究中心生命光学技术研究组 滨裕先生、星田哲志先生、宫脇敦史先生

协助:olympus 株式会社



Neurosphere的观察实例

(※试剂使用量推荐前处理和透明化均为各试剂:1.2 mL。※荧光抗体标记基于AbScale方案。)


固定 前处理
灌注固定+固定
4%PFA/PBS(-)
【pH 7.6-7.8】
前处理1
SCALEVIEW®-S0
透明处理1
SCALEVIEW®-A2
透明处理2
8 M Urea Solution
透明处理3    SCALEVIEW®-A2 洗净
deScale Solution
4 ℃, 3 day 37 ℃, 4 hr 37 ℃, 4 hr

37 ℃,

12 hr

37 ℃, 4 hr 4 ℃, 6 hr

荧光抗体标记 透明化 观察

Blocking

1% Blocking Reagent(Roche)/

    PBS(-)

抗体标记【例:标记Iba1抗体】
AbScale Solution
洗净
AbScale Solution
再固定
4% PFA/PBS(-)【pH 7.6-7.8】
洗净
 deScale Solution
透明化

 SCALEVIEW®-S4

37 ℃,4 hr

固定
SCALEVIEW®-S4
摇动1小时后固定*
室温,2 hr 37 ℃, >1 day

室温,  

2 hr ×1、

1 hr ×1

室温,1 hr 4 ℃,3 hr 37 ℃,4 hr 室温

*透明化后,使用1.5%(wt / vol)琼脂糖嵌入并固定。

成年大鼠海马神经干细胞神经球状体的三维免疫荧光  —使用AbScale法—


SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂

参考文献


1) Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 14, 1481(2011).

2) Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 18, 1518(2015).

3) Hama H, et al. : Protocol Exchange (2016), doi:10.1038/protex.2016.019

4) Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).

◆产品信息


产品编号 产品名称 规格 包装
194-18561 SCALEVIEW-S4
SCALEVIEW-S4组织透明化试剂
组织透明化用 250 mL

◆相关产品


产品编号 产品名称 规格 包装
193-18455 SCALEVIEW-A2
SCALEVIEW® 组织透明化试剂A2
组织透明化用 500 mL
196-18521 SCALEVIEW-S0
SCALEVIEW® 组织透明化试剂S0
组织透明化用 250 mL
041-34425 deScale Solution
透明化洗涤溶液
组织透明化用 500 mL
294-35631 See Through Chamber, 0.3mm thick
透明室,0.3mm厚
组织透明化用 10 set
291-35641 See Through Chamber, 0.5mm thick
透明室,0.5mm厚
组织透明化用 10 set
295-35661 See Through Chamber, 1.0mm thick
透明室,1.0mm厚
组织透明化用 10 set
292-35671 See Through Chamber, 2.0mm thick
透明室,2.0mm厚
组织透明化用 10 set
299-35681 See Through Chamber, 3.0mm thick
透明室,3.0mm厚   
组织透明化用 10 set


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

相关资料

SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂

透明化试剂方法选择流程

组织透明化试剂Q&A ver1.0

Tissue clearing reagent Q&A ver1.0

Q组织透明化的原则

A:组织透明化通常是按下面的步骤进行的:

A:(a)固定 (b)透化 (c)脱色 (d)折射率匹配

 

Q:组织透明化的优势

A:目前大多数可用的透明化技术,都是通过编码荧光报告蛋白或者用荧光标记抗体进行后标记,从而可视化组织中特定的蛋白。组织透明化成为

A:了具有单细胞分辨率的组织3D成像中重要的一环。

 

Q:透明化技术的比较

A:下面是水性的透明化技术。


SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂


SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂


A:SeeDB(基于果糖的方法)在一些应用中有一定优势。因为SeeDB不含去垢剂,所以对于透明化DiI(细胞膜红色荧光探针,一种神经示踪剂)

A:标记的样品和使用光电关联显微镜(CLEM)的情况下,SeeDB有着一定优势。另外SeeDB会产生自体荧光,有时候会对辨认未标记的神经元

A:结构(如神经毡)起着一定帮助。

A:SeeDB2是为使用高NA物镜的高分辨率成像而优化的技术,因此,当处理较大的组织时,CLARITY或者CUBIC会是更好的选择。

 

Q:切片厚度的最大值和最小值?

A:您应该根据您的物镜的WD(工作距离)来决定切片的厚度。我们建议切片的厚度不要超过3mm。对于十分薄且脆弱的样品,我们建议使用琼

A:脂糖包埋。

A:使用CUBIC,可以让全器官、全身透明化和使用LSFM的快速3D成像具有可重复性。

 

Q:试剂盒成分

A:具体如下:

A:1. SCALEVIEW-S试剂盒(299-79001)适用于20份 1-2 mm 的切片样品

A:A:1) SCALEVIEW-S0——100 mL

A:A:2) SCALEVIEW-S1——100 mL

A:A:3) SCALEVIEW-S2——100 mL

A:A:4) SCALEVIEW-S3——100 mL

A:A:5) SCALEVIEW-S4——100 mL

A:A:6) SCALEVIEW-SMT——100 mL

 

A:2. SCALEVIEW-S试剂盒(290-80801)适用于20-30份 1-2 mm 的切片样品。

A:A:1) SCaleCUBIC-1 Solution——250 mL

A:A:2) SCaleCUBIC-2 Solution——250 mL

A:A:3) Mounting Solution 1——40 mL

A:A:4) Mounting Solution 2——40 mL

 

A:3. SeeDB试剂盒(299-79901)适用于20-30份 1-2 mm 的切片样品。

A:A:1) SeeDB:20w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:2) SeeDB:40w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:3) SeeDB:60w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:4) SeeDB:80w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:5) SeeDB:100w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:6) SeeDB——50 mL

 

A:4. SeeDB2试剂盒(294-80701)适用于20-30份 1-2 mm 的切片样品。

A:A:1) Saponin(皂角苷)——5g

A:A:2) SeeDB2G solution——50mL

A:A:3) SeeDB2S solution——50mL

A:A:4) PBS——50mL

 

Q:样品的保存

A:SCALEVIEW-S处理的样品应在室温下保存2~3周。您可以在2~3周内观察SCALEVIEW-S透明化的样品中的荧光信号。

A:CUBIC处理的样品应在室温下保存1周。您可以在1周内观察CUBIC透明化的样品中的荧光信号。

A:SeeDB2G处理的样品应在冰箱中保存1年,而SeeDB2S处理的样品则可在室温下保存1年。您可以在1年内观察SeeDB透明化的样品中的荧光

A:信号。

 

Q:抗体的荧光标记

A:应在进行透明化前就进行抗体的荧光标记。

 

Q:适用于SCALEVIEW-S的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

 

Q:适用于CUBIC的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Zeiss Lightsheet Z.1(Carl Zeiss)

 

Q:适用于SeeDB2的显微镜

A:Confocal(最好使用高NA的油浸镜头)

A:STED(Leica Microsystems)

A:SR-SIM(Carl Zeiss)

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Airyscan(Carl Zeiss)

A:HyVolution(Leica Microsystems)

A:Two-photon(最好使用复合浸没镜头)

A:Confocal(最好使用高NA的甘油浸镜头)

A:Light-sheet DLS(Leica,最好使用定制镜面的设备)

 

Q:重构

A:对于定量用途,我们建议使用Neurolucida系统(MBF)。我们同样测试了VAST Lite用于成像用途时的表现。重构时也可以使用开源软件。

A:例如,Vaa3d可以处理大量的拼接图像的数据。

 

Q:物镜推荐

SCALEVIEW®-S4                              球状体·细胞用透明化试剂

 

Q:其他物种?其他器官?

A:对于昆虫样品和鱼类样品,建议选择CUBIC。

A:昆虫相关文献:Ohuma.et al.: Fish Pathology, 52(2), 96(2017).

A:鱼类相关文献:Konno and S.Okazaki .: Zoological Letters, 4:13(2018).

   

  对于多细胞球状体,选择SCALEVIEW-S会更好。

  https://www.nature.com/articles/s41598-018-29169-0

 

参考文献


1) Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 14, 1481(2011).

2) Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 18, 1518(2015).

3) Hama H, et al. : Protocol Exchange (2016), doi:10.1038/protex.2016.019

4) Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

SCALEVIEW-S 组织透明化试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

组织透明化试剂SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂

SCALEVIEW®-S


  ScaleS技术由一组主要成分为尿素和山梨糖醇的组织透明化试剂组成。

  开发此技术的理化研究所·脑神经科学研究中心和光量子工学研究中心通过进一步改良,研发出兼备出色透明度和可保留细微结构及荧光信号的新成果。

  FUJIFILM Wako取得理化研究所的许可,把此项成果商品化,推出SCALEVIEW®-S产品。

  SCALEVIEW®-S 不仅可以透明化含有荧光蛋白的生物标本,而且也可以有效应用于抗体或荧光染料标记的厚标本。它将有望成为分析脑组织病理标本的有力工具。

  SCALEVIEW®-S Trial Kit主要由从SCALEVIEW®-S0到SCALEVIEW®-SMt等6种试剂组成,可通过使用各试剂进行透明化的试剂盒。


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


数据提供:

国立研究开发法人理化学研究所

脑神经科学研究中心细胞机能探索研究组/光量子工学研究中心生命光学技术研究组

濱裕先生、星田哲志先生、宮脇敦史先生

合作:olympus株式会社



◆SCALEVIEW®-S 组织透明化实验报告例子


■ 小鼠大脑半球1-2 mm厚切片

(※试剂用量标准:透明化处理和固定各5 mL。)


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


※在组织透明化实验中,请注意试剂的使用量、处理的时间根据样本大小会有所改变。

此外,请尽可能在灌注固定后取出并重新固定样本。

 


■ 使用SCALEVIEW®-S小鼠大脑透明化例子


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


从左依次是小鼠大脑切片(1mm厚)SCALEVIEW®-S处理前后和小鼠大脑半球SCALEVIEW®-S处理前后

 


■ 用双光子激发显微镜观察YFP-H line系小鼠透明化全脑——逐步放大基底神经节区域


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


点击查看protocol



◆免疫组织染色:AbScale 实验报告


■ 小鼠大脑半球1-2 mm厚切片

(※试剂用量标准为前处理各试剂:10 mL、抗体染色:1.5 mL、透明化:10 mL、固定:10 mL。)


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


* AbScale Solution : 含0.33 M 尿素、0.1 % (wt/vol) Triton X-100的PBS(-)溶液

 

■ 阿尔茨海默病模型小鼠(17个月)大脑切片(2mm厚)通过AbScale法进行免疫组织染色的图

   像例


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂



◆荧光染料染色:ChemScale 实验报告


■ 小鼠大脑半球1-2 mm厚切片

(试剂用量标准为前处理各试剂:10 mL、荧光染料染色:8 mL、洗涤:10 mL、透明化:10 mL)


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂



■ 用共聚焦激光扫描显微镜(倒立)观察ChemScale处理(PI染色)后的YFP-H line小鼠大脑半球

     切片(2 mm厚)


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂



◆SCALEVIEW®-S Neurosphere观察示例


■ Neurosphere

(试剂用量标准:前处理及透明化各试剂1.2 mL。※抗体染色基于AbScale实验报告)


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂



■ 从成年大鼠海马体制备的神经干细胞Neurosphere三维免疫染色——使用AbScale法


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

组织透明化配套耗材:成像用透明室

SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂

SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂

透明化试剂方法选择流程

AbScale发进行直接IHC实验步骤

SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂

组织透明试剂化系列

组织透明化试剂Q&A ver1.0

Tissue clearing reagent Q&A ver1.0


Q组织透明化的原则

A:组织透明化通常是按下面的步骤进行的:

A:(a)固定 (b)透化 (c)脱色 (d)折射率匹配

 

Q:组织透明化的优势

A:目前大多数可用的透明化技术,都是通过编码荧光报告蛋白或者用荧光标记抗体进行后标记,从而可视化

A:组织中特定的蛋白。组织透明化成为了具有单细胞分辨率的组织3D成像中重要的一环。

 

Q:透明化技术的比较

A:下面是水性的透明化技术。


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂


A:SeeDB(基于果糖的方法)在一些应用中有一定优势。因为SeeDB不含去垢剂,所以对于透明化DiI(细胞膜

A:红色荧光探针,一种神经示踪剂)标记的样品和使用光电关联显微镜(CLEM)的情况下,SeeDB有着一定优

A:势。另外SeeDB会产生自体荧光,有时候会对辨认未标记的神经元结构(如神经毡)起着一定帮助。

A:SeeDB2是为使用高NA物镜的高分辨率成像而优化的技术;因此,当处理较大的组织时,CLARITY或者CUBIC

A:会是更好的选择。

 

Q:切片厚度的最大值和最小值?

A:您应该根据您的物镜的WD(工作距离)来决定切片的厚度。我们建议切片的厚度不要超过3mm。对于十分薄

A:且脆弱的样品,我们建议使用琼脂糖包埋。

A:使用CUBIC,可以让全器官、全身透明化和使用LSFM的快速3D成像具有可重复性。

 

Q:试剂盒成分

A:具体如下:

A:1. SCALEVIEW-S试剂盒(299-79001)适用于20份1-2mm的切片样品

A:A:1) SCALEVIEW-S0——100 mL

A:A:2) SCALEVIEW-S1——100 mL

A:A:3) SCALEVIEW-S2——100 mL

A:A:4) SCALEVIEW-S3——100 mL

A:A:5) SCALEVIEW-S4——100 mL

A:A:6) SCALEVIEW-SMT——100 mL

 

A:2. SCALEVIEW-S试剂盒(290-80801)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) SCaleCUBIC-1 Solution——250 mL

A:A:2) SCaleCUBIC-2 Solution——250 mL

A:A:3) Mounting Solution 1——40 mL

A:A:4) Mounting Solution 2——40 mL

 

A:3. SeeDB试剂盒(299-79901)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) SeeDB:20w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:2) SeeDB:40w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:3) SeeDB:60w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:4) SeeDB:80w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:5) SeeDB:100w/v% Fructose Solution——50 mL

A:A:6) SeeDB——50 mL

 

A:4. SeeDB2试剂盒(294-80701)适用于20-30份1-2 mm的切片样品。

A:A:1) Saponin(皂角苷)——5 g

A:A:2) SeeDB2G solution——50 mL

A:A:3) SeeDB2S solution——50 mL

A:A:4) PBS——50 mL

 

Q:样品的保存

A:SCALEVIEW-S处理的样品应在室温下保存2至3周。您可以在2至3周内观察SCALEVIEW-S透明化的样品中的

A:荧光信号。

A:CUBIC处理的样品应在室温下保存1周。您可以在1周内观察CUBIC透明化的样品中的荧光信号。

A:SeeDB2G处理的样品应在冰箱中保存1年,而SeeDB2S处理的样品则可在室温下保存1年。您可以在1年内观

A:察SeeDB透明化的样品中的荧光信号。

 

Q:抗体的荧光标记

A:应在进行透明化前就进行抗体的荧光标记。

 

Q:适用于SCALEVIEW-S的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

 

Q:适用于CUBIC的显微镜

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Zeiss Lightsheet Z.1(Carl Zeiss)

 

Q:适用于SeeDB2的显微镜

A:Confocal(最好使用高NA的油浸镜头)

A:STED(Leica Microsystems)

A:SR-SIM(Carl Zeiss)

A:SD-OSR(Olympus)

A:FV-OSR(Olympus)

A:Airyscan(Carl Zeiss)

A:HyVolution(Leica Microsystems)

A:Two-photon(最好使用复合浸没镜头)

A:Confocal(最好使用高NA的甘油浸镜头)

A:Light-sheet DLS(Leica,最好使用定制镜面的设备)

 

Q:重构

A:对于定量用途,我们建议使用Neurolucida系统(MBF)。我们同样测试了VAST Lite用于成像用途时的表

A:现。重构时也可以使用开源软件。例如,Vaa3d可以处理大量的拼接图像的数据。

 

Q:物镜推荐


SCALEVIEW-S                              组织透明化试剂

 

Q:其他物种?其他器官?

A:对于昆虫样品和鱼类样品,建议选择CUBIC。

A:昆虫相关文献:Ohuma.et al.: Fish Pathology, 52(2), 96(2017).

A:鱼类相关文献:Konno and S.Okazaki .: Zoological Letters, 4:13(2018).

   


  对于多细胞球状体,选择SCALEVIEW-S会更好。

  https://www.nature.com/articles/s41598-018-29169-0

 

参考文献

[1]

Hama,H.et al.:ProtocolExchange(2016).doi:10.1038 /protex.2016.019.

[2]

Hama,H.et al.:Nat.Neurosci.,18,1518(2015).

[3]

濱裕、日置寛之、並木香奈、星田哲志、黒川裕、宮脇敦史:生体の科学,68(1),85(2017).

[4]

日置寛之、濱裕、孫在隣、黄晶媛、並木香奈、星田哲志、黒川裕、宮脇敦史:日本薬理学雑誌,

149 (4),173(2017).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
193-18455 SCALEVIEW-A2
SCALEVIEW® 组织透明化试剂A2
500 mL 组织透明化试剂
196-18521 SCALEVIEW-S0 250 mL 组织透明化试剂
193-18531 SCALEVIEW-S1
SCALEVIEW-S1组织透明化试剂
250 mL 组织透明化试剂
190-18541 SCALEVIEW-S2
SCALEVIEW-S2组织透明化试剂
250 mL 组织透明化试剂
197-18551 SCALEVIEW-S3
SCALEVIEW-S3组织透明化试剂
250 mL 组织透明化试剂
194-18561 SCALEVIEW-S4
SCALEVIEW-S4组织透明化试剂
250 mL 组织透明化试剂
191-18571 SCALEVIEW-SMt
SCALEVIEW-SMt组织透明化试剂
250 mL 组织透明化试剂
041-34425 deScale Solution 500 mL 组织透明化试剂
299-79901 SCALEVIEW-S Trial Kit 1 Kit 组织透明化试剂

ClearSee™ 植物科学新技术 植物透明化试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

植物科学新技术 植物透明化试剂ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

ClearSee™

ClearSee™ 是一种仅需固定、洗净、透明化三步简单操作即可实现植物组织透明化的试剂。作为植物科学的研究工具,期待可以阐明细胞水平的现象和整个个体之间的系统联系。


HP数据:由名古屋大学大学院理学研究科 栗原大辅特任助教、水多阳子研究员提供

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂


◆操作步骤


使用 ClearSee 的透明化方法,只需1)固定、2)洗净、3)透明化三个步骤。详细方法可参考随产品附赠的使用说明书。

以下,是拟南芥叶和幼株的使用案例。


1. 固定


① 使用4%甲醛溶液固定样本*1

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

② 将样本放入干燥机中,用真空泵减压,在室温下静置30分钟,并固定。

② 以上操作重复两次

② 为了防止植物样品在减压过程中飞出,建议打开管盖,用封口膜密封,并用针在上面扎孔*2,3

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

2. 洗净


去除固定液,加入1 mL的1×PBS缓冲液,静置1分钟。然后去除1×PBS缓冲液,重新加入1 mL的1×PBS缓冲液,静置1分钟。

以上操作重复两次。


3. 透明化处理


去除1×PBS缓冲液,添加1.3 mL的ClearSee

打开管盖后用封口膜密封,并用针在上面扎孔。放入干燥机中,用真空泵减压,并在室温下静置1小时。

取下封口膜,盖好管盖。避光,室温静置,透明化*4

如有需要可更换新的ClearSee



4. 透明化过程


ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图4. ClearSee™中的拟南芥叶和幼株

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图5. 可以观察到样本周围叶绿素(1-2天后)

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图6. 更换新的 ClearSee™ 后的样本

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图7. 透明化的拟南芥叶和动株(3-5天后)




使用ClearSee™ 进行透明化需要的物品

1. 高压灭菌锅

2. 局部排气系统(通风室等)

3. 真空泵

4. 干燥机

5. 60°C 恒温器

6. 荧光显微镜

7. 锥形管

8. 微量离心管

9. 封口膜

10. 针

11. 镊子

12. 盖玻片

13. 载玻片

14. 凡士林油


注意


※ 由于植物活体样本含有空气,添加溶液时植物就会漂浮起来。请尽可能地将植物样本浸入固定液中。

※ 请将干燥机设定在-90 kPa左右。根据植物样本的不同,有时减压会过强。减压过强的话,会破坏植物组织和细胞。开始减压后,由于会抽出植

※ 物样本中的空气,会产生气泡。为了让气泡消失,请缓慢调整减压的压强。

※ 从减压状态恢复至大气压强时,请缓慢进行。如果急速恢复至大气压强的话,会破坏植物组织和细胞。

※ 透明化的时间根据植物种类和组织而异,请参照以下的时间。

※ 根:1~2天、叶和幼株:4~7天、雌蕊:2周、成熟组织:4周。


◆观察案例


5. 观察


在载玻片上用凡士林或油脂制作一个围栏,放入适量 ClearSee,用镊子将样本移入,盖好盖玻片,并用荧光显微镜观察。由于 ClearSee干燥后会产生沉淀,所以用凡士林或油脂来防止其干燥。观察结束后,可以将植物样本放回装有 ClearSee 的微管中进行保存。

另外,用 ClearSee 透明化的样本亦可用荧光色素进行染色。细胞核染色时,向 ClearSee 中添加终浓度为 10 μg/ mL 的双苯甲酰亚胺 H33258 三盐酸盐,双苯甲亚胺 H33342 或 DAPI,细胞壁染色时,使用终浓度为 1 mg/mL,静置1小时后,更换新的 ClearSee 再静置1小时后,在荧光显微镜下进行观察。


ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

8. 经透明化处理的拟南芥叶在明场中呈透明状态,叶绿素的红色自发荧光消失。

图8.  由于可以对整片叶进行观察,因此也可以观察到维管束内的荧光蛋白。比例尺为 200 μm。

ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图9使用 ClearSee 透明化的完整的雌蕊的荧光观察。

图2. 用4个颜色(蓝色,绿色,黄色,红色)的荧光蛋白标记花粉管。

图2. 根据参考文献改编转载。



ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图10使用 ClearSee 处理4天的拟南芥的根。

图10. 生长素应答细胞的细胞核用绿色、全身的细胞核用紫色显示。

图10. 根据参考文献改编转载。

■其他植物的透明化案例


使用 ClearSee 透明化6天后的蓝猪耳、矮牵牛、烟草、番茄、黄瓜、稻叶。

稻叶在透明化时,由于叶子的表面有蜡层,因此很难将溶液渗入组织里,通过在氯仿等有机溶剂中浸泡 10~30 秒除蜡后,开始固定的步骤。


ClearSee™                              植物科学新技术 植物透明化试剂

图11使用 ClearSee 透明化的各种植物叶片(6天后)


◆参考文献


Kurihara, D. et al.: Development, 142, 4168-4179 (2015).

点击此处查看产品宣传页


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
031-25151 ClearSee™ 50 mL 植物透明化用
160-16061 多聚甲醛
Paraformaldehyde
100 g 组织固定用
162-16065 多聚甲醛
Paraformaldehyde
500 g 组织固定用
167-25981 16w/v% 低聚甲醛溶液
16w/v% Paraformaldehyde Solution, Methanol free
1 mL×10A 电子显微镜用
163-25983 16w/v% 低聚甲醛溶液
16w/v% Paraformaldehyde Solution, Methanol free
10 mL×10A 电子显微镜用

生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2 SCALEVIEW®-A2

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2                              SCALEVIEW®-A2生物体组织透明化新技术

SCALEVIEW®-A2

  宮脇敦史博士等人开发了一种水溶状态下不会损坏荧光蛋白,可简便使生物体组织透明化的方法。

  对于福尔马林固定的样本,SCALEVIEW®-A2是不破坏其光吸收和荧光,同时可减少光散射的水溶性溶液。仅需将哺乳类动物大脑等生物体组织浸泡于SCALEVIEW®-A2中,即可透明化。

  SCALEVIEW®-A2光学特性——折射率ne(20℃)为1.377-1.381。

HP数据:理化学研究所 脑科学综合研究中心细胞机能探索技术开发小组濱裕先生、宮脇敦史提供

合作:奥林巴斯(Olympus)株式会社

参考文献:Hama,H.et al. : Nature Neuroscience 14, 1481(2011).

 


◆SCALEVIEW®-A2 操作案例


以透明化小鼠大脑为样本,SCALEVIEW®-A2透明化方法操作如下:


1. 固定

① 用4% 多聚甲醛(PFA)/PBS(pH 7.5~8.0)对小鼠进行灌流固定。

② 取出小鼠大脑后,用4%PFA/PBS固定(4℃、10h), 20% 蔗糖/PBS置换(4℃、24h)。

③ 用OCT复合物对小鼠大脑进行包埋处理后,液氮进行冷冻。

④ 用PBS对冷冻脑组织解冻、清洗后,再用4% PFA/PBS进行再固定(室温、20min)


2. 透明化处理

⑤ 将固定好的小鼠大脑浸泡在SCALEVIEW®-A2中(室温)。

注意点:
  1.每个成年小鼠大脑需要使用30mL以上的SCALEVIEW®-A2。

  2.透明化需要1周以上时间。浸泡过程中,需在混匀器等设备中慢慢轻晃溶液。每天更换一次SCALEVIEW®-A2溶液,效果更佳。

  3.通过SCALEVIEW®-A2溶液浸泡后,小鼠大脑体积会单方向膨胀10~30%水平。

 

3. 观察

⑥ 观察SCALEVIEW®-A2处理后的小鼠大脑样品使用双光子激光显微镜、奥林巴斯(Olympus)公司XLPLN25SVMP多光子专用物镜。或使用激

       光共聚焦显微镜进行观察。

⑦ 观察结束后,可将小鼠大脑再次浸泡于SCALEVIEW®-A2溶液中,保存温度4℃。



SCALEVIEW®-A2处理案例


生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2                              SCALEVIEW®-A2

图1. SCALEVIEW®-A2透明化小鼠大脑案例

从左往右: SCALEVIEW®-A2处理前的小鼠大脑;SCALEVIEW®-A2浸泡两周后的小鼠大脑

SCALEVIEW®-A2观察案例


生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2                              SCALEVIEW®-A2

图2. 双光子激光显微镜下获取的Thy1-H小鼠大脑深层观察图像

使用奥林巴斯(Olympus)公司XLPLN25XWMP多光子专用物镜观察图像

比例尺:50 μm


生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2                              SCALEVIEW®-A2

图3. 双光子激光显微镜下获取的Thy1-H小鼠大脑深层观察图像

使用奥林巴斯(Olympus)公司XLPLN25XSVMP(NA.1.0 WD4 mm)多光子专用物镜观察图像



生物体组织透明化新技术SCALEVIEW®-A2                              SCALEVIEW®-A2 

图4. 激光共聚焦显微镜下获取的小鼠胰脏透明化图像

  对小鼠进行灌流固定处理前,先使用Lectin Texas red对流入血管进行标记处流固定后,取出胰脏并用SCALEVIEW®-A2图为奥林巴斯(Olympus)公司:UPLSAPO30XS察下的



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YFP-H小鼠海马部成像视频

使用奥林巴斯(Olympus)公司XLPLN25XSVMP(NA1.0,WD4mm)多光子专用物镜观察图像

YFP-H小鼠大脑的成像视频

使用奥林巴斯(Olympus)公司XLSLPLN25XSVMP(NA0.90,WD8mm)多光子专用物镜观察图像

组织透明化配套耗材:成像用透明室


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
193-18455 SCALEVIEW® 组织透明化试剂A2 SCALEVIEW® -A2 500 mL 组织透明化用
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脂质除去用电泳槽使脑部透明化 Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

  • 产品特性
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  • 参考文献

脂质除去用电泳槽使脑部透明化脂质除去用电泳槽使脑部透明化                              Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

          新型电泳槽使脑部透明化!!NA-1880 型电泳槽,可用于去除脂质

2013 年4 月11 日的自然杂志(Nature)电子版里介绍了组织透明化技术 CLARITY 法电泳去除脂质的方法,斯坦福大学的 Karl Deisseroth 教授等因此受到关注。这个方法的步骤是,向样品灌注并使其结合丙烯酰胺后,37℃电压 10 V~40 V 通电3小时引发聚合, 40℃ 10 V–60 V 电压电泳2天,循环含4%SDS 的硼酸盐缓冲液,去除脂质,使样品透明化。透明化的样品可用于后续的免疫染色分析。



脂质除去用电泳槽使脑部透明化                              Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

Nature 论文中的电泳装置:

样品使用 18 mm 的小鼠脑,电泳槽是电极间距 20 mm,高度20mm,内部直径为 40 mm 的圆筒状密闭循环型装置。为了安全,电泳槽上部还连接了硅胶密封的螺纹出口。

外连装置:

缓冲液循环泵(推荐使用 100 mL/min 以上的型号),能用于高电流的电泳电源(3860 型、3870 型等)、保温范围在 37~50℃的恒温水槽、加热器和 5 L 缓冲液槽。

脂质除去用电泳槽使脑部透明化                              Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

规格:

主要材料:亚克力;

电极部分:铂金线、引线;

内置下槽(接续部分防水处理),附接续循环软管、滚动夹1个、异型软管接头2个

尺寸:70 mm x 70 mm x 90 mm;

重量:0.2 kg;

槽内部直径 40 mm 电极间距 20 mm;

耐热温度 65℃ * 铂金线直径 0.3 mm;

规格、尺寸等有可能变更。如有需要可订做电泳置,也可咨询直径 0.5 mm 型铂金线。

组织透明化辅助试剂

VA-044(聚合物引发剂)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
631-26271 Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction
脂质除去用电泳槽
1 台 免疫化学用