ATF-2 (D4L2X) XP® 兔单克隆抗体
ATF-2 (D4L2X) XP® Rabbit mAb
货号 | 产品名称 | 品牌 | 购买 |
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货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
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35031S | ATF-2 (D4L2X) XP® 兔单克隆抗体 | 100µl | 咨询客服 |
35031T | ATF-2 (D4L2X) XP® 兔单克隆抗体 | 20 µl | 咨询客服 |
SDHA (D6J9M) XP® 兔单克隆抗体
SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb
货号 | 产品名称 | 品牌 | 购买 |
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货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
11998T | SDHA (D6J9M) XP® 兔单克隆抗体 | 20 µl | 咨询客服 |
Ki-67 (D3B5) 兔单克隆抗体 (Mouse Preferred; IHC Formulated)
Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (Mouse Preferred; IHC Formulated)
货号 | 产品名称 | 品牌 | 购买 |
---|
货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
12202T | Ki-67 (D3B5) 兔单克隆抗体 (Mouse Preferred; IHC Formulated) | 20 µl | 咨询客服 |
12202S | Ki-67 (D3B5) 兔单克隆抗体 (Mouse Preferred; IHC Formulated) | 100µl | 咨询客服 |
品牌:Kikkoman
CAS No.: 储存条件:2-10℃ 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
60259 |
– | 100 tests | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌:Kikkoman
CAS No.: 储存条件:2-10℃ 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
60263 |
– | 150 tests | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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品牌:FUJIFILM Irvine Scientific
CAS No.: 储存条件:2-8°C 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
94109-1kg |
– | 1 kg | – | 咨询 | – | – |
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日本ATTO 发酵分析仪
型号:WSF-2000MH系列
品牌:日本ATTO
发酵特性分析仪WSF-2000MH系列是一种通过自动持续测量并记录各种样品在微生物发酵过程中产生的气体总量和产气速度的变化曲线,来有效地评估酵母等微生物的发酵能力、培养基(面团、啤酒等)发酵特性及样品的发酵条件等,也可以长时间监测面包面团、酒类酿造、生物乙醇相关的发酵过程以及BP(发酵粉=化学膨胀剂)等化学过程产气量。
热像仪是一种测量微生物发酵产生的气体量的装置。Fermograph III 是“日本东工业协会面包酵母试验方法”采用的 Fermograph 的继任机型。
测量原理及构成:
样品发酵过程中产生气体,气体通过气液置换水柱压力计,推动压力计中的水柱的变化,再通过压力传感器检测到的压力和装置内部温度传感器检测到的温度计算产生气体的体积总量及产气速率。
发酵特性分析仪WSF-2000MH系列优势特点:
1、多样品测量:WSF-2000MH-10W可同时测量10个样品;WSF-2000MH-20W可同时测量20个样品;
2、每个样品瓶可以单独控制,单独测量,数据曲线单独记录,各样品瓶间检测相互不影响;
3、测量总气体发生量、气体发生速度、面包面团内藏气体量等,气体发生量可以切换体积(mL)及重量(g)表示;
4、固定时间间隔,长时间检测:时间间隔5-120s可设(5s为单位)、5-120min可设(5min为单 位)。秒间隔:最长23小时59分;分间隔:最长可达90天;
5、标准样品瓶容量225mL(面料相当于20g小麦粉),同时可以选用其他或大或小的样品瓶进行大量样品或微量样品的分析;
6、温度、压力传感器自动校准;
7、气体流量的测量标准:符合日本国家计量研究院(NMIJ);
8、数据列表和曲线图自动存储,可以以CSV格式导出数据信息;
9、应用领于广泛,适合多种产气工艺气体量检测;
10、体积小,重量轻,检测过程几乎无耗材,维护成本低;
11、分析软件可以控制记录每个样品瓶的发酵过程信息;
应用领域:
微生物产生的气体量变化是细菌代谢和活动的重要指标。本装置的测定数据可用于各种工艺的过程控制,Z佳培养基组成和发酵条件的探索等。
微生物——菌株的育种、烘焙制品、酒类酿造、酱油、食品fu败、工业酒精以及甲烷氢气等领域,如小麦粉品质评价、酿造品质控制、微生物菌株筛选等。
化学发面——食品膨胀剂、发泡剂、洗涤剂、入浴剂以及医药品等领域,如膨化剂、发泡剂等的新品开发和质量管控等。
实验案例:面团发酵过程监测
它是一种可以自动同时测量多达 20 个点的样品中产生的气体量的设备。通过评估微生物酵母的发酵能力、培养基/面团组成和发酵条件,可用于育种、开发、质量控制等。
Fermograph III 是定期自动测量微生物发酵产生的气体量的设备,是日本酵母工业协会面包酵母测试方法采用的 AF-1000 型 Fermograph 的后续型号。
第一个Pharmagraph是在农林水产省食品研究所(现为食品研究所、农业和食品工业技术研究机构)的指导下开发的。
微生物产生的气体量的变化是细菌代谢和活动的重要指标。该装置的测量数据可用于多种用途,例如新有用菌株的选育、酵母生产、面包制作、酿造等中的质量控制,以及寻找最佳培养基组成和发酵条件。
最初,该装置是为了测量面包面团发酵产生的气体而开发的,但后来在独立行政机构酒研究所的指导下,对清酒等酒精饮料生产中的发酵过程进行了测量和生物乙醇 现在可以用于监测(应用程序 Ver.3.8 或更高版本)。
发酵粉等无机化学样品会在几十秒到几分钟的短时间内产生气体,现在可以通过支持约 5 秒的短测量间隔来测量(Ver.5 或更高版本)。
它可以应用于广泛的应用,从食品加工到发酵/代谢过程,日用品和药品中的发泡,以及涉及气体产生的化学反应的研究。
型号名称 | WSF-2000 MH 10CH FERMOGRAPH III | WSF-2000 MH 20CH FERMOGRAPH III |
---|
方法 | 气液置换型、压力检测方式(压力计/压力传感器方式) | |
信号输出 | 串行输出 (USB) | |
计算时间 | 1 小时到 90 天以分钟计 / 1 分钟到 23 小时 59 分钟以秒计 * 1 | |
测量间隔 | 5, 10, 15, 30, 60, 120 分钟 / 5, 10, 15, 30, 60 秒 * 1 | |
通道数 | 1 至 10(测量内置气体时为 1 至 5)* 2 | 1 至 20(测量内置气体时为 1 至 10)* 2 |
解决 | 约 0.2 mL(0.4 mg 以 CO2 重量计) | |
准确性 | ± 2% + 0.2mL | |
标准样品量 | 20g(面粉换算/面团约30-40g)*3 | |
样品瓶容量 | 225mL(20g) | |
电源 | AC100V ± 10V 50 / 60Hz 36VA
1 个交流适配器 |
AC100V ± 10V 50 / 60Hz 72VA
2 个交流适配器 |
尺寸 | 503 毫米(宽)x 152 毫米(深)x 396 毫米(高) | 503mm (W) x 152mm (D) x 396mm (H) x 2 个 |
大量的 | 10公斤 | 20公斤 |
温度设定范围 | 室温+5~50℃(水箱最高工作温度50℃)*5 | |
温度精度 | ± 0.1-0.5°C | |
电源 | AC100V ± 10V 50 / 60Hz 550VA | |
尺寸 | 270mm (W) x 360mm (D) x 160mm (H)(不包括温度控制器) | |
大量的 | 6公斤 |
设备配置 | WSF-2000 MH 10CH | WSF-2000 MH 20CH |
---|---|---|
标准配件 | 1、程序软件光盘(Windows版):1套*4 | |
2,225mL(20g)样品瓶 ・ ・ ・ ・ ・ 50个 | 2,225mL(20g)样品瓶 ・ ・ ・ ・ ・ 100个 | |
3,225mL (for 20g) 样品仓盖 ・ ・ 10 个 | 3,225mL (for 20g) 样品仓盖 … 20 件 | |
4、CO2吸收瓶盖… 10个*6 | 4、CO2吸收瓶盖… 10个*6 | |
5、CO2吸收瓶······10个*6 | 5、CO2吸收瓶······10个*6 | |
6、聚氨酯管(内径2.5mm/外径4mm)20m···2 | 6、聚氨酯管(内径2.5mm/外径4mm)20m···4个 | |
7、USB线:1条 | 7、USB线·····2 | |
8、使用说明书:1份 |
产品代码 | 产品名称 | 价钱 |
---|---|---|
4108235 | 热像仪恒温槽(不带喷嘴,带温度控制器)1个 | 28万日元 |
4108238 | 热像仪恒温槽(带喷嘴,不带温度控制器=用于连接冷却循环装置)1个 | 18万日元 |
4108240 | 冷却循环恒温装置(CH-302i)1台 | 42万日元 |
4101165 | 热像仪 PC 系统 * 7 | 35万日元 |
* 1:在Application Ver.5.x中,测量间隔可以设置为5、10、15、30、60等,单位为分/秒。
对于秒级测量,如果测量间隔小于 30 秒,则测量将在气体生成量达到气压计的吹扫极限时结束。(可以通过每隔 30 秒或更长时间进行吹扫来执行连续测量。)
由于未来的软件升级,测量条件可能会发生显着变化。
* 2:测量内置气体时,将奇数通道(正常测量)和偶数通道(CO2 吸收测量)两个通道作为一组使用。
* 3:面团的量根据添加的水量和成分而有所不同。作为指导,大约 30-40 克。在液体介质的情况下,需要分别考虑条件。
* 4:恒温浴和个人电脑是可选的。
* 5:在低于室温的温度下使用产品时,请与我们联系。我们可以提供冷却循环装置(CH-302i)和带喷嘴的恒温浴。
* 6: CO2 吸收瓶是通过放入碱性 (KOH) 溶液来使用的。请小心处理以确保安全。
* 7:推荐用于 Pharmagraph III
操作系统的 PC 的以下规格:Windows 10 或更高版本
CPU:Intel Core i5 或更高版本(Core i7 或更高版本,用于 10 通道或更多通道的长期测量)
RAM:8GB 或更高版本(长期时间 10 通道或更多)16GB 或更多用于测量)
GPU:必需(允许内置 GPU,推荐 NVIDIA 或 AMD)
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货号 | 552 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 100 mg | 价格 | 1236 | |
Ex (nm) | 360 | Em (nm) | 450 | |
分子量 | 220.18 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:552
产品名称:7-羟基香豆素-4-乙酸
CAS:6950-82-9
规格:100mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:220.18
外观:灰白色固体
溶剂:DMSO
激发波长(nm):360
发射波长(nm):450
产品介绍
7-羟基香豆素-4-乙酸是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。7-羟基香豆素-4-乙酸用于标记多肽和蛋白质的蓝色荧光染料。 它同样也用于其他生物分子标记。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的7-羟基香豆素-4-乙酸。
参考文献
Stopped-flow kinetic analysis of long-chain fatty acid dissociation from bovine serum albumin
Authors: Demant EJ, Richieri GV, Kleinfeld AM.
Journal: Biochem J (2002): 809
Continuous recording of long-chain acyl-coenzyme a synthetase activity using fluorescently labeled bovine serum albumin
Authors: Demant EJ, Nystrom BT.
Journal: Anal Biochem (2001): 38
Bovine serum albumin-(7-hydroxycoumarin-4-acetic acid) complex: applications to the fluorometric measurement of fatty acid concentrations
Authors: Demant EJ.
Journal: Anal Biochem (1999): 366
Covalent complexes between serum albumin and 7-hydroxycoumarin-4-acetic acid: synthesis and applications in the spectrophotometric detection of long-chain fatty acids
Authors: Demant EJ.
Journal: Biochim Biophys Acta (1996): 43
Structure-activity relationship of coumarins in xanthine oxidase inhibition
Authors: Chang WS, Chiang HC.
Journal: Anticancer Res (1995): 1969
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货号 | 701 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 5 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 504 | Em (nm) | 510 | |
分子量 | 389.16 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:701
产品名称:细胞标记探针 Bodi Fluor 488 SE
CAS:146616-66-2
规格:5mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:389.16
溶剂:DMSO
激发波长(nm):504
发射波长(nm):510
产品介绍
细胞标记探针 Bodi Fluor 488 SE是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。Bodi Fluor 488,SE与Bodipy®FL,SE(Bodipy®是Invitrogen的商标)的分子相同。 Bodi Fluor 488的激发和发射光谱类似于荧光素,与荧光素相比,Bodi Fluor 488是一种中性分子,其荧光不依赖于pH。 Bodi Fluor 488具有明亮的绿色荧光和明显的发射峰。 Bodi Fluor 488已用于开发荧光细胞内示踪剂。 只要其载体是细胞可渗透的,其缀合物便是细胞可渗透的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的细胞标记探针 Bodi Fluor 488 SE。
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参考文献
A synthetic strategy for conjugation of paromomycin to cell-penetrating Tat (48-60) for delivery and visualization into Leishmania parasites
Authors: Sira Defaus, Maria Gallo, María A Abengózar, Luis Rivas, David Andreu
Journal: Unknown
相关产品
产品名称 | 货号 |
细胞标记探针 Bodi Fluor 488酸 | Cat#700 |
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货号 | 1082 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 | |
分子量 | 890.57 | 溶剂 | Water | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 488酰肼是美国AAT Bioquest生产的iFluor系列荧光染料,虽然FITC是用于制备绿色荧光生物缀合物的最流行的荧光标记染料,但是FITC存在某些限制,例如用于显微镜成像的严重光漂白和pH敏感荧光。与荧光素衍生物如FITC的缀合物相比,用iFluor 488染料制备的蛋白质缀合物要好得多。iFluor 488缀合物比荧光素缀合物明显更亮,并且光稳定性更高。此外,iFluor 488的荧光不受pH(4-10)的影响。这种pH不敏感性是对荧光素的主要改进,荧光素仅在pH大于9时发出其最大荧光。iFluor 488酰肼相当稳定并且对羰基(例如醛)表现出良好的反应性和选择性。iFluor系列染料是AF系列染料的完美替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 488酰肼。
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产品说明书
样本神经元细胞标记方案
该样品标记方案用于用iFluor 488酰肼标记神经元细胞。 您可能需要针对特定细胞进行进一步优化。
1.准备染料储备液:
1.1将1mg iFluor 488酰肼溶解在100μl200mMKCl中以制备10mM溶液(10mg / ml)。
1.2通过过滤对上述溶液进行灭菌。
2.标记细胞:
2.1通过使超极化电流通过电极,用iFluor 488酰肼储备溶液(来自步骤1)标记神经元细胞(例如,Manduca sexta幼虫中的附属植物牵开器运动神经元)。
3.固定细胞:
3.1用4%多聚甲醛在100mM磷酸盐缓冲液(pH 7)中固定细胞30分钟。
注意:固定后,细胞可在乙醇中脱水并在二甲苯中清除。
样本糖蛋白标记方案
该标记方案被开发用于山羊抗小鼠IgG与iFluor 647酰肼的缀合。您可能需要进一步优化您的特定蛋白质。
1.准备蛋白质醛溶液(溶液A):
1.1将5mg山羊抗小鼠IgG抗体溶于0.5mL 0.1M乙酸钠,0.15M NaCl,pH5.5中
注意:确保蛋白质浓度> 10 mg / ml,以获得最佳标记效率。
1.2通过离心30-60分钟,用0.2ml的100mM高碘酸钠(21mg / ml)处理蛋白质溶液。
1.3加入30μL乙二醇终止反应。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
2.1将1mg iFluor 染料酰肼溶解在0.1ml DMSO中以制备10mg / ml染料储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。
3.运行缀合反应:
3.1在有效摇动下将10μL染料储备溶液(溶液B)加入50μL蛋白质溶液(溶液A)中。
3.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物,在黑暗中保持30-60分钟。
4.纯化缀合物(以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。)
4.1根据制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
4.2将反应混合物(直接从步骤3)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
4.3一旦样品在顶部树脂表面下方运行,就加入PBS(pH 7.2-7.4)。
4.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成柱纯化。
注1:为立即使用,染料 – 蛋白质偶联物可以等分多次使用,而对于长期储存,需要浓缩或冷冻干燥蛋白质结合物溶液。
注2:对于小规模标记,建议使用即用型旋转商用色谱柱以方便使用。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
iFluor 488马来酰亚胺 | Cat#1062 |
iFluor 488 叠氮化物 | Cat#1000 |
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货号 | 1090 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 656 | Em (nm) | 670 | |
分子量 | 901.98 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:1090
产品名称:iFluor 647炔烃
规格:1mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:901.98
溶剂:DMSO
激发波长(nm):654
发射波长(nm):669
产品介绍
iFluor 647炔烃是美国AAT Bioquest生产的iFluor系列荧光染料。AAT Bioquest的iFluor 染料经过优化,可用于标记蛋白质,特别是抗体。 这些染料是明亮的,光稳定的并且对蛋白质具有最小的猝灭。 荧光仪器的主要激光线(例如,350,405,488,555和633nm)可以很好地激发它们。 iFluor 555染料的荧光激发和发射最大值分别为~550nm和~570nm。 iFluor 647系列的光谱特性基本上与Cy5®相同(Cy5®是GE Healthcare的商标)。 与Cy5探针相比,iFluor 647系列具有更强的荧光和更高的光稳定性。 它们的荧光与pH值无关,从pH 3到11.这些光谱特性使这种新染料系列成为Cy5®和AlexaFluor®647(Cy5®和AlexaFluor®是Invitrogen和GE Health Care的商标)的绝佳替代品。 iFluor 647炔烃相当稳定,与叠氮基团显示出良好的反应性和选择性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 647炔烃。
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参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
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产品名称 | 货号 |
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
iFluor 647马来酰亚胺 | Cat#1065 |
iFluor 647叠氮化物 | Cat#1091 |
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货号 | 1149 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 410 | Em (nm) | 501 | |
分子量 | 672.71 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
mFluor Violet 500琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的mFluor系列荧光染料。AAT Bioquest的mFluor 染料专为针对多色流式细胞仪的应用而开发。这些染料具有较大的斯托克斯位移,并且可以通过流式细胞仪的激光线(例如405 nm,488 nm和633 nm)很好地激发。 mFluor Violet 500染料的荧光激发和发射最大值分别约为405 nm和〜500 nm。这些光谱特性使其成为Pacific Green (ThermoFisher)和BD Horizon V500标记染料的绝佳替代品。 mFluor Violet 500 SE相当稳定,对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。 mFluor Violet 500 SE提供了一种方便的工具,可通过紫外激发光激发标记流式细胞仪应用中的单克隆、多克隆抗体或其他蛋白质(> 10 kDa)。在相同条件下,mFluor Violet 500染料缀合物比Pacific Green(ThermoFisher)和BD Horizon V500的相应生物缀合物明显更亮。
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产品说明书
操作方法
注意:该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml)混合至100μL,以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记,叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得极佳标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B),及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定最佳染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)。
3.6检测上述4种结合物,确定最佳的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
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产品名称 | 货号 |
mFluor Violet 450 马来酰亚胺 | Cat#1600 |
mFluor Violet 540 酸 | Cat#1142 |
荧光标记染料 mFluor Violet 510 酸 | Cat#1141 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 1150 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 406 | Em (nm) | 445 | |
分子量 | 841.96 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
mFluor Violet 450琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产荧光标记染料,mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料,可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺表现出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1)溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2)反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3)反应缓冲液:当使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前,还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)(例如通过透析)。 4)反应温度:大多数缀合在室温下进行。然而,对于特定的标记反应,可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的mFluor Violet 450琥珀酰亚胺酯检测试剂。
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产品说明书
操作方法
注意:该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml)混合至100μL,以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记,叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得极佳标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B),及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定最佳染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)。
3.6检测上述4种结合物,确定最佳的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
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产品名称 | 货号 |
1mM mFluor dUTP溶液 | Cat#17011 |
mFluor Violet 450 酸 | Cat#1140 |
mFluor Violet 450 马来酰亚胺 | Cat#1600 |
品牌:Pall
CAS No.: 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
360-07191 |
– | 12 plates | – | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌:Sumitomo P
CAS No.: 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
306-41113 |
– | 10 plates | – | 咨询 | – | – |
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* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌:Sumitomo P
CAS No.: 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
304-40396 |
– | 100 plates | – | 咨询 | – | – |
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* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌:Wako
CAS No.:63231-67-4 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
230-00065 |
for Column Chromatography | 500 g | – | 540.00 | – | – |
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品牌:Pall
CAS No.: 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
361-04821 |
– | 100 plates | – | 咨询 | – | – |
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品牌:Pall
CAS No.: 储存条件:室温 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
361-09701 |
– | 100 plates | – | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
品牌:Wako
CAS No.: 储存条件:25℃以下 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
036-17891 |
JCSS (Japan Calibration Service System) | 100 ml | – |
替代品:039-16161 |
– | – |
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