高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

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  • 参考文献

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

BDNF是一种神经营养因子,参与神经发生、神经保护和突触形成,在大脑中发挥着重要作用。据报道,BDNF具有前体proBDNF,并且与BDNF的作用不同。 proBDNF经加工,可成为mBDNF(mature BDNF)。

本产品是一款可特异性检测mBDNF浓度的ELISA试剂盒。

通过使用发光检测系统,灵敏度是旧款产品的20倍左右(产品编号: 296-83201 Mature BDNF ELISA 试剂盒)。 该产品可以检测小鼠血液中难以检测的微量mBDNF。

◆特点

● 高灵敏度

● 特异性检测mBDNF

◆试剂盒组成

96次用

  抗体固定化酶标板

1 plate 

  Mature BDNF标准品 (冻干品)

1支

  缓冲液

60 mL

  生物素结合抗体溶液

100 μL

  过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL

  发光试剂 1

6 mL

  发光试剂 2

6 mL

  清洗液(10x)

100 mL

  封板膜

4 张

◆试剂盒性能


● 标准曲线范围:0.205~50 pg/mL

● 检测对象:mBDNF※1

● 检测对象样品:小鼠 血清/血浆/大脑破碎液

 大鼠 血清/血浆

● 人  血清/血浆/唾液

● 所需样品量:13 μL(4倍稀释时)

● 检测时间:4 h

● 检测法:发光法※2


※1:与人proBDNF的交叉反应性约0.5%。

※2:发光检测需要读板器。

标准曲线示例

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

与Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako(产品编号:296-83201)比较

产品名称

高灵敏度Mature BDNF   ELISA 试剂盒

Mature BDNF ELISA试剂盒

产品编号

298-83901

296-83201

标准曲线范围

0.205~50 pg/mL

4.1~1,000 pg/mL

检测对像

mBDNF

mBDNF

与人proBDNF的反应性

<0.5%

约10%

检测目标样品

小鼠:血清/血浆/大脑破碎液

大鼠:血清/血浆

    人:血清/血浆/唾液

人:血清/血浆

需要样品量

13 μL(4倍稀释时)

血清:10 μL (10倍稀释时)
血浆:5 μL (20倍稀释时)

检测时间

约4 h

约4 h

检测方法

发光分析法

比色法

◆检测原理

本产品使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与mBDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用残端抗体,降低与proBDNF的交叉反应性(<0.5%),并且使用发光底物提供高灵敏度。


高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

本产品

A公司同等产品

B公司同等产品

C公司同等产品

人proBDNF交叉率

<0.5%

约10%

约15%

约50%

灵敏度

(标准曲线下限值)

0.2 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

◆检测数据


加标回收测试


人样品

样品

加标量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

唾液1

0

0.738

20

18.4

17.7

88.5

100

90.3

89.6

89.6

唾液2

0

0.327*

20

18.2

17.9

89.5

100

91.6

91.3

91.3

唾液3

0

1.67

20

22.1

20.4

102

100

98.8

97.1

97.1

唾液4

0

0.512

20

18.1

17.6

88

100

86.9

86.4

86.4

唾液5

0

0.296*

20

18.7

18.4

92

100

95.7

95.4

95.4

唾液6

0

0.393*

20

17.5

17.1

85.5

100

85.5

85.1

85.1

唾液7

0

0.814

20

18.4

17.6

88

100

86.4

85.6

85.6

唾液8

0

4.09

20

23.9

19.8

99

100

91.1

87

87

唾液9

0

0.601

20

18.6

18

90

100

101

100

100

唾液10

0

0.852

20

18.3

17.4

87

100

86.3

85.4

85.4

唾液11

0

1.12

20

18.5

17.4

87

100

100

98.9

98.9

* 标准曲线范围外的检测值(<0.205 pg/mL)仅作参考


小鼠样品

样品

加标量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

血浆1

0

0.622

1

1.57

0.948

94.8

10

10.5

9.88

98.8

30

31

30.4

101

血浆2

0

1.22

0.5

1.77

0.55

110

1

2.13

0.91

91

10

11.5

10.3

103

20

20.7

19.5

97.5

血清1

0

<0.205

1

0.959

0.959

95.9

10

10

10

100

30

30.2

30.2

101

血清2

0

0.82

0.5

1.32

0.5

100

1

1.76

0.94

94

10

10.5

9.68

96.8

20

19.5

18.7

93.5

大鼠样品

样品

加标量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

混合血浆

0

<0.205

1

1.06

1.06

106

5

4.8

4.8

96

10

10.5

10.5

105

20

20.9

20.9

105

混合血清

0

1.08

1

2.13

1.05

105

5

5.87

4.79

95.8

10

10.6

9.52

95.2

20

20.6

19.5

97.5

稀释线性测试


人样品

唾液

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

小鼠样品

血清

血浆

大脑破碎液

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

与其他相似蛋白的反应性


确认proBDNF和神经营养家族(NGF、NT-3和NT-4)之间的交叉性。

蛋白

交叉率 (%)

人 proBDNF

< 0.5

人 NGFβ

< 0.5

人 NT-3

< 0.5

人 NT-4

< 0.5

小鼠 proBDNF

6.62

小鼠 NGFβ

< 0.5

小鼠 NT-3

< 0.5

小鼠 NT-4

< 0.5

【结果】

小鼠proBDNF交叉率为6.62%,其他相似的蛋白的交叉率未满0.5%。

检测示例:自闭症模型小鼠的血清,血浆检测


使用本试剂盒检测自闭症模型小鼠 (BTBR T+Itpr3tf/J)以及野生型小鼠血清与血浆的mBDNF。

样品种类

样品

样品No.

检测值 (pg/mL)

血清

BTBR小鼠

(自闭症模型小鼠)

BTBR-1

12.4

BTBR-2

18.1

BTBR-3

16.1

C57BL/6J

(野生型小鼠)

B6J-1

6.96

B6J-2

9.8

B6J-3

9.01

血浆(肝素)

BTBR小鼠

(自闭症模型小鼠)

BTBR-4

11.1

BTBR-5

9.73

C57BL/6J

(野生型小鼠)

B6J-4

6.93

B6J-5

11.6


【结果】

所有样品都能检测出mBDNF

检测示例:野生型和BDNF敲除小鼠在大脑破碎液中的检测

为确认对mBDNF的特异性,使用本试剂盒检测BDNF敲除小鼠与野生型小鼠大脑破碎液中的mBDNF。

<参考文献 (BDNF敲除小鼠) >
Conover, J. C., et al.: Nature375(6528), 235(1995).

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

【结果】

BDNF敲除小鼠的检测值较低,可确认对BDNF的特异性。


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


FAQ


◆关于样品


Q1. 

如何保存样品?

A1. 

样品需长期储存时,建议在-80 °C以下冻存。

唾液样品室温可保存6 h,冷藏24 h,-20 °C以下保存1个月,检测值基本无变化。(室温,0 h检测值的相对变化率在±10%以内)

尽量避免反复冻融。已确认冻融4次以上检测值会有15%以上的变动。

Q2.

采集唾液样品应该使用什么方法?

A2. 

采集检测用的唾液推荐使用流涏法。流涏法是通过将唾液滴入小瓶或试管来收集样品的方法。

已确认使用棉花和灭活的聚合物材料制的棉签采集的样品,检测结果与流涏法相当。但需注意,不同的棉签材质,可能会吸附待测物质。


Q3.

如果用唾液样品不能顺利检测的时候该怎么做?

A3.

粘性强的唾液可能会无法获得期待的检测值。出现这种情况时,可去除粘液蛋白等不溶物,将收集的唾液先冷冻、解冻,然后使用离心分离(例:1500xg, 15 min)后的上清作为样品进行检测。


Q4. 

小鼠大脑破碎液检测时建议使用何种提取Buffer?

A4. 

请使用添加了蛋白酶抑制剂RIPA Buffer。为避免Buffer中的表面活性剂成分对实验产生影响,请将试剂盒

随附的Bufffer稀释2倍以上。

◆关于本试剂盒


Q1.

使用本产品进行检测时需要什么器具和设备?

A1.

● 纯净水(蒸馏水)

● 标准溶液/样品稀释管

● 清洗液稀释用玻璃器具(量筒,烧杯)

● 枪头交换型移液枪(可正确移液10 μL,以及正确移液20~1000μL的一次性枪头)

● 连续分液移液枪,能连续性分液50 μL的移液枪

● 有吸水性的纸巾等(擦拭清洗后孔板上残留的液体)

● 涡旋振荡器(Vortex  Type)

● 微孔板振荡器(约600~800 rpm)

● 96孔板清洗器(建议使用)或洗瓶

● 96孔板式读数器(发光测量用)

● 数据处理软件

Q2. 

本试剂盒抗体单独销售吗?

A2.

不单独销售

Q3. 

试剂盒可以分次使用吗?

A3. 

可以。孔板设计为每条孔板8个孔,且标准品量充足。但是分次检测时,因每次检测都需绘制标准曲线,所以可检测的样品数量会减少。

使用1次时→40个样品(80孔)※ 标准品使用16孔

使用2次时→32个样品(64孔)※ 标准品使用32孔

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
298-83901 Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive
BDNF成熟体ELISA试剂盒Wako,高灵敏度
96 tests

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako Mature BDNF ELISA Kit Wako

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

Mature BDNF ELISA试剂盒 WakoMature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

Mature BDNF ELISA Kit Wako

BDNF属于NGF(神经生长因子)家族,参与神经发生,神经保护,突触形成等,可作为抑郁症等精神疾病的候补标记物。另外有报告称,BDNF除神经领域以外,还与心脏病、糖尿病、痛风、牙周病、压力、运动等有关,是众多领域的研究对象。

BDNF的前体是proBDNF,通过切断proBDNF的一部分形成mBDNF (mature BDNF)。据报告,proBDNF在生物体内与p75 NTR受体结合,并有着与mBDNF不同的作用。本产品为mBDNF特异性检测ELISA试剂盒。

 

标准曲线范围: 4.1-1000 pg/mL

检测样品类型:人血清、人血浆

所需样品量 :10 μL

检测时间  :4 h

检测法   显色法

 


◆特点


● 仅需少量样品即可检测

● 高灵敏度

● mBDNF特异性检测,与proBDNF交叉率低

 

◆试剂盒组成

96次

 抗体固定化酶标板

1 plate

 Mature BDNF标准品

100 μL

 缓冲液

60 mL

 生物素结合抗体溶液

100 μL

 过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL

 TMB溶液

6 mL

 反应终止液

6 mL

 清洗液(10×)

100 mL

 封板膜

4 张

◆试剂盒性能


标准曲线范围:4.1~1000 pg/mL

检测对象:mBDNF※1

检测对象样品:人血清、人血浆※2

所需样品量:人血清:10 μL(10倍稀释时)人血浆:5 μL(20倍稀释时)

检测时间4 h

检测法:显色法

※1:与proBDNF的交叉反应性约10%。

※2:使用可以识别人、小鼠、大鼠BDNF的抗体。

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

检测原理


本产品使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与mBDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用与N段断面反应的单克隆抗体,降低与proBDNF的交叉反应性(约10%)。

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

本产品

A公司同等产品

B公司同等产品

C公司同等产品

proBDNF交叉率

约10%

约10%

约15%

约50%

灵敏度(标准曲线下限)

4.1 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

◆数据


加标回收率试验

样品

添加量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

人血清①

0

330

100

423

93

93

250

581

251

100

500

817

487

97.4

人血清②

0

56.6

50

106

49.4

98.8

100

154

97.4

97.4

200

257

200

100

300

363

306

102

样品

添加量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

人血浆①

0

156

100

252

96

96

250

407

251

100

500

661

505

101

人血浆②

0

66

50

115

49

98

100

164

98

98

200

276

210

105

300

369

303

101

稀释线性测试

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako


检测案例:临床样品检测

使用本产品检测精神疾病患者(重度抑郁症、狂躁抑郁症、精神分裂症)以及健康个体血清中的mBDNF。

健康个体(n=6)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

48

14.5

2

F

50

22.8

3

F

54

20

4

F

47

18.5

5

F

42

13.8

6

F

60

19.1

重度抑郁症(n=6)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

66

15.7

2

F

38

18.1

3

F

43

10

4

F

52

16.6

5

F

41

22.3

6

F

58

15.1

狂躁抑郁症(n=4)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

46

16.5

2

F

52

20.9

3

F

52

11.5

4

F

52

11.5

精神分裂症(n=4)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

36

17.9

2

F

53

23

3

F

55

14.6

4

F

51

10.8

健康个体

重度抑郁症

狂躁抑郁症

精神分裂症

18.1 ± 3.41

16.3 ± 4.02

15.1 ± 4.53

16.6 ± 5.17

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

FAQ


◆实验必要的器材、仪器


Q. 使用本产品检测时有哪些必要的器材或仪器呢?

A. ● 纯净水(蒸馏水)

A. ● 标准溶液/样品稀释用试管

A. ● 清洗液稀释用玻璃器材(量筒/烧杯)

A. ● 移液器(使用一次性吸头准确吸取50 μL以及100~1000 μL的移液器)

A. ● 多道移液器

A. ● 纸巾、擦拭布等(擦拭清洗后微孔板上残留的液体)

A. ● 混合振荡器(Vortex)

A. ● 微孔板振荡器(约600~1200 rpm)

A. ● 洗板机(建议使用)或洗瓶

A. ● 酶标仪(450±10 nm / 600~650 nm)

A. ● 数据计算用软件

 

◆试剂盒使用抗体销售


Q. 本产品的抗体可单独购买吗?

A. 不可以。

 


◆试剂盒形态


Q. 试剂盒可以拆分使用吗?

A. 可以。试剂盒使用了8联排可拆卸酶标板,并配有足够标准品。但拆分使用时,每次都需要绘制标准曲线,

A. 因此可检测样本数量会有所减少。

A. ■ 1次使用时

A.  40个样品(80孔)

A.■  ※ 标准品占用16 孔

A. ■ 分2次使用时

A.  32个样品(64 孔)

A.■  ※ 标准品占用32 孔

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
296-83201 Mature BDNF ELISA Kit Wako
Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako
96次