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JC-1 MitoMP Detection Kit
JC-1 MitoMP Detection Kit
- 細胞染色用色素
- 細胞機能解析
- ミトコンドリア関連
ミトコンドリア膜電位検出キット
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製品コードMT09 JC-1 MitoMP Detection Kit
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 1 set | ￥23,800 | 349-09401 |
| 1 set | JC-1 Dye Imaging Buffer (10x) |
100 nmol x1 11 ml x1 |
|---|
- ご購入方法
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マニュアル
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取扱説明書
日本語 
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取扱説明書 English
技術情報
技術情報の目次
- なぜミトコンドリア膜電位が見られているか
- JC-1の化学構造と性質
- 操作の流れ
- 初めてでも使いやすい
- 実験例：脱分極による評価
- 実験例：アポトーシス誘導時の評価
- 実験例：ミトコンドリアスーパーオキサイドと膜電位の同時測定
- 実験例：マイトファジー誘導とミトコンドリア膜電位変化の検出
- 実験例：ミトコンドリア膜電位、老化、細胞周期との関連性
実験例：ミトコンドリア膜電位、老化、細胞周期との関連性
細胞周期のG2/M 期に作用して細胞増殖を停止させ、細胞老化を誘導することが知られているDoxorubicin(DOX) をA549 細胞へ添加後、Cell Cycle Assay Solution Blue （製品コード：C549）/ Deep Red（製品コード：C548）でA549 細胞における細胞周期の変化と、Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal（製品コード：SG03）で細胞老化、本製品でミトコンドリア膜電位の変化を確認しました。
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技術や使用製品に関する補足
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細胞周期測定試薬
Cell Cycle Assay Solution Blue
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老化細胞検出キット
Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal
参考文献
| 文献No. | 対象サンプル | 装置 | 引用（リンク） |
|---|---|---|---|
| 1) | 細胞 （U2OS, HeLa） |
蛍光顕微鏡 | T. Namba, "BAP31 regulates mitochondrial function via interaction with Tom40 within ER-mitochondria contact sites ", Sci Adv., 2019, 5, (6), 1386. |
| 2) | 細胞 （Neuron） |
蛍光顕微鏡 | I. Kawahata, L. Luc Bousset, R. Melki and K. Fukunaga , "Fatty Acid-Binding Protein 3 is Critical for α-Synuclein Uptake and MPP+-Induced Mitochondrial Dysfunction in Cultured Dopaminergic Neurons ", Int J Mol Sci., 2019, 20, 5358. |
| 3) | 細胞 （3T3L1, C2C12） |
プレートリーダー | M. Kurano, K. Tsukamoto, T. Shimizu, H. Kassai, K. Nakao, A. Aiba, M. Hara and Yatomi , "Protection Against Insulin Resistance by Apolipoprotein M/Sphingosine 1-Phosphate ", Diabetes, 2020, DOI: 10.2337/db19-0811. |
| 4) | 細胞 （ALM) |
プレートリーダー | T. Nechiporuk, S.E. Kurtz, O. Nikolova, T. Liu, C.L. Jones, A. D. Alessandro, R. C. Hill, A. Almeida, S. K. Joshi, M. Rosenberg, C. E. Tognon, A. V. Danilov, B. J. Druker, B. H. Chang, S. K McWeeney and J. W. Tyner , "The TP53 Apoptotic Network Is a Primary Mediator of Resistance to BCL2 Inhibition in AML Cells.", Cancer Discov, 2019, 9, |
| 5) | 細胞 （マクロファージ) |
蛍光顕微鏡 | G. Yang, M. Fan, J. Zhu, C. Ling, L. Wu, X. Zhang, M. Zhang, J. Li, Q. Yao, Z. Gu and X. Cai, "A multifunctional anti-inflammatory drug that can specifically target activated macrophages massively deplete intracellular H2O2 and produce large amounts CO for a highly efficient treatment of osreoarthritis" , Biomaterials, 2020, doi:10.1016/j.biomaterials.2020.120155. |
| 6) | 細胞 （ARPE-19) |
蛍光顕微鏡 | J. H. Quan, F. F. Gao, H. A. Ismail, J. M. Yuk, G. H. Cha, J. Q. Chu and Y. H. Lee, "Silver Nanoparticle-Induced Apoptosis in ARPE-19 Cells Is Inhibited by Toxoplasma gondii Pre-Infection Through Suppression of NOX4-Dependent ROS Generation", Int J Nanomedicine , 2020, 15, 3695–3716. |
| 7) | 細胞 （A549) |
フローサイトメーター | C. N. D’Alessandro-Gabazza, T. Yasuma, T. Kobayashi, M. Toda1, A. M. Abdel-Hamid, H. Fujimoto, O. Hataji, H. Nakahara, A. Takeshita, K. Nishihama, T. Okano, H. Saiki, Y. Okano, A. Tomaru, V. F. D’Alessandro, M. Shiraishi, A. Mizoguchi, R. Ono, J. Ohtsuka, M. Fukumura, T. Nosaka, X. Mi, D. Shukla, K. Kataoka, Y. Kondoh, M. Hirose, T. Arai, Y. Inoue, Y. Yano, R. I. Mackie, I. Cann and E. C. Gabazza, "Inhibition of lung microbiota-derived proapoptotic peptides ameliorates acute exacerbation of pulmonary fibrosis", Nat. Comm., 2022, doi:10.1038/s41467-022-29064-3. |
よくある質問
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Q
1キットあたりの使用回数の目安は？
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A
目安となる使用回数の目安は、下記を参考にしてください。
装置 容器 回数 液量 フローサイトメーター － 100回 0.5 ml/回 蛍光顕微鏡
マイクロプレートリーダー35 mm dish 25 枚 2 ml/枚 8 well チャンバースライド 30 枚 200 µl/well 96 well マイクロプレート 5 枚 100 µl/well * 容器毎で使用する液量によって使用回数は変わります。容器と液量を予め確認の上、ご使用ください。
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Q
JC-1染色後の細胞の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？
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A
細胞へのダメージを軽減するため、HBSSの使用を推奨しております。HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄を推奨します。
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Q
血清入り培地を使用してもいいですか？
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A
細胞洗浄やWorking Solutionに血清入り培地を使用して頂いて構いません。蛍光観察時はImaging Bufferを推奨しますが、血清入り培地をご使用の場合はフェノールレッド不含培地を推奨します。
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Q
染色後の細胞固定化、または細胞固定化後の染色は可能ですか？
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A
固定化によりミトコンドリアが脱分極するため、染色後の固定及び固定化後の染色は出来ません。
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Q
薬剤処理したサンプルをコントロールと比較したところ、赤と緑の両方の蛍光値が増加(又は減少)しました。 結果をどのように解釈すればよいのでしょうか？
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A
赤色と緑色の蛍光比を比較してください。
薬剤処理サンプルとコントロールの各々で赤色蛍光値/緑色蛍光値の比を算出してください。
両者を比較して蛍光比が低い程ミトコンドリア膜電位が低下していると考えられます。(赤/緑の比で評価する理由)
JC-1は膜電位依存的に細胞に蓄積するため、細胞の状態により細胞あたりのJC-1の濃度は異なる場合があります1)2)。(コントロールと薬剤処理サンプルでは細胞の状態が異なるため、JC-1の蓄積濃度が異なります。)
また、JC-1はミトコンドリア膜電位が高い状態では凝集し緑から赤色に蛍光がシフトします。この凝集体の量は膜電位の程度に依存する3)ことから、赤/緑の比でサンプル間のミトコンドリア膜電位を比較することができます。＜参考文献＞
1) Cossarizza, A. et al., Biochem Biophys Res Commun., 1993, 197(1), 40.
2) Perelman, A. et al., Cell Death and Disease, 2012, 3, e430
3) Smiley, S. T. et al., Proc. Nail. Acad. Sci., 1991, 88, 3671.
取扱条件
| 1.安衛法, 2.保存方法：冷蔵 |
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