MT-1 MitoMP Detection Kit

05 細胞染色用色素

MT-1 MitoMP Detection Kit

• 細胞染色用色素
• ミトコンドリア関連

MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット

• 生細胞で使用できる、染色後に固定化できる
• ミトコンドリア膜電位のモニタリングができる
• ミトコンドリア膜電位の変化を高感度に検出できる

• 製品コード
  MT13　 MT-1 MitoMP Detection Kit

＜使用回数の目安＞ 1 set あたり、35 mm dish 30 枚

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マニュアル

従来試薬の３つの課題を解決

ミトコンドリア膜電位を観察する際、JC-1やTMRE、TMRMが使用されていますが、PFA固定不可、光退色などの試薬特性により、データの再現性に課題がありました。MT-1 MitoMP Detection Kitは、これらの課題を克服したミトコンドリア膜電位の検出キットです。
さらに、本キットに含まれる Imaging Bufferにより、蛍光バックグラウンドと細胞へのダメージを抑えた状態で観察することができます。

Q

タイムラプスイメージングする場合の注意点はありますか？

A

注意点として、励起光を最大限に抑え、検出感度を上げた上でご撮影ください。
細胞への断続的な励起光の照射は、細胞へのダメージと蛍光色素の分解を引き起こす可能性がありますので、インターバルの時間などをご検討ください。

Q

本品で染色後、細胞の固定化は可能ですか？

A

染色後、4% PFAで細胞を固定化できますが、膜透過処理は色素が漏れ出す原因となるためできません。

Q

細胞を固定化後に染色することは可能ですか？

A

ミトコンドリア膜電位に依存してミトコンドリアに集積するため、固定化後の染色はできません。

Q

蛍光強度を比較する場合のポジティブコントロールになる実験例はありますか？

A

ポジティブコントロールとして、取扱説明書にFCCP(carbonylcyanide-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone)を用いた実験例を掲載しています。

Q

染色条件を検討する場合、MT-1 Dyeはどれくらいの濃度で使用すればよいですか？

A

MT-1 Dyeの濃度は1000倍希釈での使用を推奨しておりますが、染色条件を最適化される場合は以下をご参考ください。
　<蛍光強度が弱い場合>
　　500～1,000倍希釈の間でご検討ください。
　<非特異吸着がみられる場合>
　　1,000～2,000倍希釈の間でご検討ください。

Q

HBSSは どのようなものを使用すればよいですか？

A

フェノールレッドフリーのHBSS(+)をご使用ください。

(使用実績のあるHBSS)
製品名：HBSS(1x), 　メーカー：GIBCO, Code：14025-092

Q

MT-1 working solutionの添加後、洗浄操作を行わずに観察できますか？

A

染色後は未洗浄でも観察可能ですが、未洗浄での長時間観察は細胞毒性を生じる可能性があるため、お勧めしません。
上澄みを除いて、ご使用の培地へ置換することをお勧めします。

Q

MT-1 working solutionの調製にバッファーは使用できますか？

A

Hanks’ HEPES やHBSSが使用可能です。また、10 % FBS含有MEM、RPMI、MEMを用いて調製することもできます。

Q

MT-1で染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？

A

細胞へのダメージを軽減するため、HBSSの使用を推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお勧めします。

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