Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 货号15296-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光     货号15296 货号 15296 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 6432
Ex (nm) 593 Em (nm) 655
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和药物发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平升高与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,检测细胞内NAD具有挑战性。(P)H在生物系统中。Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测远光谱活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,可与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。JJ1902 NAD(P)H探针是一种优秀的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。JJ1902 NAD(P)H探针可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用APC通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道

产品说明书

实验样品示例

概述

1.准备细胞(0.5  –  1×106细胞/ mL)

2.将含有测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针的细胞在37℃孵育20-30分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.使用APC通道用流式细胞仪分析细胞

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.对于每个样品,将细胞制备在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中,密度为1×105至1×106个细胞/ mL。

注意1:应对每个细胞系进行单独测评,以确定最佳细胞密度。 对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。

注意2:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也兼容。

 

2.将细胞与测试化合物在37℃孵育所需的一段时间以刺激细胞内NADH / NADPH。

注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型和使用的测试化合物。 优化每个实验的孵育时间。

 

3.将1μL JJ1902NAD(P)H探针(组分A)加入0.5 mL细胞悬浮液中。在37℃下孵育30-60分钟。

注意对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共温育30分钟。 详细信息请参见说明书中的图1。

4.用所需的缓冲液(如HHBS或DPBS)洗涤细胞一次。将细胞保存在分析缓冲液(组分B)中。

 

5.使用流式细胞仪监测APC通道的荧光强度。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

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产品名称 货号
Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 Cat#15291

说明书
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Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Reduced Form(beta-NADPH) 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸还原型(β-NADPH) 品牌:O Yeast


品牌:O Yeast
CAS No.:2646-71-1
储存条件:-20℃
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NADP/NADPH 測定キット NADP/NADPH Assay Kit-WST 同仁化学研究所

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NADP/NADPH 測定キット

  • 製品コード
    N510  NADP/NADPH Assay Kit-WST
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 tests ¥55,800 344-09331
キット内容
100 tests NADP/NADPH Extraction Buffer     
NADP/NADPH Control Buffer       
Standard Buffer              
Assay Buffer                
Dye Mixture                   
Enzyme
Standard   
Filtration Tube
20 ml ×1
20 ml ×1
10 ml ×1
5.5 ml ×1
×1
110 μl ×1
×1
×12

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技術情報

測定原理

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技術や使用製品に関する補足

NADP/NADPH 測定キット NADP/NADPH Assay Kit-WST 同仁化学研究所学会発表ポスター

WSTを用いた細胞の代謝解析

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参考文献

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1) C. Henninger and G. Fritz, “Statins in anthracycline-induced cardiotoxicity: Rac and Rho, and the heartbreakers.”, Cell Death Dis. 2017, 8(1), e2564.
2) S. Mandziuk, R. Gieroba, A. Korga, W. Matysiak, B. Jodlowska-Jedrych, F. Burdan, E. Poleszak, M. Kowalczyk, L. Grzycka-Kowalczyk, E. Korobowicz, A. Jozefczyk and J. Dudka, “The differential effects of green tea on dose-dependent doxorubicin toxicity.”, Food Nutr Res., 2015, 59, 29754.
3) M. Nagaya, H. Hara, T. Kamiya and T. Adachi,"Inhibition of NAMPT markedly enhances plasma-activated medium-induced cell death in human breast cancer MDA-MB-231 cells.", Arch. Biochem. Biophys., 2019, 676, 108155.

よくある質問

Q

1キットで測定可能なサンプル数は?

A

全てのサンプルをn:3で測定した際のサンプル数の目安は下記の通りです。

  『NADP+とNADPHの総量』
または『NADPH量』の何れかを測定する場合
『NADP+とNADPHの総量』
および『NADPH量』の両方を測定する場合
サンプル数 24サンプル 12サンプル

 ※標準サンプルを2 μmol/Ⅼから段階希釈し、計8点(n:3)で検量線を1回作成した際に測定可能な実サンプル数を記載。
   測定を2回に分けて行う場合は、別途検量線を作成する必要があるため上記サンプル数よりも少なくなります。

Q

Filtration Tube(除タンパク質用)は別途購入できますか?

A

ご不便おかけしますが、Filtration Tubeのみの販売は行っておりません。

小社にて実績のある市販の除タンパク質用チューブをご紹介いたします。

製造メーカー:Pall Corporation

製品名:ナノセップ遠心ろ過デバイス (分画分子量:10K、色:ブルー)

Q

Working solutionはどのくらい安定ですか?

A

Working solutionは保存できません。用時調製して下さい。また、光に対して不安定なため

溶液調製後は遮光して下さい。遮光、室温で4時間安定です。

Q

サンプルが発色しない原因はありますか?

A

 測定試料中に含まれているNAD量が、本キットで定量可能な濃度(10 nmol/L)以下となっている可能性があります。

その場合は細胞数を増やして頂くか、測定試料を希釈している場合は、希釈倍率を下げて測定して下さい。

Q

測定試料は保存できますか?

A

保存できます。取扱説明書 [1.測定用サンプルの調製]の操作6)の溶液は、冷凍(-20℃)で2週間保存可能であることを確認しております。

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取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵,遮光, 2.吸湿注意
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