AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

04 細胞内蛍光プローブ

AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

• 細胞内蛍光プローブ
• 細胞内蛍光プローブ
• 蛍光色素
• 顕微鏡
• 標識キット

pHセンサーラベル化キット

• pH感受性蛍光色素をラベル化できる
• ラベル化に必要なものが同梱されているオールインワンのキット
• 詳細な標識マニュアル

• 製品コード
  A558　 AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

初めてでも迷わない実験操作

本キットは、未反応の色素を除くために必要なフィルトレーションチューブを同梱しており、標識から精製操作までを行うことができます。^※
また、取扱説明書に沿って実験していただくことで、初めての方でも容易に AcidSensor を標識することが可能です。

※ 抗体やタンパク質は含まれません。
※ DMSO と培地は、別途ご準備ください。

Q

サンプル溶液中の共存物は標識反応に影響しますか。

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じて標識に用いるサンプルの精製を行い、ご使用ください。
標識対象以外の分子量 10,000 以上のアミノ基を有する共存物は標識効率を低下させ、また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。
また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
反応に使用する前に別途除去操作を行ってください。

Q

標識体を回収するWS buffer に細胞毒性はありますか？

A

WS buffer 中には、細胞毒性をほとんど示さない量の安定化剤(界面活性剤)を含んでいます。もし細胞への影響が気になる場合は、別途任意のバッファーを用いて標識体を回収してください。

Q

血清含有培地で標識体の取込みや観察ができますか？

A

血清成分がAcidSensor の性能に影響を与えることはありませんが、血清タンパク質によりエンドサイトーシス経路の取り込みが阻害される可能性があります。実験に応じて血清を含めるかどうかご検討ください。

Q

標識率はどのように算出すればよいですか。

A

標識体を WS buffer で5倍希釈して500nm と280 nmの吸光度を測定後、以下の式より標識率を算出してください。

A₅₀₀: 500 nm の吸光度

A₂₈₀: 280 nm の吸光度

ε_protein: タンパク質の280nmでのモル吸光係数、

NH₂-Reactive AcidSensor のWS buffer 中における A₅₀₀ のモル吸光係数が 48400 です。

NH₂-Reactive AcidSensor は280nmと500nmに吸収があり、280nm/500nmの比が 0.16です。

標識対象が IgG の場合、はε_protein は216,000 を使用してください。

Q

タンパク質1分子あたりにNH₂-Reactive AcidSensor はいくつ標識されますか。

A

Mouse IgG において、1分子あたり平均3つのAcidSensor が標識されることを確認しています。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。