皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)酶试剂盒Takara

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皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635005 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 12 Rxns ¥15,684 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 635006 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 48 Rxns ¥46,033 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 635007 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 96 Rxns ¥63,435 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 634411 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 12 Rxns ¥12,881 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 634412 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 48 Rxns ¥43,794 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 634413 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 96 Rxns ¥57,613 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
Clontech 634414 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 192 Rxns ¥103,664 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input
Mammalian以皮克级总RNA构建Illumina链特性RNA-seq文库
· 皮克级样品起始—可以250 pg-10 ng人,小鼠或大鼠总RNA起始
· 用途广泛—可以不同品质RNA(包括FFPE/LCM样品及游离RNA)制备文库,获得高重复再现数据
· 性能提升-不增加PhiX也可获得较高的簇通过过滤百分比(FP%),识别更多转录本,重复更少
· 保留链来源信息—转录本链来源信息识别准确度高
· 快速,一体化流程—整体流程只需~6 h ,改良了buffer配方,缩短了文库纯化时间
· 无缝衔接Illumina测序—直接制备多达96种index的 Illumina®-ready文库
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian设计用于从皮克级总RNA(250 pg–10 ng)中高效制备Illumina测序文库。本试剂中采用的技术适用于高品质,部分降解及低品质RNA(如来自于FFPE或LCM样品)。本试剂是一体化操作流程,保留了链来源信息,并且不需要下游文库制备,在反转录和PCR扩增过程中就可以添加indexes和接头。升级产品与原有SMARTer 皮克级产品相比,提升了在所有Illumina测序平台的测序性能,并且文库纯化操作更加方便。
核糖体RNA在总RNA中占有很高的比重(~90%)。在制备文库前从总RNA中去除掉这些大量的RNA,有利于降低测序成本,提高统计数据的比对比率。但是在以微量样品起始时,如果一开始就从总RNA中去除rRNA,会造成纯化后的起始样品太少而不能制备高品质测序文库,本试剂采用专有的特异针对哺乳动物rRNA和部分线粒体RNA的探针去除核糖体cDNA(来源于核糖体RNA的cDNA片段)。采用本试剂制备的文库与前代试剂制备的文库接头配置不同,即使是使用基于双通道SBS技术的Illumina平台如NextSeq®, MiniSeq, 和 HiSeq® 3000/4000测序时,不需要添加大量PhiX也可以获得高比例的簇通过过滤百分比(%PF)。每个run可以获得更多的生物学相关测序reads,这又反过来减少了测序成本。采用Pico v2 Kit同样可以获得更多的特异转录本,更低的rRNA、mtRNA比对率和重复率。此外,Pico v2 Kit包含了一种新的PCR buffer,提高了文库纯化效率。
试剂盒提供12,48,96和192次反应规格。高通量版本试剂 (Code No. 634413,634414) 包含12种反向引物,8种正向引物,最多可以构建96种indexes文库。包括文库构建及纯化的整体流程只需~6 h。
 
不同样品起始量解决方案:
· 10-100 ng 总RNA, 推荐使用 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – Low Input Mammalian
· 100 ng-1 μg总RNA, 推荐使用SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian
 
皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
图1. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian技术流程
 
皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
图2. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian提高了通过过滤百分比(FP%)。如图所示,分别采用Pico v1 或Pico v2制备文库并使用NextSeq 500 或 MiniSeq平台测序。图中,蓝色图框表示未过滤(原始)reads的簇密度分布,绿色图框表示通过过滤reads的簇密度分布。 图中显示了通过过滤的reads数(以百万计)和每个run的%PF。
 
皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
图3. 新的SeqAmp CB PCR buffer利于磁珠-沉淀物形成。Pico v2中的PCR buffer经过重新设计可以更快、更紧密的形成磁珠-沉淀物。经过磁力分离后,在新的SeqAmp CB buffer(右)中的沉淀物比原来PCR buffer(左)中的沉淀物更紧密。紧密的沉淀物比松散的沉淀物更容易干燥,易于重悬。
 
皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
图4. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 提升了灵敏度和重复再现性。上图为以1 ng和10 ng人肺FFPE来源的总RNA起始,分别采用Pico v1和Pico v2构建文库,NextSeq 500测序数据。Panel A. 以1 ng和10 ng样品起始,分别采用Pico v1和v2构建文库的测序数据。Panel B. 不同样品起始量之间,转录本表达水平的比较分析。
 
 
Technote:
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皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina) SMARTer Stranded RNA-Seq PICO:
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皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
       
FFPE样本的RNA-Seq文库解决方案 点击图片下载 皮克级链特异 Total RNA-Seq (for Illumina)
 
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单细胞total RNA分析酶试剂盒Takara

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单细胞total RNA分析
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634442 SMART-Seq® Stranded Kit 12 Rxns ¥12,631 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析
Clontech 634443 SMART-Seq® Stranded Kit 48 Rxns ¥41,939 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析
Clontech 634444 SMART-Seq® Stranded Kit 96 Rxns ¥55,549 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析 单细胞total RNA分析
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SMART-Seq® Stranded Kit
SMART-Seq® Stranded Kit:以单细胞起始,构建高质量的链特异性RNA-seq文库
· 操作简便:以1–1,000个细胞 或10 pg-10 ng的总RNA起始,仅需7h即可完成文库制备;
· 高灵敏度:可以单细胞起始,保留链特异性,最终获得全长总RNA序列信息;
· 高再现性:准确检测包含编码和非编码RNA在内的全部转录组;
· 用途广泛:适用于降解的样本;
· 适用对象:人、小鼠、大鼠。
 
SMART-Seq® Stranded Kit能够直接从1-1,000个完整细胞(或10 pg-10 ng总RNA)起始,制备链特异性Illumina测序文库。本试剂采用随机引物法可以制备完整的转录组文库,并适用于部分降解及低品质的RNA。此外,本试剂采用专有的ZapR技术,在文库制备过程中去除核糖体cDNA。
 
如果是以oligo-dT引物起始对微量高品质的RNA进行cDNA合成时,推荐使用 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 或SMART-Seq HT Kit试剂盒。
 
单细胞total RNA分析
图1. SMART-Seq Stranded Kit的技术流程
 
单细胞total RNA分析
图2. 使用SMART-Seq Stranded Kit制备文库的结构特征
 
接头序列包含:通过PCR 1反应添加的可以与Illumina流动池结合生成簇的P7、P5序列(P7以淡蓝色表示,P5以红色表示),用于区分单个lane上多个样本的Index序列(Index 1 [i 7] 序列连接在P7端,Index 2 [i 5]连接在P5端)。并且还包括识别测序引物区域的Read 2(紫色)和 Read 1(绿色)。通过Read 1起始得到的原始RNA的反义链序列,Read 2起始获得的是原始RNA的正义链序列。其中,通过Read 2起始时,前3个碱基(XXX)是SMART-Seq Stranded Adapter衍生的序列。因此在双端测序时,需要在mapping前去掉这3个碱基。
 
单细胞total RNA分析
表1.不同样本起始量的分析结果
 
以人脑总RNA 10 pg至10 ng不同量起始,使用SMART-Seq Stranded Kit制备RNA-Seq文库。该表中所显示的数据是三次重复的平均值,且重复之间相关性系数非常高(Pearson/Spearman表示)。即使起始量为10 pg时,也具有非常高的重现性。
 
单细胞total RNA分析
图3. 在低起始量时,SMART-Seq Stranded Kit和Pico v2的比较
 
Panel A.以人脑总RNA (50 pg-10 ng)起始,分别使用SMART- Seq Stranded Kit和SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 -Pico Input Mammalian (Pico v2)制备RNA-Seq文库(均做三次重复)。从测序数据随机抽取250万paired-end reads进行生物学信息分析。
 
Panel B.比较这两个试剂盒在总RNA以 50 pg起始制备文库的转录表达水平 (见Panel A), SMART-Seq Stranded Kit (Pearson =0.97)的再现性高于Pico v2 (pearson =0.92)。
 
单细胞total RNA分析
 
单细胞total RNA分析
图4. 不同起始量样本的高重现性
 
利用FACS分离出A375细胞,分别以1-1,000个细胞起始使用SMART-Seq Stranded Kit制备测序文库。其中,以5-1,000个细胞起始时,均做两个重复;以单个细胞起始时,做12个重复。为了作比较,同时使用从两种1,000个细胞中纯化的总RNA制备文库。
 
Panel A.:1-1,000个细胞起始的分析结果;
 
Panel B.:通过聚类热图展示了Panel A.中所示的所有样本的Euclidea距离,以及Pearson相关系数(范围为0.85至0.99)。其中单细胞样本标记为Cell1-Cell12,其他样本分别标记为a-b。
 
Technote单细胞total RNA分析
 
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QUANTOM™总细胞染色试剂盒 QUANTOM™ Total Cell Staining Kit

QUANTOM™总细胞染色试剂盒

QUANTOM™ Total Cell Staining Kit

详细描述:
QUANTOM™ 总细胞染色试剂盒用于标记细菌细胞,以便使用 QUANTOM Tx™ 微生物细胞计数器进行计数。 QUANTOM™ Total Cell Staining Dye 是一种可透过膜的荧光染料,可以对活细胞和死细胞中的核酸进行染色。 使用 QUANTOM™ 总细胞染色染料可以检测革兰氏阳性和阴性细菌细胞。 QUANTOM™ Total Cell Staining Enhancer 可改善染料对细胞的渗透, 还能使染料均匀分布在溶液中,在多幅图像采集过程中保持每个视野的背景均匀。 QUANTOM™ Cell Loading Buffer I 是一种梯度培养基,用于 QUANTOM™ M50 细胞计数玻片中细菌细胞的均匀分布和沉淀。

QUANTOM™ Total Cell Staining Dye (1 x 0.25 mL), QUANTOM™ Cell Loading Buffer I (2 x 1 mL), QUANTOM™ Total Cell Staining Enhancer (1 x 0.5 mL)

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
Q13501 QUANTOM™总细胞染色试剂盒 1 Kit 咨询客服

EPIXTRACT® Total Histone Extraction Kit (High Throughput) EpiXtract 总组蛋白抽提 试剂盒 (高通量) 品牌:Enzo


品牌:Enzo
CAS No.:
储存条件:+4℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-45013-0002

2×96 Reactions 4,490.00


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 从细胞中提取组蛋白。
特点:
1.方便:步骤优化
2.快捷:1h完成
3.可靠:可重复性高,保持翻译后修饰的完整性
4. 高效:最低可以从1mg组织或10^5细胞中提取

EPIXTRACT® Total Histone Extraction Kit EpiXtract 总组蛋白抽提 试剂盒 品牌:Enzo


品牌:Enzo
CAS No.:
储存条件:+4℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-45014-0100

100 Reactions 2,860.00


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

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特点:
1.方便:步骤优化
2.快捷:1h完成
3.可靠:可重复性高,保持翻译后修饰的完整性
4. 高效:最低可以从1mg组织或10^5细胞中提取

TOTAL-NUCLEAR-ID® green/red nucleolar/nuclear detection kit 总细胞核-ID 绿色/红色 细胞核仁/细胞核 检测试剂盒(荧光显微镜) 品牌:Enzo


品牌:Enzo
CAS No.:
储存条件:-80℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51006-500

1 Kit 4,060.00


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 活细胞内细胞核和核仁同时双重染色 应用:流式细胞仪 荧光检测  组分: Nucleolar-ID® Green检测试剂, 50 µL

Nuclear-ID® Red 检测试剂, 50 µL

放线菌素D 对照, 125 µg(处理细胞,荧光减弱)

10X 检测缓冲液, 15 mL

爱尔兰MEGAZYME 膳食纤维总量检测试剂盒 K-TDFR-200A Total Dietary Fibre Assay Kit 货号:K-TDFR-200A Megazyme试剂盒

爱尔兰MEGAZYME 膳食纤维总量检测试剂盒 K-TDFR-200A

英文名: Total Dietary Fibre Assay Kit

货号:K-TDFR-200A

规格:200 assays per kit

市场价: 7046

 K-TDFR 中文版说明书下载

 

Content: 100 assays / 200 assays

Shipping Temperature: Ambient

Storage Temperature: Short term stability: 2-8oC,

Long term stability: See individual component labels

Stability: > 2 years under recommended storage conditions

Analyte: Dietary Fiber

Assay Format: Enzymatic

Detection Method: Gravimetric

Signal Response: Increase

Limit of Detection: 0.5 g/100 g

Total Assay Time: ~ 100 min

Application examples: Food ingredients, food products and other materials.

Method recognition: AACC Method 32-05.01, AACC Method 32-06.01, AACC Method 32-07.01, AACC Method 32-21.01, AOAC Method 985.29, AOAC Method 991.42, AOAC Method 991.43, AOAC Method 993.19, CODEX Method Type I and GB Standard 5009.88-2014

 

The Total Dietary Fiber Assay Kit for the analysis of Total, Soluble and Insoluble Dietary Fiber according to AOAC and AACC approved methods.

 

View Dietary Fiber Measurement Guide – Which Method for which sample?

 

Dietary fiber can generally be described as the carbohydrate content of food that is not digested in the human small intestine. It passes into the large intestine where it is partially or fully fermented. These characteristics of dietary fiber are associated with its numerous well documented health benefits.

 

Dietary Fiber is a mixture of complex organic substances, including hydrophilic compounds, such as soluble and insoluble polysaccharides and non-digestable oligosaccharides, as well as a range of non-swellable, more or less hydrophobic, compounds such as cutins, suberins and lignins. The procedures for the determination and analysis of total dietary fiber as outlined in our assay protocol are based on the methods of Lee et al.1 and Prosky et al.2,3 (AOAC 991.43, AOAC 985.29, AACC 32-07.01 and AACC 32-05.01). However, the enzymes in the Megazyme Total Dietary Fiber Kit can also be used in other dietary fiber analytical methods such as AACC Method 32-21.01 and AACC Method 32-06.01.

 

1. Association of Official Analytical Chemists. (1985). Official Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43, A20, p.399.

2. Association of Official Analytical Chemists. (1986). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69, 370.

3. Association of Official Analytical Chemists. (1987). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70, 393.

 

See General Referee Reports: Journal of AOAC INTERNATIONAL, Vol. 81, No. 1, 1998. 

 

Two separate methods are described in the associated assay protocol:

 

METHOD 1: DETERMINATION OF TOTAL, SOLUBLE AND INSOLUBLE DIETARY FIBER

Based on AOAC Method 991.43 “Total, Soluble, and Insoluble Dietary Fiber in Foods” (First Action 1991) and AACC Method 32-07.01 “Determination of Soluble, Insoluble, and Total Dietary Fiber in Foods and Food Products” (Final Approval 10-16-91).

 

METHOD 2: DETERMINATION OF TOTAL DIETARY FIBER

Based on AACC method 32-05.01 and AOAC Method 985.29.

 

含量:100个分析/200个分析

运输温度:环境温度

储存温度:短期稳定性:2-8oC,

长期稳定性:参见单个组件标签

稳定性:在推荐的储存条件下超过2年

分析物:膳食纤维

测定形式:酶法

检测方法:重量法

信号响应:增加

检测限:0.5 g/100 g

总测定时间:~100分钟

应用实例:食品配料、食品及其他材料。

方法识别:AACC方法32-05.01,AACC方法32.06.01,AAC方法32-07.01,AACC方法32-21.01,AOAC方法985.29,AOAC法991.42,AOAC方式991.43,AOAC办法993.19,CODEX方法I型和GB标准5009.88-2014

根据AOAC和AACC批准的方法,用于分析总膳食纤维、可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的总膳食纤维测定试剂盒。

查看膳食纤维测量指南-哪种方法适用于哪个样本?

膳食纤维通常可以描述为食物中未在人体小肠中消化的碳水化合物含量。它进入大肠,在那里部分或完全发酵。膳食纤维的这些特性与其众多有充分证明的健康益处有关。

膳食纤维是复杂有机物质的混合物,包括亲水性化合物,如可溶性和不溶性多糖和不易消化的低聚糖,以及一系列不溶胀、或多或少疏水的化合物,如角质、木栓素和木质素。我们的测定方案中概述的总膳食纤维的测定和分析程序基于Lee等人1和Prosky等人2,3的方法(AOAC 991.43、AOAC 985.29、AACC 32-07.01和AACC 32-05.01)。然而,Megazyme总膳食纤维试剂盒中的酶也可用于其他膳食纤维分析方法,如AACC方法32-21.01和AACC方法32.06.01。

1.官方分析化学家协会。(1985)。《官方分析方法》,第14版,第1次增补,第2节。43,A14-43,A20,第399页。

2.官方分析化学家协会。(1986)。方法的变更。J.助理分析。化学。,69370。

3.官方分析化学家协会。(1987)。方法的变更。J.助理分析。化学。,70393。

见《总裁判报告:AOAC国际期刊》,1998年第81卷第1期。

相关分析方案中描述了两种独立的方法:

方法1:总膳食纤维、可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维的测定

根据AOAC方法991.43“食品中的总、可溶性和不溶性膳食纤维”(1991年第一次行动)和AACC方法32-07.01“食品和食品中可溶性、不溶性和总膳食纤维的测定”(最终批准10-16-91)。

方法2:总膳食纤维的测定

基于AACC方法32-05.01和AOAC方法985.29。

 

 

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 Q1. Should the pH of the sample be adjusted even for samples in acidic media?

The pH of the assay solution after the sample is added should be the same as that of the assay buffer that is supplied with the kit.
Low sample volumes (e.g. 0.1 mL) are not likely to affect the pH of the assay solution and therefore may not require pH adjustment.
Samples above 0.1 mL are more likely to affect the pH of the assay solution and therefore the pH of these samples should be adjusted as described in the data booklet, prior to addition to the assay.

Q2. What is the stability of enzymes for Total Dietary Fibre method?

The enzymes are very stable.  In fact on storage at room temperature for 10 months, the decrease in  activity of thermostable alpha-amylase and amyloglucosidase is less than 10% and the decrease in activity in protease is about 40%.  When stored at 4˚C, the enzymes are stable for about 5 years, and at -20˚C they are stable for more than 10 years.

Q3. I was wondering if Megazyme has a kit to determine insoluble and soluble dietary fibre in barley?

Our kit is applicable to the measurement of Soluble, Insoluble and Total Dietary Fibre as per the AOAC/AACC methods.  The main value of our kit is that the Amyloglucosidase is free of Cellulase, i.e. the Beta-Glucan will not be degraded and underestimated.

Q4. Are the lower temperatures of 90˚C to 95˚C adequate for the hydrolysis if we extend the incubation time?

The main reason for the stated 100˚C is to ensure that the starch is gelatinised and hydrolysed by alpha-amylase.  We are sure that a temperature of 95˚C should be fine.

Q5. Is it necessary to do simultaneously nitrogen and ash analysis or can the test be applied to samples already analysed for these two characters?

It is necessary to measure the nitrogen in the residue.  Most protein is removed by protease action.  We think it best to follow the AOAC method as closely as possible.

Q6. There is an issue with the performance of the kit; the results are not as expected.

If you suspect that the Megazyme test kit is not performing as expected such that expected results are not obtained please do the following:

  1. Ensure that you have tested the standard sample that is supplied with the Megazyme test kit.
  2. Send the results of the kit standard, blank samples and the results obtained for your sample, in the relevant MegaCalc spreadsheet (if available) to Megazyme (cs@megazyme.com). Where available the relevant MegaCalc spreadsheet can be downloaded from where the product appears on the Megazyme website.
  3. State the kit lot number being used (this is found on the outside of the kit box).
  4. State which assay format was used (refer to the relevant page in the kit booklet if necessary).
  5. State exact details of any modifications to the standard procedure that is provided by Megazyme.
  6. State the sample type and describe the sample preparation steps if applicable.

Q7. Is there a preferred rate of heating and cooling for the recommended crucible (Corning® No. 32940-50C or equivalent) to avoid breakages?

The crucible has the potential to break if heated or cooled too rapidly . The graph below shows the manufacturer’s recommended heating and cooling profile for safe use with the crucible.爱尔兰MEGAZYME 膳食纤维总量检测试剂盒 K-TDFR-200A  Total Dietary Fibre Assay Kit 货号:K-TDFR-200A  Megazyme试剂盒
 

Q8. How should I prepare the required 78% ethanol solution?

A volume reduction occurs on mixing water with 95% ethanol (or IMS). 1 L of 78% ethanol is prepared by adding 821 mL 95% ethanol (or IMS) to 207 mL H2O.
If using a 1 L volumetric flask, this is best accomplished by placing 821 mL 95% ethanol (or IMS) into the volumetric flask. Dilute to volume with deionised water. Mix well. Check the level and if necessary add more deionised water to bring it back up to the 1 L mark. 

膳食纤维检测中文版说明

FDA 关于膳食纤维检测指标的新规则

Megazyme 溶解淀粉 操作视频

Megazyme 试剂盒样品前处理准备操作视频

Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)酶试剂盒Takara

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Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9089 Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) 20 Rxns ¥1,178 Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)
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Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation)
 
 
■ 制品内容
Yeast Processing Buffer 1.6 ml
Yeast Processing Enzyme Solution*1 160 μl
RNase-free DNase I*2 120 μl
10×DNase I Buffer*2 80 μl
 
* 1 Yeast Processing Enzyme Solution中含有酶。请勿过度搅拌以避免酶失活。
* 2 使用RNAiso Plus制备total RNA时根据需要使用。
 
■ 制品说明
Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) 是使用NucleoSpin RNA或RNAiso Plus从酵母中提取高纯度total RNA时搭配使用的前处理试剂。使用本制品进行的酵母菌体前处理操作包含通过离心清洗和回收酵母菌体,通过使用Yeast Processing Enzyme Solution(细胞壁分解酶)和Yeast Processing Buffer分解酵母细胞壁。由于本制品使用细胞壁分解酶进行前处理,所以不需要利用玻璃珠及液氮等繁琐的操作。此外,搭配NucleoSpin RNA使用时也不需要有机溶剂。
通过使用本制品进行前处理,大部分酵母(Saccharomyces, Candida, Pichia等)都可以制备得到用于RNA相关的各基因工程(RT-PCR等)实验所需的高纯度的total RNA。标准实验例中,使用处于对数生长期新鲜的2~5×107Saccharomyces cerevisiae酵母菌体得到了10~20 μg高纯度的酵母total RNA。本制品也可用于长时间培养的酵母菌和冷冻酵母菌的total RNA制备。相对于一般反应,使用处于对数生长期的新鲜酵母菌时,total RNA制备所需的反应时间更短。
RNA提取相关的试剂
请将本制品与NucleoSpin RNA(Code No. 740955.10/.50/.250)或RNAiso Plus(Code No. 9108/9109)搭配使用。
未确认与其他RNA提取试剂搭配使用的效果。
 
■ 保存
-20℃。
 
 
 

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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian酶试剂盒Takara

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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634485 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian 24 Rxns ¥30,451 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
Clontech 634486 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian 48 Rxns ¥47,045 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
Clontech 634487 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian 96 Rxns ¥63,820 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
Clontech 634488 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian 192 Rxns ¥114,044 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
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带分子标签的微量样本的链特异RNA-Seq分析
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian
· 高灵敏度:可以人、大鼠或小鼠来源的250 pg-10 ng的总RNA或10-1000个细胞起始
· 添加UMI:校正来自PCR错误、重复序列以及序列错误的读取
· 用途广泛:能分析质量较差的FFPE、LCM以及cfRNA来源的样本
· 操作简便:仅需要7.5小时即可完成文库构建
· 无缝衔接Illumina测序:直接制备多达192种index的Illumina® -ready文库
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian(Pico v3)设计用于从皮克级总RNA(250 pg-10 ng)中高效制备Illumina测序文库。本试剂盒采用的技术适用于高品质、部分降解及低品质RNA(如来自于FFPE或LCM样品)。升级产品与原有SMARTer 皮克级产品相比,提升了在所有Illumina测序平台的测序性能,并且还添加特别的分子条形码(UMI),从而可以消除PCR错误或duplication以及测序偏向。
 
本试剂盒采用一体化操作流程,保留了链来源信息,在反转录和PCR扩增过程中就可以添加indexes和接头。整个流程,包括文库构建及纯化仅需约7.5小时。
该试剂盒包含SMARTer RNA Unique Dual Index Kit – 24U (Code No. 634451)。另外也可以与SMARTer RNA Unique Dual Index Kits (Code No. 634452 & 634457,可单独购买)搭配使用,最多可构建多达192种indexes文库。
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
图1. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian技术流程
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
图2. 使用SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian制备文库的结构特征
 
接头序列包含:通过PCR 1反应添加的可以与Illumina流动池结合生成簇的P7、P5序列(P7以淡蓝色表示,P5以红色表示),用于区分单个lane上多个样本的Index序列(Index 1 [i7] 序列连接在P7端,Index 2 [i5]连接在P5端)。并且还包括识别测序引物区域的Read 2(紫色)和 Read 1(绿色)。通过Read 1起始得到的原始RNA的反义链序列,Read 2起始获得的是原始RNA的正义链序列。其中,通过Read 2起始时,前8个碱基是UMI(深紫色),UMI之后的3个碱基(XXX)是Pico v3 Adapter衍生的序列。
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
表 1. 不同样本起始量的分析结果。
 
以0.5、1、5和10 ng人肺FFPE组织提取的总RNA起始,采用SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 – Pico Input Mammalian制备RNA-Seq文库(均做两个重复),并使用NextSeq 500进行测序。
 
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian
SMARTer Stranded RNA-Seq Pico v3:
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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian酶试剂盒Takara

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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635005 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 12 Rxns ¥15,684 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 635006 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 48 Rxns ¥46,033 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 635007 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit – Pico Input Mammalian 96 Rxns ¥63,435 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 634411 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 12 Rxns ¥12,881 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 634412 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 48 Rxns ¥43,794 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 634413 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 96 Rxns ¥57,613 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
Clontech 634414 SMARTer® Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 192 Rxns ¥103,664 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input
Mammalian以皮克级总RNA构建Illumina链特性RNA-seq文库
· 皮克级样品起始—可以250 pg-10 ng人,小鼠或大鼠总RNA起始
· 用途广泛—可以不同品质RNA(包括FFPE/LCM样品及游离RNA)制备文库,获得高重复再现数据
· 性能提升-不增加PhiX也可获得较高的簇通过过滤百分比(FP%),识别更多转录本,重复更少
· 保留链来源信息—转录本链来源信息识别准确度高
· 快速,一体化流程—整体流程只需~6 h ,改良了buffer配方,缩短了文库纯化时间
· 无缝衔接Illumina测序—直接制备多达96种index的 Illumina®-ready文库
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian设计用于从皮克级总RNA(250 pg–10 ng)中高效制备Illumina测序文库。本试剂中采用的技术适用于高品质,部分降解及低品质RNA(如来自于FFPE或LCM样品)。本试剂是一体化操作流程,保留了链来源信息,并且不需要下游文库制备,在反转录和PCR扩增过程中就可以添加indexes和接头。升级产品与原有SMARTer 皮克级产品相比,提升了在所有Illumina测序平台的测序性能,并且文库纯化操作更加方便。
核糖体RNA在总RNA中占有很高的比重(~90%)。在制备文库前从总RNA中去除掉这些大量的RNA,有利于降低测序成本,提高统计数据的比对比率。但是在以微量样品起始时,如果一开始就从总RNA中去除rRNA,会造成纯化后的起始样品太少而不能制备高品质测序文库,本试剂采用专有的特异针对哺乳动物rRNA和部分线粒体RNA的探针去除核糖体cDNA(来源于核糖体RNA的cDNA片段)。采用本试剂制备的文库与前代试剂制备的文库接头配置不同,即使是使用基于双通道SBS技术的Illumina平台如NextSeq®, MiniSeq, 和 HiSeq® 3000/4000测序时,不需要添加大量PhiX也可以获得高比例的簇通过过滤百分比(%PF)。每个run可以获得更多的生物学相关测序reads,这又反过来减少了测序成本。采用Pico v2 Kit同样可以获得更多的特异转录本,更低的rRNA、mtRNA比对率和重复率。此外,Pico v2 Kit包含了一种新的PCR buffer,提高了文库纯化效率。
试剂盒提供12,48,96和192次反应规格。高通量版本试剂 (Code No. 634413,634414) 包含12种反向引物,8种正向引物,最多可以构建96种indexes文库。包括文库构建及纯化的整体流程只需~6 h。
 
不同样品起始量解决方案:
· 10-100 ng 总RNA, 推荐使用 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – Low Input Mammalian
· 100 ng-1 μg总RNA, 推荐使用SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
图1. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian技术流程
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
图2. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian提高了通过过滤百分比(FP%)。如图所示,分别采用Pico v1 或Pico v2制备文库并使用NextSeq 500 或 MiniSeq平台测序。图中,蓝色图框表示未过滤(原始)reads的簇密度分布,绿色图框表示通过过滤reads的簇密度分布。 图中显示了通过过滤的reads数(以百万计)和每个run的%PF。
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
图3. 新的SeqAmp CB PCR buffer利于磁珠-沉淀物形成。Pico v2中的PCR buffer经过重新设计可以更快、更紧密的形成磁珠-沉淀物。经过磁力分离后,在新的SeqAmp CB buffer(右)中的沉淀物比原来PCR buffer(左)中的沉淀物更紧密。紧密的沉淀物比松散的沉淀物更容易干燥,易于重悬。
 
SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
图4. SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian 提升了灵敏度和重复再现性。上图为以1 ng和10 ng人肺FFPE来源的总RNA起始,分别采用Pico v1和Pico v2构建文库,NextSeq 500测序数据。Panel A. 以1 ng和10 ng样品起始,分别采用Pico v1和v2构建文库的测序数据。Panel B. 不同样品起始量之间,转录本表达水平的比较分析。
 
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SMARTer Stranded RNA-Seq PICO:
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SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian
 
 
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SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian酶试剂盒Takara

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SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634873 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 12 Rxns ¥17,520 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
Clontech 634874 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 24 Rxns ¥29,766 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
Clontech 634876 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 96 Rxns ¥88,161 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
Clontech 634877 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 192 Rxns ¥140,875 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
Clontech 634878 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 480 Rxns ¥290,743 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
Clontech 634875 SMARTer® Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian 48 Rxns ¥54,845 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit - HI Mammalian
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SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit-
HI Mammalian—以高起始量总RNA构建Illumina测序平台链特异性RNA-Seq文库
· 保留链来源信息—转录本链来源识别准确率>99%
· 快速,简便流程-从开始到结束~ 5h
· 起始范围广—适用于人,小鼠或大鼠100 ng-1 μg总RNA
· 适用样品范围广-不同品质RNA,不同重复间均可获得可靠数据。
   RIN (RNA Integrity Number) 值3-10的总RNA均可获得高质量重复数据
· 兼容Illumina测序-构建96 index Illumina测序文库,并保留链来源信息
 
SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – HI Mammalian提供了从100 ng–1 μg哺乳动物总RNA构建Illumina index测序文库的快速解决方案。本试剂结合了RiboGone和SMART技术,可以无缝融合rRNA去除和链特异性文库构建过程,整个过程只需约5小时。由于rRNA约占总RNA的90%,在文库构建前高效去除这些高丰度转录本可以降低测序成本,提升数据比对率。核心SMART技术可以在RT和PCR扩增过程中添加index和测序接头,无需下游文库构建,并且可以保留链来源信息。
这些高通量试剂包含12条反向引物和8条正向引物可以生成多至96个独立index文库。整个流程-从rRNA去除到Illumina专用index RNA-Seq文库-只需约5小时。
 
不同样品起始量解决方案:
· 250 pg-10 ng总RNA,推荐使用 SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2- Pico Input Mammalian
· 10-100 ng总RNA,推荐使用 SMARTer Stranded Total RNA Sample Prep Kit – Low Input Mammalian
 
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