尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)–NEB酶试剂

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

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描述

 尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI),来源于枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1),蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDGUDG UGI 11 比例进行可逆蛋白结合,发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG DNA 的复合物。

浓度

 2,000 units/ml

特点

·尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG

·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。

·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

来源

 由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。

单位定义

 1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中,37 条件下,1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。

反应条件

 1X UDG 反应缓冲液,37℃ 温育。

热失活

 不能热失活。

注意事项

 1由于 95 热处理后, UDG 酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)来阻止产物 DNA 的降解。

2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效(NEB #M0280)。

3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI

4、在四种 NEBuffer 中都有活性(NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004

5UGI 的热稳定性极高,煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

参考文献

 Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.

Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.

Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.