核染色用色素 同仁化学研究所

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核染色用色素 同仁化学研究所Cellstain®– Hoechst 33342 solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

Cellstain®– Hoechst 33342 solution

核染色用色素 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

核染色用色素

  • 製品コード
    H342  –Cellstain®– Hoechst 33342 solution
  • CAS番号
    23491-52-3(Hoechst 33342:free base)
  • 化学名
    2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C27H31Cl3N6O=561.93
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 ml ¥5,200 346-07951
  • 核染色用色素 同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル 核染色用色素 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    核染色用色素 同仁化学研究所
  • パンフレット 核染色用色素 同仁化学研究所 細胞増殖測定細胞染色プロトコル
    核染色用色素 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, "Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry", J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.
2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang, "Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex", Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.
3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe and Y. Nishimune, "Characterization of Histone H2A.X Expression in Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein Transgene", Biol. Reprod., 2003, 69, 1325.
4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K. Hitomi, "Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime Mold", J. Biochem.(Tokyo), 2004, 136, 665.
5) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373
6) T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

よくある質問

Q

Hoechst 33258 ,Hoechst 33342 solutionの波長とこの2つの違いについて教えて下さい。

A

波長は以下の通りです。
Hoechst33342 Ex:350 nm Em:461 nm
Hoechst33258 Ex:352 nm Em:461 nm

基本的な使用方法は両方とも同じです。
弊社の製品は水溶液になっておりますので、
ご希望の濃度の希釈し、添加して下さい。

この二つの違いですが、基本的にはAdenine-Thymidine部に特異的に結合する薬品です。
生細胞の膜も通過し、生細胞のDNAとも結合します。
膜の透過率はHoechst 33342の方が若干上です。
Hoechst33258はdsDNA selectiveのようです。

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか?

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度がEBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
2重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
2重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを利用して、2重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342、33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

核染色用色素 同仁化学研究所

*AOはフローサイトメトリーなどでは488nm励起で観察されることもあります

Q

Hoechst33342の使用方法を教えてください。

A

一例として下記に示します。
・フローサイトメトリーによる培養株化細胞あるいは固形腫瘍の例
 

【試薬】

Hoechst33324 solution (1 mg/mL, 1.78 mmol/L)

【操作】

1)培養株化細胞あるいは固形腫瘍を0.25%トリプシンにて分離、浮遊細胞を用意する。

2)培養液で10 μmol/L Hoechst33342溶液とする。

3)細胞浮遊液105個あたり、10 μmol/L Hoechst33342溶液を1 mL加える。

4)37℃,60分インキュベートする。

5)この染色液をフローサイトメトリーで測定する。

励起波長:352 nm、蛍光波長:461 nm

核染色用色素 同仁化学研究所 核染色用色素 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、黄色液体である。
含量: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵,遮光
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核染色用色素 同仁化学研究所

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测量次数 50

PACKTEST 铁

类型: WAK-Fe

  • 排水管理
  • 工序和质量控制
  • 饮用水检验
  • 环境调查
  • 教材与自由研究

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

本产品可以通过工场排水和环境水为首, 用简单的操作测量各种测试水中的离子状态的铁(Fe2++Fe3+)。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 还原与邻菲咯啉比色法
测量刻度 0.2, 0.5, 1, 2, 5, 10 mg/L
测量时间 2 分
是否可在海水中使用
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 保存袋 1个, 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal 同仁化学研究所

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老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

老化細胞検出キット(マイクロプレート用)

  • 製品コード
    SG05  Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 tests ¥11,400 345-09501
100 tests ¥33,000 341-09503
キット内容
20 tests SPiDER-βGal
lysis Buffer
Assay Buffer
Stop Solution
×1
40 ml×1
1.5 ml×1
3 ml×1
100 tests SPiDER-βGal
lysis Buffer
Assay Buffer
Stop Solution
×5
100 ml×2
7.5 ml×1
15 ml×1

  • 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所 日本語
    老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所 English
    老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所
  • 細胞数補正キットとの併用プロトコル 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所 日本語
    老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所
  • Protocol for a Combined Analysis 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所 with Cell Count Normalization Kit [English]
    老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

技術情報

簡便に老化細胞を数値化

準備した細胞をキット同梱のBuffer で溶解し、蛍光基質(SPiDER-βGal)を添加するだけで、SA-β-gal の活性に応じた蛍光強度が得られます。
なおディッシュ(100 mm dish)等で細胞を準備した場合でも、細胞溶解後に96 ウェルプレートに移して頂くだけで評価頂けます。
老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

実験例:薬剤添加による評価

ROS発生剤であるDoxorubicinを添加し培養したWI-38 細胞を用い、本キットによるプレートアッセイを行いました。結果、Doxorubicinを添加した細胞では、 SA-β-gal の亢進が確認されました。

老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所
<検出条件>
Ex. 535 nm / Em. 580 nm

技術や使用製品に関する補足

本キット使用時の注意点:細胞数の補正をお勧めします。

マイクロプレートを用いた細胞の解析では、得られる結果がウェル中の細胞数によって変化する場合があります。その際には、細胞数のカウントやトータルタンパク質量の確認により、得られた測定値の補正(ノーマライゼーション)が必要となります。本キットでは、試薬を細胞培養液に添加するだけで、細胞内の核を染色し得られる蛍光強度から、細胞数を簡便に評価することができます。
細胞数ノーマライゼーションキットは、
こちらから

老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

 

 

参考文献

参考文献を表示する
文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1 細胞
(MRC-5)
プレートリーダー Y. Takenaka, I. Inoue, T. Nakano, M. Ikeda and Y. Kakinuma, "Prolonged disturbance of proteostasis induces cellular senescence via temporal mitochondrial dysfunction and subsequent mitochondrial accumulation in human fibroblasts", 2021, doi:10.1111/febs.16249.
2 細胞
(ヒト網膜色素上皮細胞)
プレートリーダー H. Yamamoto-Imoto, S. Minami, T. Shioda, Y. Yamashita, S. Sakai, S. Maeda, T. Yamamoto, S. Oki, M. Takashima, T. Yamamuro, K. Yanagawa, R. Edahiro, M. Iwatani, M. So, A. Tokumura, T. Abe, R. Imamura, N. Nonomura, Y. Okada, D. E. Ayer, H. Ogawa, E. Hara, Y. Takabatake, Y. Isaka, S. Nakamura and T. Yoshimori, "Age-associated decline of MondoA drives cellular senescence through impaired autophagy and mitochondrial homeostasis", Cell Rep.2022, doi:10.1016/j.celrep.2022.110444.

よくある質問

Q

1キットあたりの測定可能なサンプル数を教えてください。

A

測定可能なサンプル数の目安は以下の通りです。

  20 tests 100 tests
測定可能なwell数 96 wellプレート
20 well分
96 wellプレート
1 枚分
測定可能なサンプル数
(n=3 にて測定した場合)
6 サンプル 30 サンプル
Q

96 wellプレートで細胞を老化誘導をして測定することは可能ですか?

A

老化誘導はディッシュ等で行い、その後、細胞を96 wellプレートに移して測定することを推奨します。
同一プレート内に老化誘導しない細胞(コントロール)と老化誘導する細胞(サンプル)を配置して比較を行いますが、96 wellプレートで老化誘導を行うと、(老化誘導の日数に依りますが)コントロール細胞は増殖しすぎてコンフルエントの状態を招く可能性があります。
また、コンフルエントを回避するために予め細胞数を少なく播種した場合にも、老化誘導処理した老化細胞はプレートアッセイに必要な感度(細胞数)が得られない可能性があります。

Q

96 wellプレートに播種する細胞数の目安はどれくらいですか?

A

至適細胞数は細胞種によって異なります。
弊社では、1×104 cellsの WI-38細胞を各 wellに播種し、実験した実績がございます。

詳しい操作については、取扱説明書内の「実験例2」をご参照ください。
 

老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所 老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.化審法, 2.保存方法:冷蔵,遮光
PRTR法 第1種指定化学物質
危険・有害
シンボルマーク
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老化細胞検出キット(マイクロプレート用) Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal 同仁化学研究所

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死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所

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死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所Cellstain®– PI

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

Cellstain®– PI

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    P346  –Cellstain®– PI
  • CAS番号
    25535-16-4
  • 化学名
    3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide
  • 分子式・分子量
    C27H34I2N4=668.39
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥5,000 343-07461

【注意】
Cellstain®– PIは、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。
内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。(Free Dial:0120-489-548)

  • 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
2) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, "Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt's Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model", Cancer Res., 1989, 49, 3783.
3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, "Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms", Cytometry, 1991, 12, 330.
4) C. Souchier, M. Ffrench, M. Benchaib, R. Catallo and P. A. Bryon, "Methods for Cell Proloferation Analysis by Fluorescent Image Cytometry", Cytometry, 1995, 20, 203.
5) T. Irino, T. Kitoh, K. Koami, T. Kashima, K. Mukai, E. Takeuchi, T. Hongo, T. Nakahata, S. M. Schuster and M. Osaka, "Establishment of Real-Time Polymerase Chain Reaction Method for Quantitative Analysis of Asparagine Synthetase Expression", Mol. Diagn., 2004, 6, 217.

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか?

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
2重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
2重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、2重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342、33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所

*AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

PIの使用方法を教えてください。

A

下記に例を示します。細胞の種類、観察条件により細胞の固定や試薬濃度を検討してください。

【使用例①】

Vollenweiderらはリンフォカイン活性化キラー(LAK)細胞の増殖アッセイにおいて、PI染色を行い、蛍光プレートリーダーを用いて測定している。
その時の濃度はストック溶液で 0.5 mg/mL PBS(-) 。使用濃度は 5 μg/mL クエン酸ナトリウム溶液を用い、1well当たり100 μL使用して蛍光染色している。
・I.Vollenweider, P.Groscurth, J.Immunol.Methods, 149, 133(1992).

【使用例②】

(1) 固形腫瘍あるいはcluster を含むサンプルについては、0.02% tripsin EDTAにて処理。

     37℃にて30分間インキュベート後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(2) -20℃の50% メタノールにて固定後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(3) -20℃の30% メタノールにて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(4) 0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(5) RNaseの0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)溶液(1mg/mL)を細胞106個あたり

     0.2 mL加え、37℃にて30分間インキュベートする。

(6) 0.2 mol/L phosphate にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(7) PI溶液(50 μg/mL)を10mL加え、4℃にて2時間、遮光の上染色を行う。

・”フローサイトメトリー入門”より、医学書院発行

Q

EBやPIを使用した際の廃棄物があります。処理はどのようにすればよいですか?

A

*施設によりガイドラインが定められている場合があります。ガイドラインがある場合にはそれに従って下さい。

廃液は排水処理設備がある場合には、排水として流してください。処理設備がない場合、排水は貯めておいて処理業者に依頼してください。

染色したゲルなどは乾燥して、焼却処分してください。

蛍光性物質を分解する場合には下記のような方法もあります。
・UV照射や日光にさらし分解する。
・次亜塩素酸ナトリウムにより酸化分解後、中和処理する。

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、赤褐色粉末又は固体で水及び希塩酸に溶ける。
水溶状: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵,遮光
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PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

本产品可以通过自来水为首, 用简单的操作测量各种测试水中的离子状态的铁(Fe2++Fe3+)。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 还原与红菲咯啉比色法
测量刻度 0.05, 0.1, 0.3, 0.5, 1, 2 mg/L
测量时间 2 分
是否可在海水中使用 ×
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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测量次数 50

PACKTEST 总硬度

类型: WAK-TH

  • 工序和质量控制
  • 设施维护管理
  • 饮用水检验
  • 环境调查
  • 教材与自由研究
  • 养鱼管理(水槽)
  • 农业(施肥管理)

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

该产品可以测量钙硬度和镁硬度之和的总硬度。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 PC比色法
测量刻度 0, 10, 20, 50, 100, 200 mg/L
测量时间 30 秒
是否可在海水中使用 ×
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所Glucose Uptake Assay Kit-Blue

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Glucose Uptake Assay Kit-Blue

グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
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  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

グルコース取り込み検出キットBlue

  • グルコース取り込み能力を高感度かつ簡便に測定できる
  • 蛍光顕微鏡やフローサイトメーターで測定が可能
  • 取り込まれた色素の漏れ出しを抑制し、再現性の高いデータを取得できる
  • 製品コード
    UP01  Glucose Uptake Assay Kit-Blue
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥40,000 342-09871

使用回数の目安
1 set あたり、35 mm dish 12 枚、96-well microplate 1 枚

キット内容
1 set Glucose Uptake Probe-Blue
WI Solution (50×)
×1
5 ml ×1

  • グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所 日本語
    グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所 English
    グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所

技術情報

既存法よりココが良い!4つの特徴

Glucose Uptake Probe-Blueは青色蛍光を発するため、蛍光顕微鏡やフローサイトメーターの多重染色の際に緑色蛍光以外の試薬としてご利用頂けます。また、高輝度の色素と細胞からの漏出を抑えるバッファーを採用したことで、既存法(2-NBDG)よりも短時間での測定が可能となりました。

よくある質問

Q

Glucose Uptake Probe-Blueはどのグルコーストランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

複数のトランスポーターを介して細胞内へ取り込まれていると推測されますが、各グルコーストランスポーターに対する特異性や親和性に関する詳細なデータはございません。

Q

Glucose Uptake Probe-Blueは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

蛍光色素部位は安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。グルコース部位は、構造上ヘキソキナーゼによるリン酸化を受けることが考えられますが、それ以降の代謝は行われないと考えられます。

Q

Glucose Uptake Probe-Blueを生細胞へ取り込ませた後、固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

Probe solutionは保存可能でしょうか?

A

Probe solutionは保存できません。Probe stock solutionは一か月間冷凍保存が可能です。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったプローブが残存している可能性があります。再度WI solutionによる洗浄操作を一度行ってください。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

初期検討としてプローブ濃度(x250~x1,000)や染色時間(15分~1時間程度)をご検討下さい。

Q

WI solutionを用いて洗浄した後、プローブはどのくらいの時間細胞内に保持されますか?

A

室温で約1時間程度は細胞内に保持されます。ただし、細胞の種類によって異なることが考えられます。

Q

グルコースの定量はできますか?

A

本製品を用いてグルコースを定量することはできません。

培地中のグルコース消費量や細胞内のグルコース量を定量したい場合は、弊社 グルコース代謝測定キット Glucose Assay Kit-WST (G264) をご使用下さい。

Q

取り込まれた色素の定量はできますか?

A

取り込まれた色素の定量を行う事はできません。本色素は、グルコース取り込み能力の増減を確認するための色素となります。

グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所 グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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グルコース取り込み検出キットBlue Glucose Uptake Assay Kit-Blue 同仁化学研究所

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    グルコース取り込み検出キットRed

    Glucose Uptake Assay Kit-Red

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    Glucose Assay Kit-WST

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    MT-1 MitoMP Detection Kit

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    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所Cellstain®– PI solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

Cellstain®– PI solution

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    P378  –Cellstain®– PI solution
  • CAS番号
    25535-16-4(PI)
  • 化学名
    3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide, solution
  • 分子式・分子量
    C27H34I2N4=668.39
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 ml ¥6,000 341-07881
  • 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
2) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, "Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt's Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model", Cancer Res., 1989, 49, 3783.
3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, "Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms", Cytometry, 1991, 12, 330.
4) C. Souchier, M. Ffrench, M. Benchaib, R. Catallo and P. A. Bryon, "Methods for Cell Proloferation Analysis by Fluorescent Image Cytometry", Cytometry, 1995, 20, 203.
5)T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか?

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
2重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
2重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、2重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342、33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

*AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

固定化後に染色すると、核が染まらないのですが何か対策はありますか?

A

固定化および膜透過処理の条件によっては核が染まらないことがあります。
その際は、処理条件をご検討頂く必要があります。

なお、PFA(パラホルムアルデヒド)固定化処理を長時間することで、核が染まらない事例がございます。
下記、弊社での事例を参考に固定化および膜透過処理の条件をご検討ください。

○PIで核を染色できた処理条件
使用細胞 : HeLa細胞
固定化処理:4% PFA/PBSにて5分間インキュベート
膜透過処理:1% Triton X-100/PBSにて20分間インキュベート

上記処理後に、PI solution 30 μg/mLにて染色して観察

○PI染色後、核が染まらない結果となった条件
使用細胞 : HeLa細胞
固定化処理:2% PFA/PBSにて60分間インキュベート
膜透過処理:1% NP-40/PBSにて60分間インキュベート

上記処理後に、PI solution 30 μg/mLにて染色して観察

Q

PIの使用方法を教えてください。

A

下記に例を示します。細胞の種類、観察条件により細胞の固定や試薬濃度を検討してください。

【使用例①】

Vollenweiderらはリンフォカイン活性化キラー(LAK)細胞の増殖アッセイにおいて、PI染色を行い、蛍光プレートリーダーを用いて測定している。
その時の濃度はストック溶液で 0.5 mg/mL PBS(-) 。使用濃度は 5 μg/mL クエン酸ナトリウム溶液を用い、1well当たり100μL使用して蛍光染色している。
・I.Vollenweider, P.Groscurth, J.Immunol.Methods, 149, 133(1992).

【使用例②】

(1) 固形腫瘍あるいはcluster を含むサンプルについては、0.02% tripsin EDTAにて処理。

     37℃にて30分間インキュベート後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(2) -20℃の50% メタノールにて固定後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(3) -20℃の30% メタノールにて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(4) 0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(5) RNaseの0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)溶液(1 mg/mL)を細胞106個あたり

     0.2 mL加え、37℃にて30分間インキュベートする。

(6) 0.2 mol/L phosphate にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(7) PI溶液(50 μg/mL)を10mL加え、4℃にて2時間、遮光の上染色を行う。

・”フローサイトメトリー入門”より、医学書院発行

Q

EBやPIを使用した際の廃棄物があります。処理はどのようにすればよいですか?

A

*施設によりガイドラインが定められている場合があります。ガイドラインがある場合にはそれに従って下さい。

廃液は排水処理設備がある場合には、排水として流してください。下記方法により分解して、廃水処理すればより安全です。

・UV照射や日光にさらし分解する。
・次亜塩素酸ナトリウム等により酸化分解する。

処理設備がない場合、分解し、廃水を貯めておいて処理業者に依頼してください。

染色したゲルなどは乾燥して、焼却処分してください。

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、橙色~赤色液体の凍結品である。
含量: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍,遮光
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死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution 同仁化学研究所

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PACKTEST 二价铁     WAK-Fe2+

测量次数 50

PACKTEST 二价铁

类型: WAK-Fe2+

  • 排水管理
  • 工序和质量控制
  • 饮用水检验
  • 环境调查
  • 教材与自由研究

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

本产品可以通过以工厂排水和环境水为首, 用简单的操作测量各种测试水中的2价离子状态的铁(Fe2+)。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 邻菲咯啉比色法
测量刻度 0.2, 0.5, 1, 2, 5, 10 mg/L
测量时间 30 秒
是否可在海水中使用
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

DOCUMENTS 文件

PACKTEST 二价铁 使用说明

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グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

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グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所Glucose Uptake Assay Kit-Green

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Glucose Uptake Assay Kit-Green

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化
  • 細胞内代謝
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

グルコース取り込み検出キットGreen

  • グルコース取り込み能力を高感度かつ簡便に測定できる
  • プレートリーダーを用いて測定が可能
  • 取り込まれた色素の漏れ出しを抑制し、再現性の高いデータを取得できる
  • 製品コード
    UP02  Glucose Uptake Assay Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥38,000 347-09821

使用回数の目安
1 set あたり、35 mm dish 12 枚、96-well plate 1 枚

キット内容
1 set Glucose Uptake Probe-Green
WI Solution (50×)
×1
5 ml ×1

  • グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所 日本語
    グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所 English
    グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

技術情報

既存法よりココが良い!4つの特徴

高輝度の色素を採用したことにより、既存法(2-NBDG)よりも高感度かつ短時間での測定が可能となりました。

参考文献

参考文献を表示する

 

No. Sample Publication
1) 細胞
(HeLa)
W. Islam, Y. Matsumoto, J. Fang, A. Harada, T. Niidome, K. Ono, H. Tsutsuki, T. Sawa, T. Imamura, K. Sakurai, N. Fukumitsu, H. Yamamoto, H. Maeda., "Polymer-conjugated glucosamine complexed with boric acid shows tumor-selective accumulation and simultaneous inhibition of glycolysis ", Biomaterials., 2021, 269, (-), 120631.
2)
(B. licheniformis; P. stutzeri)
M. Jiang, Q. Li, S. Hu, P. He, Y. Chen, D. Cai, Y. Wu, S. Chen, "Enhanced aerobic denitrification performance with Bacillus licheniformis via secreting lipopeptide biosurfactant lichenysin", 2022, doi:10.1016/j.cej.2022.134686.

 

よくある質問

Q

Glucose Uptake Probe-Greenはどのグルコーストランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

複数のトランスポーターを介して細胞内へ取り込まれていると推測されますが、各グルコーストランスポーターに対する特異性や親和性に関する詳細なデータはございません。

Q

使用実績のある細胞種を教えてください。

A

下記の細胞においてプローブの使用実績があります。

細胞 Probe stock solutinの希釈倍率 染色時間
ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞 A549 x 500 15分
ヒト肝癌由来細胞 HepG2 x 500 15分
前駆脂肪細胞 preadipocyte(3T3-L1) x 500 15分
脂肪細胞 adipocyte(3T3-L1) x 500 15分
悪性黒色腫 MO5 x 500 15分
マウス筋芽細胞 C2C12 x 500 5分
アストロサイト―マ U-251 MG x 500 15分
ヒト子宮頸癌由来細胞 HeLa x 500 15分
ルイス肺がん由来細胞 3LL x 50000 15分
T細胞 CD4+ T cell x 50, x500 15分
マウスマクロファージ様株化細胞 J774.1 x 500 15分
線虫 N2 x 500 90分
Q

Glucose Uptake Probe-Greenは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

蛍光色素部位は安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。グルコース部位は、構造上ヘキソキナーゼによるリン酸化を受けることが考えられますが、それ以降の代謝は行われないと考えられます。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenを生細胞へ取り込ませた後、固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

プレートリーダーで測定する場合、どのプレートを使用すればよいでしょうか?

A

蛍光検出のため細胞培養用のブラックマイクロプレートをご使用ください。

Q

Probe working solutionは保存可能でしょうか?

A

Probe working solutionは保存できません。Probe stock solutionは冷凍保存が一か月間可能です。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

初期検討としてプローブ濃度(x250~x1,000)や染色時間(15分~1時間程度)をご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったプローブが残存している可能性があります。WI solutionによる洗浄操作をもう一度行ってください。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenに細胞毒性はありますか?

A

弊社製品のCell Counting Kit-8 (CK04)を用いてA549細胞におけるプローブの細胞毒性を調査した結果、細胞毒性は確認されませんでした。

Q

WI solutionを用いて洗浄した後、プローブはどのくらいの時間細胞内に保持されますか?

A

室温で約1時間程度は細胞内に保持されます。ただし、細胞の種類によって異なることが考えられます。

Q

グルコースの定量はできますか?

A

本製品を用いてグルコースを定量することはできません。

培地中のグルコース消費量や細胞内のグルコース量を定量したい場合は、弊社 グルコース代謝測定キット Glucose Assay Kit-WST (G264) をご使用下さい。

Q

取り込まれた色素の定量はできますか?

A

取り込まれた色素の定量を行う事はできません。本色素は、グルコース取り込み能力の増減を確認するための色素となります。

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所 グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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    MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット

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日本共立水质测试包PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸) WAK-VC-2

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PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2 联系我们

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PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2
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PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2

PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2

PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2

PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2

PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)     WAK-VC-2

测量次数 50

PACKTEST 维生素C(L-抗坏血酸)

类型: WAK-VC-2

  • 教材与自由研究

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

该产品可通过简单的操作测量, 如含果汁的饮料和工艺水等, 不含其他还原性物质的检测水中的维生素C (抗坏血酸)。配套的标准色纸上分别印有维生素C, 抗坏血酸。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 Folin-Denis比色法
测量刻度 【维生素C】0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 4以上 mg/100mL

【L-抗坏血酸】1, 2, 5, 10, 20, 40以上 mg/L

测量时间 3 分
是否可在海水中使用
内容物 软管 40个 (5个装的层压袋 8包), K-1试剂 (液体) 1瓶, 专用杯 1个, 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I 同仁化学研究所Agarose-I

03 分子生物学関連試薬

Agarose-I

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A003  Agarose-I
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥8,600 346-00072
100 g ¥24,200 344-00073
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I 同仁化学研究所 核酸を検出したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~灰黄白色粉末である。
水溶状: 試験適合
強熱残分(硫酸塩): 1.0% 以下
硫黄含量: 0.30% 以下
ゲル強度: 800 g/cm2 以上
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I 同仁化学研究所

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  • 产品规格
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PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3 联系我们

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PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3
PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3
PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3

PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3

PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3

PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3

PACKTEST 三价铁     WAK-Fe3

测量次数 50

PACKTEST 三价铁

类型: WAK-Fe3

  • 排水管理
  • 工序和质量控制
  • 饮用水检验
  • 环境调查
  • 教材与自由研究

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

本产品可以通过简单的操作测定各种检水中的3价离子状态的铁(Fe3+)。

测量次数 50

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 磺基水杨酸比色法
测量刻度 2, 5, 10, 20, 50, 100 mg/L
测量时间 30 秒
是否可在海水中使用 ×
内容物 软管 50个 (5个装的层压袋 10包), 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所

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グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所Glucose Uptake Assay Kit-Red

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Glucose Uptake Assay Kit-Red

グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化
  • 細胞内代謝
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

グルコース取り込み検出キットRed

  • グルコース取り込み能力を高感度かつ簡便に測定できる
  • プレートリーダーやフローサイトメーターでも測定が可能
  • 取り込まれた色素の漏れ出しを抑制し、再現性の高いデータを取得できる
  • 製品コード
    UP03  Glucose Uptake Assay Kit-Red
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥40,000 349-09881

使用回数の目安
1 set あたり、35 mm dish 12 枚、96-well microplate 1 枚

キット内容
1 set Glucose Uptake Probe-Red
WI Solution (50×)
×1
5 ml ×1

  • グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所 日本語
    グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所 English
    グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所

技術情報

既存法よりココが良い!4つの特徴

Glucose Uptake Probe-Redは赤色蛍光を発するため、蛍光顕微鏡やフローサイトメーターの多重染色の際に緑色蛍光以外の試薬としてご利用頂けます。
また、高輝度の色素と細胞からの漏出を抑えるバッファーを採用したことで、既存法(2-NBDG)よりも短時間での測定が可能となりました。

よくある質問

Q

Glucose Uptake Probe-Redはどのグルコーストランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

複数のトランスポーターを介して細胞内へ取り込まれていると推測されますが、各グルコーストランスポーターに対する特異性や親和性に関する詳細なデータはございません。

Q

Glucose Uptake Probe-Redは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

蛍光色素部位は安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。グルコース部位は、構造上ヘキソキナーゼによるリン酸化を受けることが考えられますが、それ以降の代謝は行われないと考えられます。

Q

Glucose Uptake Probe-Redを生細胞へ取り込ませた後、固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

プレートリーダーで測定する場合、どのプレートを使用すればよいでしょうか?

A

蛍光検出のため細胞培養用のブラックマイクロプレートをご使用ください。

Q

Probe working solutionは保存可能でしょうか?

A

Probe solutionは保存できません。Probe stock solutionは一か月間冷凍保存が可能です。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

初期検討としてプローブ濃度(x250~x1,000)や染色時間(15分~1時間程度)をご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったプローブが残存している可能性があります。再度WI solutionによる洗浄操作を行ってください。

Q

WI solutionを用いて洗浄した後、プローブはどのくらいの時間細胞内に保持されますか?

A

室温で約1時間程度は細胞内に保持されます。ただし、細胞の種類によって異なることが考えられます。

Q

グルコースの定量はできますか?

A

本製品を用いてグルコースを定量することはできません。

培地中のグルコース消費量や細胞内のグルコース量を定量したい場合は、弊社 グルコース代謝測定キット Glucose Assay Kit-WST (G264) をご使用下さい。

Q

取り込まれた色素の定量はできますか?

A

取り込まれた色素の定量を行う事はできません。本色素は、グルコース取り込み能力の増減を確認するための色素となります。

グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所 グルコース取り込み検出キットRed Glucose Uptake Assay Kit-Red 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 同仁化学研究所Agarose 900

03 分子生物学関連試薬

Agarose 900

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A426  Agarose 900
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥8,600 341-07842
100 g ¥24,200 343-07841
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 同仁化学研究所 電気泳動で核酸を分離したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~灰黄白色粉末である。
水溶状: 試験適合
強熱残分(硫酸塩): 1.0% 以下
乾燥減量(80℃): 22.0% 以下
硫黄含量: 0.30% 以下
ゲル強度: 800 g/cm2 以上
凝固温度: 35~40℃
融解温度: 87~91℃
DNase活性: 不検出
RNase活性: 不検出
バックグラウンド試験: 試験適合
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 同仁化学研究所

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アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

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アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所Amino Acid Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Amino Acid Uptake Assay Kit

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化
  • 細胞内代謝
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

アミノ酸取り込み検出キット

  • アミノ酸取り込み能力を簡便に検出できる
  • 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターを用いて検出が可能
  • 製品コード
    UP04  Amino Acid Uptake Assay Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 tests ¥16,000 346-09891
100 tests ¥45,000 342-09893

<使用回数の目安> 100 testsあたり、35 mm dish 10枚、96-well plate 1枚

キット内容
20 tests BPA Solution
BPA Dilution Buffer
Probe Solution 
35 ×l×1
35 ×l×1
15 ×l×1
100 tests BPA Solution
BPA Dilution Buffer
Probe Solution 
175 ×l×1
175 ×l×1
75 ×l×1

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 日本語
    アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 English
    アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

技術情報

この製品でできること

アミノ酸の取り込みを阻害する薬剤を抗がん剤としてスクリーニングしたり、正常細胞とがん細胞の取り込み能力を比較することができます。

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

よくある質問

Q

BPAはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

BPAは、LAT1, LAT2, ATB0,+を介して取り込まれることが報告されています(Wongthai P et al., “Boronophenylalanine, a boron delivery agent for boron neutron capture therapy, is transported by ATB0,+, LAT1 and LAT2”, Cancer Sci., 2015, Mar;106(3):279-86)。また、小社では、LAT1の阻害剤BCHや、LAT1の基質であるleucineなどの競合阻害実験でBPAの取り込みが阻害されることを確認しています。

Q

使用実績のある細胞種を教えて下さい。

A

付着細胞(HeLa, A549, HepG2, MCF-7, C2C12, MEF, U251), 浮遊細胞(MOLT4)

Q

BPAは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

BPAは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

BPAを生細胞へ取り込ませた後、細胞を固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

BPAは細胞内での局在性はありますか?

A

取り込まれたBPAは細胞内に均一に存在します。

Q

BPA uptake solution, Working solutionは保存可能でしょうか?

A

BPA uptake solution, Working solutionは保存できません。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

2点原因が考えられるため、以下のようにすると改善される可能性があります。
①BPA uptake solutionの取り込み量が少ない可能性があります。その場合は、BPA Solutionの希釈倍率を下げてご検討ください。(5~50倍希釈)
②Working solutionが劣化している可能性があります。再度、Working solutionを調製してください。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったBPAがウェル内に残存している可能性があります。
HBSSによる洗浄を繰り返してください。

Q

BPAの定量はできますか?

A

取り込まれたBPAの定量を行う事はできません。本キットは、アミノ酸取り込み能力の増減を確認するためのキットとなります。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか?

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名 製品名 Cat No.
ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626
AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096
Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類 第3石油類 危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法:冷凍(-20℃)
危険・有害
シンボルマーク
アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
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アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

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PACKTEST 甲醛     WAK-FOR 联系我们

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PACKTEST 甲醛     WAK-FOR
PACKTEST 甲醛     WAK-FOR
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PACKTEST 甲醛     WAK-FOR

PACKTEST 甲醛     WAK-FOR

PACKTEST 甲醛     WAK-FOR

测量次数 40

PACKTEST 甲醛

类型: WAK-FOR

  • 工序和质量控制
  • 饮用水检验
  • 农业(施肥管理)

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

这款产品可以测量水中的甲醛。
在测定空气中的甲醛的情况下, 在室内放置装有水的杯子, 通过从空气中吸收水中的甲醛, 也可以测定空气中的大概浓度。

在将测试水吸入管子之前,必须先使用盒子里的K-1试剂进行操作。有关更多信息,请参见使用说明。

测量次数 40

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 MBTH比色法
测量刻度 0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5, 1, 2 mg/L
测量时间 4 分
是否可在海水中使用
内容物 软管 40个 (5个装的层压袋 8包), K-1试剂 (小袋装) 40个装1包, 专用杯 1个, 切刀 1个, 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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PACKTEST 葡萄糖

类型: WAK-GLU

  • 工序和质量控制

PACKTEST是最简单的水质测量仪器。

这个产品使用酶法, 可以通过简单操作来测定酿造领域等各种检查水中葡萄糖。

测量次数 40

SPECIFICATION 产品规格

测量原理 酶法4-氨基安替比林比色法
测量刻度 0, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2 mg/100mL

0, 1, 2, 5, 10, 20 mg/L

测量时间 10 分
是否可在海水中使用 不影响显色,但会产生混浊。
内容物 软管 40个 (5个装的层压袋 8包), 保存袋 1个, 标准色紙 (盒装) 1个, 使用说明 1张
包装外形 165L × 110W × 65H mm
包装重量 大约 140 g

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 同仁化学研究所Agarose 1500

03 分子生物学関連試薬

Agarose 1500

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A427  Agarose 1500
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥8,600 344-07832
100 g ¥24,200 346-07831
試験成績書

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    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~灰黄白色粉末である。
水溶状: 試験適合
強熱残分(硫酸塩): 1.0% 以下
乾燥減量(80℃): 20.0% 以下
硫黄含量: 0.30% 以下
ゲル強度: 1400 g/cm2 以上
凝固温度: 35~40℃
融解温度: 91~95℃
DNase活性: 不検出
RNase活性: 不検出
バックグラウンド試験: 試験適合
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 同仁化学研究所

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シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所Cystine Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cystine Uptake Assay Kit

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞内代謝

シスチン取り込み検出キット

  • シスチン取り込み能力を簡便に検出できる
  • プレートリーダーを用いて検出が可能
  • 製品コード
    UP05  Cystine Uptake Assay Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 tests ¥18,000 344-09951
100 tests ¥50,000 340-09953

<使用回数の目安> 100 testsあたり、96-well plate 1枚

キット内容
20 tests Cystine Analog Solution
Fluorescent Probe
Reducing Agent
Assay Buffer
45 μl×1
×1
×1
5 ml×1
100 tests Cystine Analog Solution
Fluorescent Probe
Reducing Agent
Assay Buffer
225 μl×1
×1
×2
25 ml×1

  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 日本語
    シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 English
    シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

技術情報

この製品でできること

本キットはCystine Analog (CA)としてSelenocystineを用いており、細胞のシスチン取り込み能力を短時間の操作で簡便にプレートリーダーにて測定することが可能です。

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する
文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1) 細胞
(A172; LN229)
プレートリーダー K. Hayashima, H. Katoh, "Expression of gamma-glutamyltransferase 1 in glioblastoma cells confers resistance to cystine deprivation-induced ferroptosis", J. Biol. Chem.2022, doi:10.1016/j.jbc.2022.101703.

よくある質問

Q

Cystine Analogはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

Cystine Analogはシスチン・グルタミン酸トランスポーター(xCT)を介して細胞内へ取り込まれます。

Q

細胞種の実績を教えて下さい。

A

下記の細胞において使用実績があります。

由来 細胞名
ヒト神経膠芽腫由来細胞 A172
ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞 A549
ヒト悪性黒色種 A375
ヒト結腸腺癌 HCT116
ヒト子宮頸癌由来細胞 HepG2
白血病細胞 HL60
ヒトサルコーマ細胞 HT1080
マウス胚性線維芽細胞 MEF
ヒト肺小細胞​癌 SBC-5
アストロサイト―マ U-251 MG

 

 

 

Q

Cystine Analogは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

Cystine Analogは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

Cystine uptake solutionは保存可能でしょうか?

A

Cystine uptake solutionは保存できません。添加前に必要量のCystine uptake solutionを調製して下さい。

Q

シスチンを定量することはできますか?

A

本製品を用いてシスチンを定量することはできません。

Q

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできますか?

A

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできません。本製品は、シスチン取り込み能力を数値化するためのキットです。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

CA Uptake solutionによる細胞の処理時間を延長して(30分~1時間程度) ご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったCystine Analogがウェル内に残存している可能性があります。PBSによる洗浄を繰り返してください。

Q

シスチン不含無血清培地以外にCA Uptake solutionの調製に使用できるバッファーはありますか?

A

HeLa細胞においてHBSSや0.1%Glucoseを含むPBS(+)を使用して測定した実績がございます。

Q

蛍光強度を細胞数で補正する方法を教えてください。

A

核酸染色剤による補正が可能です。また、小社製品"Cell Count Normalization Kit (製品コード:C544)"を用いて細胞数をカウントし、補正することも可能です。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか?

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名 製品名 Cat No.
ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626
AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096
Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所 シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1. 医薬用外毒物, 2. 保存方法:冷凍(-20℃)
危険・有害
シンボルマーク
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