脂質過酸化検出試薬 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

02 酸化ストレス関連試薬

Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

酸化ストレス関連試薬
酸化ストレス関連試薬
蛍光色素
顕微鏡
FCM

脂質過酸化検出試薬

脂質過酸化を高感度に検出できる
顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターで検出可能

製品コード

L267　 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
200 tests	￥29,800	344-10061

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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書英語

技術情報

Lipid Peroxidation Probeの性質

　Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11- は脂質過酸化を検出することができる蛍光色素です。本蛍光色素は過酸化脂質とは応答しませんが、脂質が過酸化される際に発生する脂質ラジカルなどと反応するため、結果的に過酸化脂質の発生を検出することができます。未反応の本色素は赤色の蛍光を発しますが、脂質周辺のラジカルと応答後は、その蛍光特性を赤色から緑色の蛍光に変化させます。このように、赤色と緑色の蛍光強度比で検出するため、高感度に脂質過酸化を検出することが可能となります。

脂質過酸化検出試薬 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-　同仁化学研究所
Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-の励起蛍光スペクトル

脂質過酸化検出試薬 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-　同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	装置	引用（リンク）
1)	細胞（HTR-8/Svneo）	蛍光顕微鏡	H. Yang, X. Zhang, Y. Ding, H. Xiong, S. Xiang, Y. Wang, H. Li, Z. Liu, J. He, Y. Tao, H. Yang, H. Qi, "Elabela: Negative Regulation of Ferroptosis in Trophoblasts via the Ferritinophagy Pathway Implicated in the Pathogenesis of Preeclampsia", cells, 2023, doi:10.3390/cells12010099.

よくある質問

Q 測定可能なサンプル数を教えてください。: A

測定可能なサンプル数は以下をご参考ください。
・96-well plate: 2枚
・ibidi 8-well plate: 12枚
・35 mm dish: 10枚
・6-well plate: 10ウェル

Q ポジティブコントロールになる実験例はありますか？: A

取扱説明書にtert-butyl hydroperoxide (t-BHP)処理もしくはcumene hydroperoxide処理をしたHepG2細胞による検出例を掲載しております。実験例1もしくは実験例2の項目の操作1-5をご参考ください。

Q working solutionは培養培地以外でも調製できますか？: A

培養培地以外での調製は、お勧めしません。BDP 581/591 C11は脂溶性が高いため、無血清培地やバッファーで調製すると試薬が容器に沈着する可能性があります。調製には血清入り培地をご使用ください。

Q フローサイトメーターで使用する際、細胞を剥がす操作はどの段階で行えば良いですか？: A

取扱説明書操作6の後(薬剤処理しHBSSで洗浄した後)に、細胞を剥がす操作(トリプシン処理)を行ってください。

Q 染色後の細胞洗浄に使用するBufferはHBSS以外でも使用できますか？: A

PBS、 Hanks’ HEPES buffer、培地でも洗浄できます。

取扱条件

規格
性状：	紫色～赤紫色固体
純度(HPLC)：	90.0% 以上

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pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

04 細胞内蛍光プローブ

AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

細胞内蛍光プローブ
細胞内蛍光プローブ
蛍光色素
顕微鏡
標識キット

pHセンサーラベル化キット

pH感受性蛍光色素をラベル化できる
ラベル化に必要なものが同梱されているオールインワンのキット
詳細な標識マニュアル

製品コード

A558　 AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
3 samples	￥45,000	340-10041

サンプル量	50-200 µg
標識部位	-NH₂
検出方法	顕微鏡・FCM
蛍光特性	[Ex:645, Em:666]
・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

キット内容

3 samples	・NH₂-Reactive AcidSensor ・WS Buffer ・Reaction Buffer ・Filtration Tube	3 tubes 4 ml　×1 500 μl×1 3 tubes

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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書英語

技術情報

初めてでも迷わない実験操作

本キットは、未反応の色素を除くために必要なフィルトレーションチューブを同梱しており、標識から精製操作までを行うことができます。^※
また、取扱説明書に沿って実験していただくことで、初めての方でも容易に AcidSensor を標識することが可能です。

※ 抗体やタンパク質は含まれません。
※ DMSO と培地は、別途ご準備ください。

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay　同仁化学研究所

よくある質問

Q サンプル溶液中の共存物は標識反応に影響しますか。: A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じて標識に用いるサンプルの精製を行い、ご使用ください。
標識対象以外の分子量 10,000 以上のアミノ基を有する共存物は標識効率を低下させ、また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。
また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
反応に使用する前に別途除去操作を行ってください。

Q 標識体を回収するWS buffer に細胞毒性はありますか？: A

WS buffer 中には、細胞毒性をほとんど示さない量の安定化剤(界面活性剤)を含んでいます。もし細胞への影響が気になる場合は、別途任意のバッファーを用いて標識体を回収してください。

Q 血清含有培地で標識体の取込みや観察ができますか？: A

血清成分がAcidSensor の性能に影響を与えることはありませんが、血清タンパク質によりエンドサイトーシス経路の取り込みが阻害される可能性があります。実験に応じて血清を含めるかどうかご検討ください。

Q 標識率はどのように算出すればよいですか。: A

標識体を WS buffer で5倍希釈して500nm と280 nmの吸光度を測定後、以下の式より標識率を算出してください。

A₅₀₀: 500 nm の吸光度

A₂₈₀: 280 nm の吸光度

ε_protein: タンパク質の280nmでのモル吸光係数、

NH₂-Reactive AcidSensor のWS buffer 中における A₅₀₀ のモル吸光係数が 48400 です。

NH₂-Reactive AcidSensor は280nmと500nmに吸収があり、280nm/500nmの比が 0.16です。

標識対象が IgG の場合、はε_protein は216,000 を使用してください。

Q タンパク質1分子あたりにNH₂-Reactive AcidSensor はいくつ標識されますか。: A

Mouse IgG において、1分子あたり平均3つのAcidSensor が標識されることを確認しています。

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵,遮光 2.吸湿注意

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ミトコンドリア蛍光染色色素 -Cellstain®- MitoRed　同仁化学研究所

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–Cellstain^®– MitoRed

05 細胞染色用色素

–Cellstain^®– MitoRed

細胞染色用色素
細胞染色用色素

ミトコンドリア蛍光染色色素

製品コード

R237　 –Cellstain^®– MitoRed
化学名

9-[2-(4′-Methylcoumarin-7′-oxycarbonyl)phenyl]-3,6-bis(diethylamino)xanthylium chloride
分子式・分子量

C₃₈H₃₇ClN₂O₅=637.17

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
50 μg x8	￥17,000	344-08851

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マニュアル

プロトコル細胞を染色したい
パンフレット細胞増殖測定細胞染色プロトコル

参考文献

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1) R. Ikeda, T. Sugita, E. S. Jacobson and T. Shinoda, "Effects of Melanin upon Susceptibility of Cryptococcus to Antifungals", Microbiol. Immunol., 2003, 47(4), 271.

よくある質問

Q 細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。: A

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q MitoRedの使用方法を教えて下さい。: A

Ｑ： MitoRedの使用方法を教えて下さい。
Ａ：下記にHeLa細胞を用いた例を示します。
＊細胞の種類・観察条件等により、試薬濃度や染色条件の検討が必要となります。

＜試薬＞
　-Cellstain^®– MitoRed
　DMSO

　MitoRed 50 μg(1本分)をDMSO 78 μLで溶解する→1 mmol/L溶液

＜操作方法＞
　1.チャンバースライドに適当な細胞密度になるように細胞を培養する。
　　（1×10⁵～1×10⁶cells/mL)
　2.培地を除き、軽く洗浄する（培地、PBS, Hank's溶液等)
　3.1 mmol/L MitoRed溶液を、培地を用いて最終濃度20～200 nmol/Lになるように希釈する。
　　（細胞に添加する前にあらかじめ37℃に保温しておいた方がよい）
　　ウェルに希釈したMitoRed溶液を加え、培養条件下で30分～1時間程度インキュベートする。
　4.MitoRed溶液を除き、培地で洗浄する。
　5．蛍光顕微鏡G励起下で観察する。
　　（λ_ex=560 nm、λ_em=580 nm)

　細胞の固定を行う場合には、(3)に続いて以下の操作を行う。
　4.MitoRed溶液を除き、洗浄する。
　　(serum freeの培地、PBS, Hank's溶液等)
　5.10 ％中性ホルマリン緩衝液で15～20 min固定する。
　6.PBSで洗浄する。
　7.蛍光顕微鏡下で観察する。

Q 生細胞、死細胞に関係なく細胞内のミトコンドリアを染色するのでしょうか？: A

生細胞のみとなります。

死細胞ではミトコンドリアの膜電位が失われるので使用できません。

ミトコンドリア蛍光染色色素 -Cellstain®- MitoRed　同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状：	本品は、赤紫色～紫褐色固体であり、ジメチルスルホキシド、メタノールに溶ける
ジメチルスルホキシド溶状：	試験適合
NMRスペクトル：	試験適合

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷蔵,遮光
危険・有害シンボルマーク

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脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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Lipi-Green

05 細胞染色用色素

Lipi-Green

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴染色蛍光色素

製品コード

LD02　 Lipi-Green

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
10 nmol ^※	￥18,600	342-09371

本製品の測定原理と使用例を示した論文を公開!!

※ 35 mm dish: 10 ～ 50 枚分

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取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴は、トリアシルグリセロールやコレステロールエステルなどの中性脂肪が単分層のリン脂質一重膜によって取り囲まれた構造体です。脂肪滴は脂肪細胞のみに存在するわけではなく、すべての細胞に普遍的に存在しています。最近の研究から、脂肪滴はその表面に種々のタンパク質が結合し、体内の脂質代謝制御において重要な役割を担っていることが明らかになってきています¹⁾。近年、脂肪滴とオートファジー²⁾、細胞老化³⁾ といった細胞内現象との関連性も示唆されており、脂肪滴の形成・成長・融合・分解のメカニズムをより詳細に解明するツールが待ち望まれています。

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green　同仁化学研究所
1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.
2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.
3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

参考文献

参考文献を表示する

1) Y. Tatenaka, H. Kato, M. Ishiyama, K. Sasamoto, M. Shiga, H. Nishitoh and Y. Ueno, "Monitoring Lipid Droplet Dynamics in Living Cells by Using Fluorescent Probes", Biochemistry., 2019, DOI: 10.1021/acs.biochem.8b01071 .
2) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373.
3) A. Matsuda, I Mitsui, Y. Shimizu, T. Kanda, A. Ohnishi, M. Miyabe and Y. Itoh, "Establishment and characterization of a canine sebaceous epithelial cell line derived from an eyelid mass", J. Vet. Med. Sci., 2020, DOI: 10.1292/jvms.20-0179.

よくある質問

Q オレイン酸溶液の調製方法と細胞への導入方法を教えてください。

小社では以下の手順でオレイン酸溶液を調製して使用しました。

<オレイン酸ストック溶液>
必要な試薬
　・BSA (ウシ血清アルブミン)
　・オレイン酸
　・0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)

調製手順
1）	0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)にBSAを添加し溶解する(BSA: 濃度 0.14 g/mL)。
2）	容器（ディスポーザブルの遠沈管など）にオレイン酸を入れた後、１）のBSA溶液を加えて回転振盪器を用いて混合する（オレイン酸濃度: 4 mmol/L）。*1
3）	2）の混合溶液を、ポアサイズが0.22 µmのシリンジフィルター（PTFE製)でろ過する。
4）	冷蔵保存して、都度、使用する。*2
	1オレイン酸とBSA溶液を混合すると液体中に曇りを生じる場合がありますが、振盪を続けるとオレイン酸とBSAの複合体が形成され曇りが消失します。 2実験で用いる培地にオレイン酸ストック溶液を必要量を添加して、細胞へのオレイン酸導入に使用してください。

<細胞への導入方法>
1）	細胞を 5% CO₂インキュベーター（37℃）内で、24時間培養する。
2）	オレイン酸ストック溶液を添加した培地（オレイン酸の終濃度 200 μmol/L）に置換して、更に、24時間培養する。
3）	その後、取扱説明書に従って、脂肪滴を蛍光染色して観察する。

Q 共染色時の推奨フィルターを教えてください。

ご使用の色素と励起波長に応じて、下記表を参照のうえ共染色に適したフィルターを選択ください。

励起波長（共染色色素）	405 nm （Hoechst, DAPI etc.）	488 nm （FITC, GFP etc.）	561 nm （Cy3, Rhodamine, RFP etc.）	633 nm （Cy5, mCherry etc.）
Lipi-Blue	Lipi-Blueの蛍光観察	Lipi-Blueは488 nm, 561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Green	Lipi-Greenは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Greenの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Greenの蛍光観察	Lipi-Greenは561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため、何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Red	Lipi-Redは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redは488 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、500-550 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redの蛍光観察	Lipi-Redは633 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、650-700 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Deep Red	Lipi-Deep Redは、405および488 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。		Lipi-Deep Redは561 nmで若干励起されます。 Lipi-Deep Red由来の蛍光漏れ込みを抑えるため、560-610 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Deep Redの蛍光観察

Q 蛍光が確認できない場合の対処法は？: A

蛍光が検出されない場合、幾つか要因が考えられます。
下記に示した項目を確認し、状況によっては最適化条件をご検討ください。

①励起・蛍光波長が色素の蛍光特性と合致していない。
製品HPに掲載の色素の蛍光スペクトルとお使いのフィルターを確認し、励起・蛍光波長が
合致しているかご確認ください。

②染色条件が最適ではない。
[試薬濃度]
– working solutionの濃度を下記の範囲で検討する。
Lipi-Blue, Lipi-Green：0.1-0.5 μmol/L
Lipi-Red：1-5 μmol/L

※上記条件でも蛍光が検出されない場合、更に高濃度で染色する。
Lipi-Blue, Lipi-Green：1-2 μmol/L
Lipi-Red：10-20 μmol/L

[インキュベーション時間]
– 通常は30分ですが、試薬添加後に1-2時間インキュベートする。

③固定化の条件が適していない。
細胞によっては染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。
その際は、「Q:固定化細胞への染色は可能ですか？」をご参照ください。

④脂肪滴が小さくて確認が困難。
細胞によっては脂肪滴が小さく、確認が困難な場合があります。
その際は、高倍率の顕微鏡での確認、又はオレイン酸処理した細胞によるポジティブコントロールを
評価されることをお勧めします。

Q 固定化細胞への染色は可能ですか？: A

固定化した細胞でも染色は可能です。固定化細胞の染色手順は、下記を参照ください。
※固定化処理にはパラホルムアルデヒド(PFA)をご使用ください。メタノール等のアルコール固定は、脂肪滴の構造に影響を及ぼす可能性があるため、お勧めしません。
※細胞によっては、染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。その際は、固定化条件を検討頂く必要があります。

○染色後に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HepG2細胞＞
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で15分インキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

○染色前に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HeLa細胞＞
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で30分インキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

Q Lipi-Greenはフローサイトメーターでも使用できますか？: A

Lipi-Greenではフローサイトでは使用できませんが、Lipi-BlueやLipi-Deep Redでは測定可能です。
数値化に便利な下記のキットもご用意いたしております。

品名製品コード
Lipid Droplet Assay Kit – Blue LD05
Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red LD06

取扱条件

規格
性状：	本品は、黄橙色～橙色固体である。
純度(HPLC)：	85.0％以上

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脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Red　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Lipi-Red

05 細胞染色用色素

Lipi-Red

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴染色蛍光色素

製品コード

LD03　 Lipi-Red

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 nmol ^※	￥18,600	349-09381

本製品の測定原理と使用例を示した論文を公開!!

※ 35 mm dish: 10 ～ 50 枚分

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Red　同仁化学研究所
1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.
2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.
3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

参考文献

参考文献を表示する

2) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373.

よくある質問

Q オレイン酸溶液の調製方法と細胞への導入方法を教えてください。

小社では以下の手順でオレイン酸溶液を調製して使用しました。

<オレイン酸ストック溶液>
必要な試薬
　・BSA (ウシ血清アルブミン)
　・オレイン酸
　・0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)

調製手順
1）	0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)にBSAを添加し溶解する(BSA: 濃度 0.14 g/mL)。
2）	容器（ディスポーザブルの遠沈管など）にオレイン酸を入れた後、１）のBSA溶液を加えて回転振盪器を用いて混合する（オレイン酸濃度: 4 mmol/L）。*1
3）	2）の混合溶液を、ポアサイズが0.22 µmのシリンジフィルター（PTFE製)でろ過する。
4）	冷蔵保存して、都度、使用する。*2
	1オレイン酸とBSA溶液を混合すると液体中に曇りを生じる場合がありますが、振盪を続けるとオレイン酸とBSAの複合体が形成され曇りが消失します。 2実験で用いる培地にオレイン酸ストック溶液を必要量を添加して、細胞へのオレイン酸導入に使用してください。

<細胞への導入方法>
1）	細胞を 5% CO₂インキュベーター（37℃）内で、24時間培養する。
2）	オレイン酸ストック溶液を添加した培地（オレイン酸の終濃度 200 μmol/L）に置換して、更に、24時間培養する。
3）	その後、取扱説明書に従って、脂肪滴を蛍光染色して観察する。

Q 共染色時の推奨フィルターを教えてください。

ご使用の色素と励起波長に応じて、下記表を参照のうえ共染色に適したフィルターを選択ください。

励起波長（共染色色素）	405 nm （Hoechst, DAPI etc.）	488 nm （FITC, GFP etc.）	561 nm （Cy3, Rhodamine, RFP etc.）	633 nm （Cy5, mCherry etc.）
Lipi-Blue	Lipi-Blueの蛍光観察	Lipi-Blueは488 nm, 561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Green	Lipi-Greenは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Greenの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Greenの蛍光観察	Lipi-Greenは561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため、何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Red	Lipi-Redは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redは488 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、500-550 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redの蛍光観察	Lipi-Redは633 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、650-700 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Deep Red	Lipi-Deep Redは、405および488 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。		Lipi-Deep Redは561 nmで若干励起されます。 Lipi-Deep Red由来の蛍光漏れ込みを抑えるため、560-610 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Deep Redの蛍光観察

Q 蛍光が確認できない場合の対処法は？: A

蛍光が検出されない場合、幾つか要因が考えられます。
下記に示した項目を確認し、状況によっては最適化条件をご検討ください。

①励起・蛍光波長が色素の蛍光特性と合致していない。
製品HPに掲載の色素の蛍光スペクトルとお使いのフィルターを確認し、励起・蛍光波長が
合致しているかご確認ください。

②染色条件が最適ではない。
[試薬濃度]
– working solutionの濃度を下記の範囲で検討する。
Lipi-Blue, Lipi-Green：0.1-0.5 μmol/L
Lipi-Red：1-5 μmol/L

※上記条件でも蛍光が検出されない場合、更に高濃度で染色する。
Lipi-Blue, Lipi-Green：1-2 μmol/L
Lipi-Red：10-20 μmol/L

[インキュベーション時間]
– 通常は30分ですが、試薬添加後に1-2時間インキュベートする。

③固定化の条件が適していない。
細胞によっては染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。
その際は、「Q:固定化細胞への染色は可能ですか？」をご参照ください。

④脂肪滴が小さくて確認が困難。
細胞によっては脂肪滴が小さく、確認が困難な場合があります。
その際は、高倍率の顕微鏡での確認、又はオレイン酸処理した細胞によるポジティブコントロールを評価されることをお勧めします。

Q 固定化細胞への染色は可能ですか？: A

固定化した細胞でも染色は可能です。固定化細胞の染色手順は、下記を参照ください。
※固定化処理にはパラホルムアルデヒド(PFA)をご使用ください。メタノール等のアルコール固定は、脂肪滴の構造に影響を及ぼす可能性があるため、お勧めしません。
※細胞によっては、染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。その際は、固定化条件を検討頂く必要があります。

○染色後に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HepG2細胞＞
　①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
　②プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で15分インキュベートした。
　③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
　④4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
　⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

○染色前に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HeLa細胞＞
　①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
　②4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
　③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
　④プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で30分インキュベートした。
　⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

Q 緑色フィルターに漏れ込みはありますか？: A

Lipi-Redは、市販品のNile Redに比べると漏れ込みは少ないですが、フィルター種や
励起光の強度によっては、緑色フィルターに蛍光が漏れ込む場合があります。

緑色フィルターを別色素で評価する際には、下記の点に注意してお使い下さい。
・緑色の蛍光フィルターは550 nm以下を選択する。
・励起光の強度を調整しながら、蛍光を検出する。

取扱条件

規格
性状：	本品は、黒紫色～黒褐色固体である。
純度(HPLC)：	85.0％以上

取扱条件
1.医薬用外劇物
法規制毒物および劇物取締法	劇物

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脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Deep Red　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Lipi-Deep Red

05 細胞染色用色素

Lipi-Deep Red

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴染色蛍光色素

製品コード

LD04　 Lipi-Deep Red

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
10 nmol ^※	￥18,000	342-09631

※ 35 mm dish: 10 ～ 50 枚分

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Deep Red　同仁化学研究所

1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.
2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.
3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

よくある質問

Q 共染色時の推奨フィルターを教えてください。

ご使用の色素と励起波長に応じて、下記表を参照のうえ共染色に適したフィルターを選択ください。

励起波長（共染色色素）	405 nm （Hoechst, DAPI etc.）	488 nm （FITC, GFP etc.）	561 nm （Cy3, Rhodamine, RFP etc.）	633 nm （Cy5, mCherry etc.）
Lipi-Blue	Lipi-Blueの蛍光観察	Lipi-Blueは488 nm, 561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Green	Lipi-Greenは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Greenの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Greenの蛍光観察	Lipi-Greenは561 nmおよび633 nmでは励起されません。そのため、何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Red	Lipi-Redは405 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redは488 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、500-550 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Redの蛍光観察	Lipi-Redは633 nmで若干励起されます。 Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、650-700 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Deep Red	Lipi-Deep Redは、405および488 nmでは励起されません。そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。		Lipi-Deep Redは561 nmで若干励起されます。 Lipi-Deep Red由来の蛍光漏れ込みを抑えるため、560-610 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。	Lipi-Deep Redの蛍光観察

Q 固定化細胞への染色は可能ですか？

固定化した細胞でも染色は可能です。固定化細胞の染色手順は、下記を参照ください。

※	固定化処理にはパラホルムアルデヒド(PFA)をご使用ください。メタノール等のアルコール固定は、脂肪滴の構造に影響を及ぼす可能性があるため、お勧めしません。
※	細胞によっては、染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。その際は、固定化条件を検討頂く必要があります。

染色後に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HepG2細胞＞
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で30分インキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

染色前に細胞を固定化した例　＜実績細胞 : HeLa細胞＞
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で30分インキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。
　

Q 蛍光が確認できない場合の対処法は？

蛍光が検出されない場合、幾つか要因が考えられます。
下記に示した項目を確認し、状況によっては最適化条件をご検討ください。

①

励起・蛍光波長が色素の蛍光特性と合致していない。
製品HPに掲載の色素の蛍光スペクトルとお使いのフィルターを確認し、励起・蛍光波長が合致しているかご確認ください。

②	染色条件が最適ではない。
	[試薬濃度]
	–	working solutionの濃度を下記の範囲で検討する。　Lipi-Blue, Lipi-Green：0.1-0.5 μmol/l 　Lipi-Red：1-5 μmol/l 　Lipi-Deep Red：0.1 μmol/l
	※	上記条件でも蛍光が検出されない場合、更に高濃度で染色する。　Lipi-Blue, Lipi-Green：1-2 μmol/l 　Lipi-Red：10-20 μmol/l 　Lipi-Deep Red：0.5 μmol/l
	[インキュベーション時間]
	–	通常は30分ですが、試薬添加後に1-2時間インキュベートする。

③

固定化の条件が適していない。
細胞によっては染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。
その際は、「Q:固定化細胞への染色は可能ですか？」をご参照ください。

④

脂肪滴が小さくて確認が困難。
細胞によっては脂肪滴が小さく、確認が困難な場合があります。
その際は、高倍率の顕微鏡での確認、又はオレイン酸処理した細胞によるポジティブコントロールを評価されることをお勧めします。

取扱条件

規格
性状：	本品は、濃青色固体である。
純度(HPLC)：	90.0％以上

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脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit – Blue　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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Lipid Droplet Assay Kit – Blue

05 細胞染色用色素

Lipid Droplet Assay Kit – Blue

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴測定キット

製品コード

LD05　 Lipid Droplet Assay Kit – Blue

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set ^※	￥25,000	349-09641

※ 96 well plate : 1 枚分、フローサイトメトリー: 40 アッセイ分

キット内容

1 set ^※	・Staining Dye – Blue ・loading Buffer (10x)	×1 6 ml ×1

試験成績書

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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit - Blue　同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵

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脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red　同仁化学研究所

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

05 細胞染色用色素

Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴測定キット

製品コード

LD06　 Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set ^※	￥25,000	346-09651

※ 96 well plate : 1 枚分、フローサイトメトリー: 40 アッセイ分

キット内容

1 set ^※	・Staining Dye – Deep Red ・loading Buffer (10x)	×1 6 ml ×1

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit - Deep Red　同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵

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酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

发表于2024年1月15日由上海金畔生物科技有限公司

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Extracellular OCR Plate Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Extracellular OCR Plate Assay Kit

細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
ミトコンドリア関連
細胞内代謝

酸素消費速度プレートアッセイキット

細胞のOCRを汎用の蛍光プレートリーダーで測定できる
専用の装置や培地、プレートは不要
必要な試薬とOCR自動算出シートを準備

製品コード

E297　 Extracellular OCR Plate Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格
100 tests	￥48,000

キット内容

100 tests	・Oxygen Probe ・Mineral Oil	110 µl×1 10 ml×1

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English
OCR計算シート

ミネラルオイルの入れ方

技術情報

キットの原理

Extracellular OCR Plate Assay Kitには、培地中の酸素濃度が低下するとりん光強度が高くなる特性を持つOxygen Probeと、空気中の酸素流入を遮断するためのMineral Oilを同梱しています。
細胞外の酸素濃度に応じたりん光強度を蛍光マイクロプレートリーダーで測定後、Stern-Volmerの関係式より細胞のOCRを算出(自動計算シート)します。

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

※本製品は、群馬大学吉原利忠先生のご指導の下、製品化しました。

よくある質問

Q １キットあたりの測定可能なサンプル数の目安を教えてください。: A

1つの細胞種で同一細胞数にて実験する場合24サンプル測定可能です。

*２種類以上の細胞種や複数の細胞数を実験に用いる場合は、別途BlankとControlを準備する必要があり測定可能なサンプル数が変わります。詳細については、取扱説明書に実験系に応じたプレートレイアウトの例を記載しておりますのでご参照ください。

Q 浮遊細胞の実験例を教えてください。: A

Jurkat細胞の実験例をご案内します。
＜操作＞
(1)Blank 3としてJurkat細胞(3.0×10⁶ cells/ml)をRPMI培地に懸濁し、ControlやSampleとしてJurkat細胞(3.0×10⁶ cells/ml)をworking solutionに懸濁したものを用意し、96穴黒色クリアボトムマイクロプレートに100 µl (300,000 cells/well)ずつ播種した。
(2)Blank 1にはRPMI培地を100 µl、Blank 2にはworking solutionを100 µl添加した。
(3)予め37℃に設定しておいたプレートリーダーの中にマイクロプレートを入れ、30分間インキュベーションした。
(4)Blank 1, Blank 2, Blank 3, ControlにRPMI培地を10 µlずつ添加した。
(5)Sampleには、RPMI培地で希釈したSample solution(AntimycinもしくはFCCP溶液)を10 µlずつ添加した。
(6)Sample solution添加後は、直ちにMineral Oilを1滴ずつ各ウェルに滴下した。
(7)37℃に設定しておいたプレートリーダーの中にマイクロプレートを入れ、5分間インキュベーションした。
(8)蛍光プレートリーダーを用いて強度をタイムコースで10分毎に200分間測定した(Ex: 500 nm, Em: 650 nm, Bottomリーディング)。
(9)ダウンロードした専用の計算シートに得られた強度の値を入力し、OCR値を算出した。

各ウェルに必要なサンプル及び試薬の添加量

＜結果＞

Q 本キットのOCR算出方法を教えてください。: A

専用の計算シートをダウンロードし、以下の手順でOCRを算出します。

＜OCR算出手順の概要＞

(1)OCR測定で得られた強度の値を計算シートに入力すると、Stern-Volmerの式より酸素量(nmol)が自動的に算出される。
(2)時間(min)と酸素量(nmol)のグラフより、測定した全ての条件において直線性の得られる範囲を確認する。
(3)2)で確認した時間(min)と酸素量(nmol)の範囲における傾きを算出する。
(4)3)で算出した傾きより、OCR(pmol/min)を算出する。
詳細は取扱説明書の"解析"をご参照ください。

Q Mineral Oilに細胞毒性はありませんか。: A

Mineral oilを添加した細胞においてCell Counting Kit-8による細胞毒性測定を行ったところ、毒性は確認されませんでした。

(参考)

Q OCR測定後の細胞数を計測する方法を教えてください。: A

核染色剤(Hoechst 33342)を用い、ウェルあたりの細胞数を算出した実験例をお示しします。

＜操作＞
(1)OCR測定用ウェルに細胞を播種した。
(2)段階希釈した細胞を検量線作成用ウェルに播種した。
(3)取扱説明書に従いOCRを測定した。
(4)検量線作成用ウェルに培地を10 µl/wellずつ添加した(液量をOCR測定用ウェルと110 µl/wellに揃えるため)。
(5)培地で希釈したHoechst 33342溶液(10 µg/ml)を全てのウェルに100 µl/wellずつ添加した。
※OCR測定用ウェルはオイル上から添加した。
(6)37℃、30分間インキュベートした。
(7)蛍光プレートリーダーにて測定した(Ex: 350 nm , Em: 461 nm )。
(8)検量線(X軸：細胞数、Y軸：蛍光強度)を作成し、OCR測定用ウェルの細胞数を算出した。

Q Working solutionは保存できますか。: A

working solutionは保存できません。用時調製してください。

Q Oxygen ProbeやMineral Oilは凍結融解を繰り返しても測定に影響しませんか。: A

Oxygen ProbeおよびMineral Oilは凍結融解を繰り返した場合も測定に影響がないことを確認しています。

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷凍,遮光 2.安衛法

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比色試薬／金属指示薬 Cyanoline Blue　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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Cyanoline Blue

15 比色試薬／金属指示薬

Cyanoline Blue

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

C017　 Cyanoline Blue
化学名

Composite preparation of monopyrazolone and bispyrazolone

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
25 g	￥15,000	343-00842

試験成績書

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ご購入方法
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技術情報

溶解例

340 mg/25 mⅬ (ピリジン)

参考文献

参考文献を表示する

1) 今村寿明, "ピラゾール誘導体の分析試薬としての応用", ドータイトニュース, 1966, 14(3), 2.
2) J. M. Kruse and M. G. Mellon, "Colorimetric Determination of Cyanide and Thiocyanate", Anal. Chem., 1953, 25, 446.
3) L. Prochazkova, "Spectrophotometric Determination of Ammonia as Rubazoic Acid with Bispyrazolone Reagent", Anal. Chem., 1964, 36, 865.
4) S. Baar, "The Micro Determination of Cyanide: Its Application to the Analysis of Whole Blood", Analyst, 1966, 91, 268

よくある質問

Q CyanolineBlue を用いた、全シアン測定方法等を教えてください。: A

シアノリンブルー溶液:0.27 gをピリジン20 mLに加温して溶かし、水100 mLを混合する（冷蔵保存で1週間安定）。

測定方法の詳細はJISに記載されておりますので、ここでは簡単に説明いたします。

【方法】
　工業用水並びに排水中のCN-は、加熱蒸留して、NaOH溶液（ｐH 11.0)に
吸収させておく。（この蒸留操作についてはJISに図解説明されています）
　蒸留水溶液20mLを共栓付き三角フラスコ100mLにとり、緩衝液10 mLと
クロラミンT溶液0.25mLを加える。直ちに密栓して静かに振り混ぜ、3～5分放置したのち
シアノリンブルー溶液15mLを加え、水浴中（25℃）に約30分間ひたし、
うすい紅色から紫色を経て安定な青色になるまで発色させる。
10 mmセルに移し、620 nmで比色する。

・クロラミンT溶液
　クロラミンT 1.25 gを水に溶かして100 mLとする。
・リン酸緩衝液（ｐH 6.8)
・CN-標準液
　KCN 2.51 gを水に溶かして1 Lとする（これを原液とする）
　その濃度は、p-ジメチルアミノベンジリデンローダニン-アセトン溶液（0.02 %)0.5 mLを
　指示薬として、0.1N AgNO3標準液で滴定して標定する。
　必要に応じ、1μg/1 mLの濃度に希釈して使用する。

＊JIS規格に添った試験をされる際は、それぞれの試験方法をご覧になり、
　その方法に準じて行ってください。

取扱条件

規格
性状：	本品は、白色～淡黄色粉末でピリジンに溶ける。
ピリジン溶状：	試験適合
鋭敏度：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 Diantipyrylmethane　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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Diantipyrylmethane

15 比色試薬／金属指示薬

Diantipyrylmethane

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

D008　 Diantipyrylmethane
CAS番号

1251-85-0
化学名

Di(4-antipyryl)methane, monohydrate
分子式・分子量

C₂₃H₂₄N₄O₂･H₂O=406.48

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
25 g	￥9,000	342-00932

試験成績書

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技術情報

応用可能な金属イオン

抽出、比色試薬として：Fe, Mo, Ti, Uなど
重量分析試薬として：Bi, Ca, Cd, Co, Cu, Hg, Ir, Os, Pb, Sr, Ti, Znなど
抽出分離試薬として：Ag, Cd, Cr, Cu, Fe, Sc, Sn, Te, Ti, V, Zn, Zr, 希土類金属など

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) 梶山緑郎, 山口勝正, "ジアンチピリルメタンによるフェロニオブ中チタン定量法", Jpn. Anal., 1967, 16, 908.
2) 石井一, "ジアンチピリルメタンを用いるセメントおよび原料中のチタンの吸光光度定量法", Jpn. Anal., 1967, 16, 110.
3) 石井一, "分析試薬としてのジアンチピリルメタン" ドータイトニュースレター, 1969, 17, 2.
4) 石井一, "ジアンチピリルメタンとその誘導体", Jpn. Anal., 1972, 21, 665.
5) C. H. Chung, "Simultaneous Determination of Iron and Titanium in Silicate Rocks by Using Diantipyrinylmethane with Dual-wavelength Spectrophotometry", Anal. Chim. Acta, 1983, 154, 259.
6) N. Uehara, K. Morimoto and Y. Shijo, "Determination of Titanium(III) in River Water by Ion-pair Reversed-phase High-performance Liquid Chromatography with 4,4'-Diantipyrylmethane", Analyst, 1991, 116, 27.

取扱条件

規格
性状：	本品は、白色結晶性粉末で希塩酸に溶ける。
純度(HPLC)：	99.0％以上
希塩酸溶状：	試験適合
融点：	148～159℃
吸光度(チタン錯体)：	0.280 以上(390 nm付近)
水分：	2.0～5.0％
IRスペクトル：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 DAN　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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DAN

15 比色試薬／金属指示薬

DAN

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

D027　 DAN
CAS番号

771-97-1
化学名

2,3-Diaminonaphthalene
分子式・分子量

C₁₀H₁₀N₂=158.2

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 g	￥29,600	343-06481

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技術情報

溶解例

50 mg/100 mL（0.1 mol/L-塩酸）

参考文献

参考文献を表示する

1) J. H. Wiersma, "2,3-Diaminonaphthalene as a Spectrophotometric and Fluorometric Reagent for the Determination of Nitrite Ion", Anal. Lett., 1970, 3, 123.
2) 平木敬三, 由井収, 平山宏, 西川泰治, 重松垣信, "海水中のセレンのけい光定量", Jpn. Anal., 1973, 22, 712.
3) G. L. Wheeler and P. F. Lott, "Rapid Determination of Trace Amounts of Selenium(IV), Nitrate, and Nitrate by High-pressure Liquid Chromatography Using 2,3-Diaminonaphthalene", Microchem. J., 1974, 19, 390.
4) 石川登志樹, 橋本芳一, "蛍光高速液体クロマトグラフィーによる降水中の極微量セレン(IV)及びセレン(VI)の定量", 分析化学, 1988, 37, 344.
5) Y. Mukai, H. Hara and K. Taniguchi, "2,3-Diaminonaphthalene を用いる亜硝酸及び亜硝酸アミルの蛍光定量", 分析化学, 1991, 40, 105.
6) 向日良夫, 原久子, 谷口寛一, "2,3-ジアミノナフタレンを用いる亜硝酸及び亜硝酸アミルの蛍光定量", 分析化学, 1991, 40, 105.
7) E. M. Rodriguez, M. T. Sanz and C. D. Romero, "Critical Study of Fluorimetric Determination of Selenium in Urine", Talanta, 1994, 41, 2025.
8) A. M. Miles, Y. Chen, W. Owens and M. B. Grisham, "Fluorometric Determination of Nitric Oxide", Methods: A Companion to Methods in Enzymology, 1995, 7, 40.

取扱条件

規格
性状：	本品は、白色～淡黄褐色粉末で熱水、熱アルコール及び希塩酸等に溶ける。
希塩酸溶状：	試験適合
融点：	185～200℃
IRスペクトル：	試験適合

取扱条件
1.保存方法：冷凍,遮光

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比色試薬／金属指示薬 HNB　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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HNB

15 比色試薬／金属指示薬

HNB

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

H007　 HNB
CAS番号

63451-35-4
化学名

2-Hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-3,6-naphthalenedisulfonic acid, trisodium salt
分子式・分子量

C₂₀H₁₁N₂Na₃O₁₁S₃=620.48

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 g	￥5,400	349-01461

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ご購入方法
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技術情報

応用可能な金属

キレート滴定指示薬として：Ca
比色試薬として：アルカリ土類, UO₂^2＋, 希土類

参考文献

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1) A. Itoh and K. Ueno, "Evaluation of 2-Hydroxy-1-(2-Hydroxy-4-Sulpho-1-Naphthylazo)-3-Naphthoic Acid and Hydroxynaphthol Blue as Metallochromic Indicators in the EDTA Titration of Calcium", Analyst, 1970, 95, 583.
2) 伊藤敦子, 上野景平, "ヒドロキシナフトールブルー(HNB)指示薬を用いるカルシウム、マグネシウムの連続キレート滴定", Jpn. Anal., 1970, 19, 394.
3) M. Sugawara, Y. Rokugawa and T. Kambara, "Catalytic Decomposition of the Excess Reagent in the Spectrophotometric Determination of Copper(II) with O,O'-Dihydroxyazo Compounds", Bull. Chem. Soc. Jpn., 1977, 50, 3206.
4) T. Yamane, "Flow Injection Determination of Hydrogen Peroxide by Means of the Manganese-catalyzed Oxidation of Hydroxynaphthol Blue", 分析化学, 1984, 33, 203.
5) 山根兵, 上條幹人, "フローインジェクション－吸光光度法による水の硬度測定", 分析化学, 1984, 33, 110.
6) 内田和秀, 友田正子, 斉藤眞一, "ヒドロキシナフトールブルーを用いたフローインジェクション分析によるカルシウムの定量", 分析化学, 1985, 34, 568.
7) M. M. Ferris and M. A. Leonard, "Examination of Metallochromic Indicators and Water-soluble Reagents for Metals by Planar Electrophoresis", Analyst, 1986, 111, 351.

取扱条件

規格
性状：	本品は、黒紫色粉末で水及びアルコールによく溶ける。
水溶状：	試験適合
吸光度：	0.600 以上(647 nm付近)
吸光度(カルシウム錯体)：	0.310 以上(562 nm付近)
強熱残分(硫酸塩)：	35.0％以下
鋭敏度：	試験適合
IRスペクトル：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 N,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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N,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀

15 比色試薬／金属指示薬

N,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

JS01　 N,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀
CAS番号

1470-61-7
化学名

Silver N,N-diethyldithiocarbamate
分子式・分子量

(C₂H₅)₂NCS₂Ag=256.14

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 g	￥3,000	340-09073
5 g	￥6,200	344-09071

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溶解例

1 g/50 mL（熱ピリジン）250 mg/50 mL（熱クロロホルム）

参考文献

参考文献を表示する

1) 中尾正三、ドータイトニュースレター, 1962, 10(4), 2.
2) 山本大二郎, 上田隆, "ジエチルジチオカルバミン酸銀塩法を用いるヒ素分析における塩基の影響", 分析化学, 1972, 21, 938.
3) A. G. Howard and H. Arbab-Zavar, "Sequential Spectrophotometric Determination of Inorganic Arsenic(III) and Arcenic(V) Species", Analyst, 1980, 105, 33.
4) 川井英雄, "生体試料中の微量元素の定量", ぶんせき, 1990.
5) JIS K 0101,工業用水試験方法, 財団法人日本規格協会, 1998.
6) JIS K 0102,工場排水試験方法, 財団法人日本規格協会, 2010.
7) 第8版食品添加物公定書, 日本食品添加物協会.
8) 河川水質試験方法（案）1997年版試験方法編, 建設省河川局監修, 技報堂出版株式会社.
9) 底質調査法, 環境省水環境部, 平成13年3月.
10) 鉱泉分析法指針（改訂）, 環境省自然環境局, 平成14年3月.
11) 食品衛生検査指針理化学編, 厚生労働省監修, 社団法人食品衛生協会, 2005.
12) 日本薬局方, 第16改正.
13) 上水試験方法 2011年版 III.金属類編, 社団法人日本水道協会.

よくある質問

Q N,N-ジエチルジオカルバミド酸銀[JS01]と Arsemate[AO12]との違いを教えてください。: A

N,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀 [製品コード: JS01] と Arsemate[製品コード: A012]は、同じ構造の化合物です。
「JIS K9512に適合した試薬」はN,N-ジエチルジチオカルバミド酸銀[製品コード：JS01]となります。

取扱条件

規格
性状：	N, N-ジエチルジチオカルバミド酸銀は、淡黄色の結晶又は結晶性粉末で、ピリジンにやや溶けにくく、クロロホルムに溶けにくく、水、エタノール及びジエチルエーテルにほとんど溶けない。融点(分解)は、約175℃である。
純度(滴定)：	98.0％以上
ピリジン溶状：	試験適合
ひ素分析適合性：	試験適合
IRスペクトル：	試験適合

取扱条件
1.保存方法：遮光

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Caキレート滴定用指示薬・その他金属比色試薬 Murexide　同仁化学研究所

发表于2023年12月29日由上海金畔生物科技有限公司

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Murexide

15 比色試薬／金属指示薬

Murexide

比色試薬／金属指示薬

Caキレート滴定用指示薬・その他金属比色試薬

製品コード

M011　 Murexide
CAS番号

3051-09-0
化学名

Purpuric acid, ammonium salt
分子式・分子量

C₈H₈N₆O₆=284.19

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
5 g	￥6,200	346-01834
25 g	￥27,200	340-01832

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溶解例

10 mg/100 mL（熱水）

参考文献

参考文献を表示する

1) H. Gordon and G. Norwitz, "Spectrophotometric Determination of Calcium in Zirconium Powder by Use of Murexide", Talanta, 1972, 19, 7.
2) K. S. Balaji, S. D. Kumar and P. Gupta-Bhaya, "Stability Constants of Calcium and Lanthanide Ions with Murexide", Anal. Chem., 1978, 50, 1972.

よくある質問

Q Murexideを滴定指示薬として使用する際の調整方法を教えてください。: A

硫酸カリウムを用いて、Murexide:K₂SO₄=1:100～300　に粉砕混和してください。

＊弊社にはMurexideとK₂SO₄を粉砕混合した製品「MX（同仁品コード：M012)」もございます。
そちらもご利用ください。

取扱条件

規格
性状：	本品は、赤紫色～暗赤紫色粉末である。
水溶状：	試験適合
吸光度：	0.200以上 (525 nm付近)
鋭敏度：	試験適合
強熱残分(硫酸塩)：	0.20％以下
IRスペクトル：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 MX　同仁化学研究所

发表于2023年12月28日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

MX

15 比色試薬／金属指示薬

MX

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

M012　 MX
化学名

Composite preparation of ammonium purpurate and potassium sulfate

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
25 g	￥2,800	347-01842
100 g	￥9,400	349-01841

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溶解例

1 g/1,000 mL（水）

よくある質問

Q Coの滴定方法を教えてください。: A

ここでは、MXを指示薬とする直接滴定に関し記載します。

滴定の際の液性は中性～弱アルカリ性になりますので、酸性で行われたい方は「Cu-PAN」の項目をご覧下さい。

【試薬】0.01 mol/L EDTA標準液
　　　　MX指示薬希釈粉末
　　　　約1 mol/L アンモニア水

【操作】①試料溶液のCo²⁺の濃度は100 mL中25 mg以下にする。
　　　　②溶液が酸性の場合にはアンモニア水で中和しておく。
　　　　③MX指示薬希釈粉末約0.2 gを加えると溶液は橙黄色を呈するので、さらにアンモニアを徐々に滴下して
　　　　　黄色になったところで止める(pH≒8になっている）
　　　　④この溶液をEDTA標準液で滴定する。
　　　　　終点の変色は　黄→紫

　　　　　　0.01 mol/L EDTA 1 mL = 0.5893 mg Co

【備考】
　　・滴定時の溶液の緩衝能力が小さいため、滴定の途中でpHが下がり、溶液が橙黄色になることがある。
　　　この場合には、さらにアンモニア水を追加、液を再び黄色にして滴定を続ける。
　　・過剰のアンモニアが存在すると、Co-色素錯体よりCo(NH₃)₆²⁺の方が安定なため、Co-色素錯体が分解する。
　　　上記の操作による時にはNH₃の濃度を最小限にとどめているので、EDTAに結合していないCo²⁺は
　　　ほとんど遊離の水和イオンとして溶液中に存在するものと考えられる。
　　・重金属イオンは妨害する。このうちPb²⁺,Cu²⁺,Zn²⁺,Co²⁺などはチオグリコール酸で、Al³⁺はNH₄Fでマスクできる。
　　　少量のMg²⁺,Ba²⁺,Sr²⁺は共存しても差し支えないが、Ca²⁺は一部滴定にかかってくる。
　　　一般にCoを適当な方法で分離・抽出したのちにこの方法を滴定するほうがよい。

＊「キレート滴定」上野景平著（南江堂出版）より

Q MX指示薬を使ってNiを滴定で測りたいと思います。方法を教えてください。: A

下記方法を参考にして下さい。
＜試薬＞
・0.01 M EDTA標準液
・MX指示薬希釈粉末
・緩衝液（約１M NH₄Cl溶液、および濃アンモニア水）

＜操作＞
・試料溶液中のNi濃度は100 mL中15 mL以下にする。
酸性溶液はまず中和し、指示薬粉末約0.2 gと、要すればマスク剤を加える。
ほぼ中性の溶液にNH₄Cl溶液10 mLを加え、液がなおpH7以下であれば溶液は橙黄色を
呈するから、アンモニア水をゆっくり滴下して黄色にする（pH7くらい）
次にEDTA標準溶液で滴定するが、滴定の途中でH(+)が遊離するためにpHが低くなって
再び橙黄色になった場合は、アンモニア水を追加してpHを調整する。
終点に近くなってから濃アンモニア水10 mLを加えて強アンモニアアルカリ性とし、
滴定を続けると、終点において黄→青紫の明瞭な変色が認められる。

　0.01 M EDTA 1 mL = 0.5869 mg Ni

＜備考＞
・MX指示薬による終点の変色は、pH7～12の領域で十分明瞭であるが、
　pH10～12において最も鋭敏に変色する。しかしながら滴定初期において
　溶液のpHをこのようなアルカリ性領域にまであげると水酸化物の沈殿を
　生じるので、大部分のNiがEDTAと結合した後、上述の操作に従って強アルカリ性にする。
　ただ、アンモニアの濃度はCu,Coの滴定におけるほど厳密に調整する必要は無い。
・MX指示薬はNiに対して金属指示薬と同時にpH指示薬としての役にもたっている。
　すなわちNi-MXキレートはpH7を中心に橙⇔黄と変色するため、滴定に先立って
　溶液のpHを7前後に調整するのに利用されている。
・滴定のpHは10～12であるから、二価以上の金属のほとんど全てが一緒に滴定される。
　このうちAl(3+),Ca(2+)および希土類金属イオンはNH₄Fで、また少量のAl(3+),Mn(3+),Fe(3+)
　はトリエタノールアミンでマスクできる。また、Ni(2+)の5倍量までのFe(3+)は
　10％ピロリン酸ナトリウム溶液50 mLを添加することによりマスクされる。
　Cu(2+)はまた、アスコルビン酸にてCu(+)に還元し、窒素気流中で滴定すればその妨害を
　避けることも出来る。
　Hg(2+)はKIによってHgI₄(2-)としてマスクされる。
・この滴定法は種々の金属イオンと共存するNi(2+)を有機試薬で沈殿分離したのち、
　その沈殿中のNiを定量するとき便利である。たとえば、合金中のNiを定量するのに
　試料を溶解した後、ジメチルグリオキシムでNiを沈殿させ、沈殿を濃塩酸で分解・蒸発乾固
　したのちこの滴定法を応用する。
　あるいは、沈殿を塩酸に溶かし、過剰のEDTA標準液を加え、アンモニアアルカリ性(pH9～10)に
　して、Zn標準液で逆滴定する。

＊「キレート滴定法」上野景平著（南江堂出版）より

取扱条件

規格
性状：	本品は、桃色～赤紫色粉末で水に溶ける。
水溶状：	試験適合 0.150～0.200(525 nm)
鋭敏度：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 Nitroso-PSAP　同仁化学研究所

发表于2023年12月28日由上海金畔生物科技有限公司

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Nitroso-PSAP

15 比色試薬／金属指示薬

Nitroso-PSAP

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

N010　 Nitroso-PSAP
CAS番号

80459-15-0
化学名

2-Nitroso-5-[N-n-propyl-N-(3-sulfopropyl)amino]phenol
分子式・分子量

C₁₂H₁₈N₂O₅S=302.35

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 mg	￥3,600	341-04081
1 g	￥16,800	347-04083

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技術情報

表鉄(II)試薬の比色定量条件の比較

pHの影響

Nitroso-PSAP金属錯体の吸収スペクトル、試薬ブランク対照

参考文献

参考文献を表示する

1) K. Toei, S. Motomizu and T. Korenaga, "Nitrosophenol and Nitrosonaphthol Derivatives as Reagents for the Spectrophotometric Determination of Iron and Determination of Micro-amounts in Waters with 2-Nitroso-5-dimethylaminophenol", Analyst, 1975, 100, 629.
2) 斉藤幹彦, 堀口大吉, 喜納兼勇, "新規水溶性ニトロソフェノール誘導体による微量鉄(II)の吸光光度定量", 分析化学, 1981, 30, 635.
3) 酒井忠雄, 大野典子, "2-ニトロソ-5-(N-エチル-N-スルホプロピルアミノ)フェノールを用いたフローインジェクション法による微量鉄の定量", 分析化学, 1984, 33, 332.
4) 吉田烈, 上野景平, "2-ニトロソ-5-(N-プロピル-N-スルホプロピルアミノ)フェノールを用いるコバルトの吸光光度定量", 分析化学, 1985, 34, 77.
5) 高柳美行, 森島泰雄, 後藤鉦二, 長谷川岩三, 福田常男, 八代有, "フェロキシダーゼ活性を利用したヒト血清セルロプラスミンの測定", 日本臨床化学会年会記録第25集, 1985, 25, 88.
6) 徳井健志, 奥田潤, "ヒト血清蛋白結合性Fe²⁺, Fe³⁺(第3報）-Nitroso-PSAPを用いるFe²⁺, Fe³⁺の分析法-", 日本臨床化学会年会記録第26集, 1986, 158.
7) N. Ohno and T. Sakai, "Spectrophotometric Determination of Iron in Boiler and Well Waters by Flow Injection Analysis Using 2-Nitroso-5-(N-propyl-N-sulphopropylamino)phenol", Analyst, 1987, 112, 1127.
8) I. Yoshida, F. Sagara and K. Ueno, "Studies of the Stabilities of Scandium, Yttrium, and Lanthanoid-ion Complexes of 2-Nitroso-5-(N-propyl-3-sulfopropylamino)phenol", Bull. Chem. Soc. Jpn., 1988, 61, 2639.
9) I. Yoshida, F. Sagara and K. Ueno, "Potentiometric Studies on the Binding Properties of Protons, Some Divalent and Tervalent Metal Ions with 2-Nitroso-5-(N-propyl-3-sulfopropylamino)phenol", Anal. Sci., 1988, 4, 69.
10) T. Makino, K. Nakamura and K. takahara, "A high-performance liquid immunoaffinity chromatography method for determining transferrin-bound iron in serum", Clinica Chimica Acta, 2011, 412, 914.

取扱条件

規格
性状：	本品は、黄色～黄褐色粉末で水に溶ける。
純度(吸光度)：	97.0％以上
水溶状：	試験適合
吸光度(ブランク)：	0.050 以下(756 nm付近)
モル吸光係数(鉄錯体)：	44,000 以上(756 nm付近)
IRスペクトル：	試験適合

取扱条件
1.保存方法：冷蔵

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比色試薬／金属指示薬 NN diluted with potassium sulfate　同仁化学研究所

发表于2023年12月28日由上海金畔生物科技有限公司

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NN diluted with potassium sulfate

15 比色試薬／金属指示薬

NN diluted with potassium sulfate

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

N012　 NN diluted with potassium sulfate
化学名

Composite preparation of 2-hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-3-naphthoic acid and potassium sulfate

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
25 g	￥2,800	343-02042
500 g	￥19,200	347-02045

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溶解例

1 g/1,000 mL（水）

取扱条件

規格
性状：	本品は、紫色粉末である。
吸光度：	0.150 以上(550 nm)
鋭敏度：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 NN　同仁化学研究所

发表于2023年12月28日由上海金畔生物科技有限公司

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NN

15 比色試薬／金属指示薬

NN

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

N013　 NN
CAS番号

3737-95-9
化学名

2-Hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-3-naphthoic acid
分子式・分子量

C₂₁H₁₄N₂O₇S=438.41

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 g	￥5,200	342-02051

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技術情報

溶解例

50 mg/10 ml（1 mol/l KOH）→100 ml(水)、 10 mg/100 ml（メチルアルコール）

参考文献

参考文献を表示する

1) K. Ueno, T. Imamura and K. L. Cheng, "Handbook of Organic Analitical Reagents 2nd Edition", CRC Press, 1992.
2) J. Patton and W. Reeder, "New Indicator for Titration of Calcium with (Ethylenedinitrilo) Tetraacetate", Anal. Chem., 1956, 28, 1026.
3) A. Itoh and K. Ueno, "Evaluation of 2-Hydroxy-1-(2-Hydroxy-4-Sulpho-1-Naphthylazo)-3-Naphthoic Acid and Hydroxynaphthol Blue as Metallochromic Indicators in the EDTA Titration of Calcium", Analyst, 1970, 95, 583.

よくある質問

Q NN指示薬を使用したCaの滴定方法を教えてください。: A

下記方法を参考にして下さい。

NN指示薬希釈粉末は、弊社にて「NN diluted with potassium sulfate」という名前でも販売しております。

＜試薬＞
・0.01M EDTA標準液
・NN指示薬希釈粉末
・約8N KOH溶液

＜操作＞
・中性の試料溶液50mlの緩衝剤として8N KOH 4mlをかき混ぜながらゆっくり加え(pH約13となる）
　ときどきかき混ぜ3～5分間放置する(Mgは水酸化物となって沈殿する）。
　次に必要があれば、妨害重金属のマスク剤として20％トリエタノールアミン溶液および
　10％チオグリコール酸溶液数滴とNN指示薬希釈粉末約0.1gを添加し、EDTA標準液で滴定する。
　終点の変色は　赤→青
　　0.01M EDTA 1ml = 0.4008mg Ca

＜備考＞
・Mg共存下のCaを選択的に滴定することは非常に応用範囲の広い分析法であるが、Mgの共存量が多くなると
　Ca2+の一部がMg(OH)2の沈殿に吸着されるため負の誤差を生じる傾向があり、この場合には次の滴定法を
　もちいるとその誤差を小さくすることが出来る。
　§まず試料溶液の一部につき上記操作にしたがって滴定を行い、EDTA標準液の概略の消費量を知る。
　§次に同量の試料溶液をとり、まずはじめに消費予想量よりわずか少なめのEDTA標準液をビュレットから
　　滴下する。
　§8N KOH溶液(必要があればマスク剤）およびNN指示薬を加え、終点に達するまで引き続き滴定する。
　　第２回目の滴定値は正しい値を示す。
　　　すなわち、この方法によるときはCa2+の大部分がEDTAとあらかじめキレート化合物を生成しているので
　　KOHを加えてMg(OH)2が沈殿する際にもCa2+の吸着が最小限に留められる。
　　　あるいは、この変法としてCa標準液による逆滴定も有効である。すなわち、試料溶液に対し、一定過剰の
　　EDTA標準液を加えた後、8N KOH溶液でpH13とし、しばらく放置してからNN指示薬を用いCa標準液で逆滴定する。
　　この場合、EDTA共存下にMg(OH)2が沈殿するので、Ca2+の吸着が抑えられる。
　　　しかしながら、これらの方法によってもCaの5倍(重量)以上のMgが共存する場合は精度が著しく低下する。
　　このような場合は次に述べるようにMg(OH)2の再沈殿を行えば、Caの20倍のMgが共存しても正確な結果がえられる。

・Mg(OH)2の沈殿生成を防ぐため、補助キレート試薬として酒石酸などを添加してEDTAと反応しない状態でMgの
　弱いキレート化合物を生成させておくのも一つの方法である。たとえば、Mg50mgに対し酒石酸200mgを
　添加すれば有効である。この際、滴定試薬としてのEDTAの変わりにGEDTAをもちいれば終点は更に明瞭になる。

・Mg(OH)2の沈殿に指示薬色素が吸着され変色が見にくい場合には、ゼラチンやポリビニルアルコール溶液を
　少量添加すると色素の吸着をおさえられる。また、Mg(OH)2の沈殿の量が多くなると終点での変色に色戻りの
　現象が起こる。この場合は青色が数秒間続く点を終点とする。

・滴定のpHが12より低くなるとMg2+の一部が滴定にかかって正の誤差を生じる。またKOHの代わりにNaOHを
　もちいても良いが、KOHをもちいるほうが指示薬の呈色は鮮やかである。

・重金属、殊にCu2+,Ni2+,Co2+,Fe3+,Al3+の共存は避けなければならない。重金属に対する各種マスク剤の
　能力は別途お問い合わせいただきたい。大量のFe3+はトリエタノールアミンでマスクしても、NN指示薬が
　酸化されるので良い結果が得られない。
　沈殿や抽出により妨害イオンを除去することも出来る。たとえば、Fe,Mn,Cuなどをオキシン,
　ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウムあるいはクペロンで抽出することにより大量の妨害金属を除去することができる。

・陰イオンのうちPO43-はアルカリ性溶液中で難溶性のリン酸カルシウムを生成するため妨害をおこす。
　共存を許される濃度は試料溶液中のCa2+の濃度によって異なり、Ca濃度の低いほど多量のPO43-の共存が
　許される。たとえば試料溶液70ml中の0.1,1,10mgのCa2+を含む場合、Pとしてそれぞれ3mg,1mg,0.5mgの
　PO43-を含んでも差し支えないといわれる。
　多量のPO43-を含む場合はイオン交換法、溶媒抽出法あるいは沈殿などによってあらかじめ除去しておく
　必要がある。

・従来この目的にはMX指示薬(ムレキシド）がもちいられたが、終点の変色が不明瞭なうえ滴定値がpHの
　影響をうけやすいので現在はほとんどもちいられていない。しかしながら光度滴定法によれば
　微量のCaを滴定する事ができる。

・カルセインもpH12におけるCa滴定の指示薬としてもちいられる。特にCaによる逆滴定法はPO43-による妨害を
　うけることが少なく、PO43-と共存するCa2+の定量法として常用されている。すなわち酸性試料に過剰の
　EDTA標準液を加え、次に8N KOHを加えてpH12～13となし、カルセインを指示薬としてCa標準液で
　逆滴定する。十分純粋なカルセインはKOHアルカリ溶液中では直接滴定の終点において完全に蛍光が
　消失するので、補助色素をもちいなくとも蛍光の消失点によって終点が定められ、着色した試料にも
　応用できる。

・ヒドロキシナフトールブルー(HNB)も同様の条件で指示薬としてもちいることができる。
　視覚滴定によるときは変色の鋭敏性はNN指示薬と大差ないが、光度滴定ではより鋭敏な変色曲線を示す。

＊「キレート滴定」上野景平著（南江堂出版）より

取扱条件

規格
性状：	本品は、黒紫色粉末で水、エチルアルコール、メチルアルコールに溶けにくい。アルカリ溶液に溶ける。
アルカリ溶状：	試験適合
吸光度：	0.600～0.800 (555 nm付近)
強熱残分(硫酸塩)：	0.20％以下
鋭敏度：	試験適合
IRスペクトル：	試験適合

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比色試薬／金属指示薬 NN solution　同仁化学研究所

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NN solution

15 比色試薬／金属指示薬

NN solution

比色試薬／金属指示薬

比色試薬／金属指示薬

製品コード

N014　 NN solution
化学名

2-Hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-3-naphthoic acid, solution

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
50 ml	￥3,800	349-02061

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技術情報

NNを指示薬とする滴定の変色例

取扱条件

規格
性状：	本品は、赤紫色～青紫色液体である。
吸光度：	0.700 以上(580 nm)
鋭敏度：	試験適合

取扱条件
1.危険物第4類　アルコール類　危険等級Ⅱ, 2.安衛法,輸出令別表１輸出許可品目, 3.火気厳禁 4.保存方法：冷暗所保存,1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.安衛法,輸出令別表１輸出許可品目, 3.火気厳禁 4.保存方法：冷暗所保存
外国為替及び外国貿易法・輸出貿易管理令	要許可(別表１)
危険・有害シンボルマーク

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Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

脂質過酸化検出試薬

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ミトコンドリアスーパーオキサイド検出用蛍光色素

–Cellstain^®– MitoRed

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ミトコンドリアスーパーオキサイド検出用蛍光色素