細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所FerroOrange

04 細胞内蛍光プローブ

FerroOrange

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内鉄イオン測定試薬

  • 製品コード
    F374　 FerroOrange
  • CAS番号
    –
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 tube ￥14,600 342-09533
3 tubes ￥33,000 346-09531

※ 1 tube当たり24 μgのFerroOrangeが含まれます。

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所 日本語
    細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所
  • 取扱説明書 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所 English
    細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

技術情報

鉄検出試薬の選択

鉄検出時の実験方法および測定機器に応じて試薬を選択頂けます。

  FerroOrange Mito-FerroGreen
細胞内の局在 細胞内 ミトコンドリア
蛍光特性 λex : 543 nm、λem : 580 nm λex : 505 nm、λem : 535 nm
対応装置
（フィルター）		 蛍光顕微鏡、プレートリーダー （Cy3） 蛍光顕微鏡 （FITC、GFP）
測定対象 生細胞 生細胞
染色回数 24 μgで35 mm dish 17枚分染色可能
（終濃度 1 μmol/l使用時）		 50 μgで35 mm dish 5枚分染色可能
（終濃度 5 μmol/l使用時）

技術や使用製品に関する補足

【注目の研究・トピック】

 

Dojin News No.162

地球上の生命体の活動や疾患における鉄の重要性の再認識　(名古屋大学　豊國 伸哉 先生)

 

Dojin News No.172

二重機能性蛍光色素（H-V）を用いたフェロトーシスの解明

 

 

▶Dojin News(4回/年）バックナンバー、

配信のご登録はこちら

 

高感度だから内在性の鉄も検出できる

HeLa細胞を用いて、細胞内に内在するFe2+および鉄キレート試薬Bpy（2,2‘-bipyridine、終濃度：100 μmol/l）と鉄（硫酸アンモニウム鉄（II） 、終濃度：100 μmol/l）の添加有無により、細胞内のFe2+の変化をFerroOrangeにより確認しました。

蛍光顕微鏡によるイメージング
鉄キレート試薬を添加することで無刺激の細胞に比べ蛍光強度が低下したことから、細胞内には内在性のFe2+が存在することが確認できました。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

＜検出条件＞　Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm　　　　　　スケールバー：20 μm

 

プレートアッセイにより簡便に数値化
鉄キレート試薬および鉄の添加による細胞内のFe2+量の変化を数値データとして確認できました。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

＜検出条件＞　Ex: 543 nm、Em: 580 nm

*操作の詳細は　よくある質問「プレートリーダーでの測定方法を教えてください。」をご参照ください。

技術や使用製品に関する補足

ーフェロトーシス研究ー

 

実験例 : アミノ酸トランスポーター（xCT）阻害　

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

 

【関連試薬】

・過酸化脂質検出試薬

(Liperfluo)

 

・グルタミン酸測定キット

(Glutamate Assay Kit-WST)

 

・グルタチオン測定キット

(GSSG/GSH Quantification Kit)

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用（リンク）
1) 細胞
（HeLa）		 蛍光顕微鏡 K. Tomita, M. Fukumoto, K. Itoh, Y. Kuwahara, K. Igarashi, T. Nagasawa, M. Suzuki, A. Kurimasa and T. Sato, "MiR-7-5p is a key factor that controls radioresistance via intracellular Fe2+ content in clinically relevant radioresistant cells.", Biochem Biophys Res Commun.., 2019,doi: 10.1016/j.bbrc.2019.08.117.
2) 細胞
（ヒト内皮細胞株）		 蛍光顕微鏡 Y. Wang and M. Tang, "PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance", Environ. Pollut., 2019, 264, doi: 10.1016/j.envpol.2019.07.105.
3) 細胞
（MCF7-ADR）		 蛍光顕微鏡 S Guo, X Yao, Q Jiang, K Wang, Y Zhang, H. Peng, J. Tang and W. Yang , "Dihydroartemisinin-Loaded Magnetic Nanoparticles for Enhanced Chemodynamic Therapy", Front Pharmacol , 2020, 11, 226.
4) 細胞
（293T)		 蛍光顕微鏡 R. A. Weber, F. S. Yen, S.P.V. Nicholson, H. Alwaaseem, E.C. Bayraktar,M. Alam, R. C. Timson, K. La, M. Abu-Remaileh, H. Molina and K. Birsoy, "Maintaining Iron Homeostasis Is the Key Role of Lysosomal Acidity for Cell Proliferation", Mol. Cell, 2020, 77, 1-11.
5) 細胞
（SK-HEP-1)		 蛍光顕微鏡
（解析ソフトを使用し数値化)		 X. Li, T. Wang, X. Huang, Y. Li, T. Sun, S. Zang, K. Guan, Y. Xiong, J. Liu and H. Yuan , "Targeting ferroptosis alleviates methionine‐choline deficient (MCD)‐diet induced NASH by suppressing liver lipotoxicity", Liver Int., 2020,  doi:10.1111/liv.14428.
6) 細胞
（HepG2）

蛍光顕微鏡
マイクロプレートリーダー
イメージングサイトメーター

T. Hirayama, M. Niwa, S. Hirosawa and H. Nagasawa, "High-Throughput Screening for the Discovery of Iron Homeostasis Modulators Using an Extremely Sensitive Fluorescent Probe", ACS Sens., 2020,doi: 10.1021/acssensors.0c01445.
※論文で「RhoNox-4」と記載されている化合物が「FerroOrange」となります。

よくある質問

Q

FerroOrangeで染色する時の注意点を教えて下さい。

A

染色時は下記の点に注意の上、使用してください。

①FerroOrange染色後の培地交換
培地交換によりFerroOrangeが細胞外へ漏れ出てしまうため、染色後はそのまま観察してください。

②コントロール実験
鉄検出の実験条件を確認するため、鉄キレート試薬Bpy(2,2‘-bipyridine)または鉄（硫酸アンモニウム鉄(II) ）を添加したサンプルを準備し、FerroOrangeの蛍光強度の変化をみられることをお勧めします。

③細胞が染色されにくい（感度が低い）時の対応
細胞種によって染色度合いに差がみられる場合があります。
FerroOrange working solution濃度を推奨の1 μmol/lより高くして染色を行ってください。1-5 μmol/lの範囲での染色をお勧めします。

Q

プレートリーダーでの測定方法を教えてください。

A

下記の実験例を参考に測定ください。

＜測定サンプル＞
サンプルA：添加剤なし（HeLa細胞のみ）
サンプルB：鉄キレート試薬 2,2'-bipyridyl (Bpy) を添加したHeLa細胞
サンプルC：鉄（硫酸アンモニウム鉄）を添加したHeLa細胞

＜測定操作＞
1. 96ウェルマイクロブラックプレート（透明底）にHeLa細胞懸濁液100 μlを 10,000 cells/wellになるよう播種し、37℃インキュベータ（5% CO2）で一晩培養した。
2. サンプルCの細胞をMEM（FBS不含） 100 μlで3回洗浄した。
3. サンプルCのウェルに硫酸アンモニウム鉄(II)/MEM（FBS不含）溶液 100 μL(終濃度：100 μmol/l)を添加し、37℃インキュベーター（5% CO2）中で30分間静置した。
4. 全てのウェルの細胞をHBSS 100 μlで3回洗浄した。
5. サンプルAおよびCのウェルに1 μmol/l FerroOrange working solution 100 μlを添加し、サンプルBのウェルにFerroOrange (終濃度：1 μmol/l)及び Bpy (終濃度：100 μmol/l)を含むHBSS溶液 100 μlを添加し、37℃インキュベータ（5% CO2）で30分間インキュベートした。
6. プレートリーダーにて各サンプルの蛍光強度（Ex: 543 nm、Em: 580 nm）を検出した。

 

＜測定データ＞
細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

Q

推奨のフィルターを教えてください。

A

検出時の推奨フィルターは下記の通りです。
励起フィルター: 530-565 nm
蛍光フィルター: 570-620 nm

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品はアセトニトリル、メタノール、ジメチルスルホキシドに溶解する。
純度(HPLC)： 92.0％ 以上
蛍光スペクトル： 試験適合
取扱条件
1.保存方法：冷蔵,遮光
SDSダウンロード
細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

    マロンジアルデヒド測定キット

    MDA Assay Kit

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

    ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬

    Mito-FerroGreen

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange　同仁化学研究所

    過酸化脂質検出蛍光試薬

    Liperfluo