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PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) 兔单克隆抗体 PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) Rabbit mAb

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PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) 兔单克隆抗体

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) Rabbit mAb

详细描述：
PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total PD-L1 protein.Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein specific to the amino terminus of human PD-L1 protein.

应用范围：W IHC-P； 反应种属：Human； 灵敏度：Endogenous； MW (kDa)：40-50； Isotype：Rabbit IgG； 标记：无标记。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
15165S PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) 兔单克隆抗体 100µl 咨询客服

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所Extracellular OCR Plate Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Extracellular OCR Plate Assay Kit

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • ミトコンドリア関連
  • 細胞内代謝

酸素消費速度プレートアッセイキット

  • 細胞のOCRを汎用の蛍光プレートリーダーで測定できる
  • 専用の装置や培地、プレートは不要
  • 必要な試薬とOCR自動算出シートを準備
  • 製品コード
    E297　 Extracellular OCR Plate Assay Kit
容　量 メーカー希望
小売価格
100 tests ￥48,000
キット内容
100 tests ・Oxygen Probe
・Mineral Oil　		 110 µl×1
10 ml×1

  • 酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所
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マニュアル

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    酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所
  • 取扱説明書 酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所 English
    酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所
  • OCR計算シート
    酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

ミネラルオイルの入れ方

技術情報

キットの原理

Extracellular OCR Plate Assay Kitには、培地中の酸素濃度が低下するとりん光強度が高くなる特性を持つOxygen Probeと、空気中の酸素流入を遮断するためのMineral Oilを同梱しています。
細胞外の酸素濃度に応じたりん光強度を蛍光マイクロプレートリーダーで測定後、Stern-Volmerの関係式より細胞のOCRを算出(自動計算シート)します。

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

※本製品は、群馬大学 吉原 利忠 先生のご指導の下、製品化しました。

よくある質問

Q

１キットあたりの測定可能なサンプル数の目安を教えてください。

A

1つの細胞種で同一細胞数にて実験する場合24サンプル測定可能です。

*２種類以上の細胞種や複数の細胞数を実験に用いる場合は、別途BlankとControlを準備する必要があり測定可能なサンプル数が変わります。詳細については、取扱説明書に実験系に応じたプレートレイアウトの例を記載しておりますのでご参照ください。
 

Q

浮遊細胞の実験例を教えてください。

A

Jurkat細胞の実験例をご案内します。
＜操作＞
(1)Blank 3としてJurkat細胞(3.0×106 cells/ml)をRPMI培地に懸濁し、ControlやSampleとしてJurkat細胞(3.0×106 cells/ml)をworking solutionに懸濁したものを用意し、96穴黒色クリアボトムマイクロプレートに100 µl (300,000 cells/well)ずつ播種した。
(2)Blank 1にはRPMI培地を100 µl、Blank 2にはworking solutionを100 µl添加した。
(3)予め37℃に設定しておいたプレートリーダーの中にマイクロプレートを入れ、30分間インキュベーションした。
(4)Blank 1, Blank 2, Blank 3, ControlにRPMI培地を10 µlずつ添加した。
(5)Sampleには、RPMI培地で希釈したSample solution(AntimycinもしくはFCCP溶液)を10 µlずつ添加した。
(6)Sample solution添加後は、直ちにMineral Oilを1滴ずつ各ウェルに滴下した。
(7)37℃に設定しておいたプレートリーダーの中にマイクロプレートを入れ、5分間インキュベーションした。
(8)蛍光プレートリーダーを用いて強度をタイムコースで10分毎に200分間測定した(Ex: 500 nm, Em: 650 nm, Bottomリーディング)。
(9)ダウンロードした専用の計算シートに得られた強度の値を入力し、OCR値を算出した。 

各ウェルに必要なサンプル及び試薬の添加量
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＜結果＞

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所
         
 

Q

本キットのOCR算出方法を教えてください。

A

専用の計算シートをダウンロードし、以下の手順でOCRを算出します。

酸素消費速度プレートアッセイキット Extracellular OCR Plate Assay Kit　同仁化学研究所

＜OCR算出手順の概要＞

(1)OCR測定で得られた強度の値を計算シートに入力すると、Stern-Volmerの式より酸素量(nmol)が自動的に算出される。
(2)時間(min)と酸素量(nmol)のグラフより、測定した全ての条件において直線性の得られる範囲を確認する。
(3)2)で確認した時間(min)と酸素量(nmol)の範囲における傾きを算出する。
(4)3)で算出した傾きより、OCR(pmol/min)を算出する。
詳細は取扱説明書の"解析"をご参照ください。

Q

Mineral Oilに細胞毒性はありませんか。

A

Mineral oilを添加した細胞においてCell Counting Kit-8による細胞毒性測定を行ったところ、毒性は確認されませんでした。

(参考)

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Q

OCR測定後の細胞数を計測する方法を教えてください。

A

核染色剤(Hoechst 33342)を用い、ウェルあたりの細胞数を算出した実験例をお示しします。

＜操作＞
(1)OCR測定用ウェルに細胞を播種した。
(2)段階希釈した細胞を検量線作成用ウェルに播種した。
(3)取扱説明書に従いOCRを測定した。
(4)検量線作成用ウェルに培地を10 µl/wellずつ添加した(液量をOCR測定用ウェルと110 µl/wellに揃えるため)。
(5)培地で希釈したHoechst 33342溶液(10 µg/ml)を全てのウェルに100 µl/wellずつ添加した。
 ※OCR測定用ウェルはオイル上から添加した。
(6)37℃、30分間インキュベートした。
(7)蛍光プレートリーダーにて測定した(Ex: 350 nm , Em: 461 nm )。
(8)検量線(X軸：細胞数、Y軸：蛍光強度)を作成し、OCR測定用ウェルの細胞数を算出した。

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Q

Working solutionは保存できますか。

A

working solutionは保存できません。用時調製してください。

Q

Oxygen ProbeやMineral Oilは凍結融解を繰り返しても測定に影響しませんか。

A

 Oxygen ProbeおよびMineral Oilは凍結融解を繰り返した場合も測定に影響がないことを確認しています。

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取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷凍,遮光 2.安衛法
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MITO-ID Extracellular pH Sensor Probe 细胞外pH检测探针 品牌：Enzo

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品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：+4℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51048

 – 1 Kit –

MITO-ID Extracellular pH Sensor Probe 细胞外pH检测探针 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 pH敏感型磷光探针可用于监测细胞外酸性，而胞外酸性往往是由线粒体毒性致使糖酵解途径增强而产生。
pH敏感性探针信号随着酸性增加而增强。
使用标准荧光酶标仪即可检测（Ex/Em 340/615nm),可用于高通量筛选。
可用于完整细胞（贴壁和悬浮），打孔细胞，3D培养和组织的检测。
可与Mito-ID® 胞外氧气敏感型探针试剂盒(高灵敏度) (产品货号ENZ-51045)配套使用，实时监测线粒体呼吸和糖酵解，分析细胞代谢表型和信号通道的转移。

MITO-ID Extracellular O2 Sensor kit 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 品牌：Enzo

发表于由

品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51044-K500

 – 500 Reactions –

MITO-ID Extracellular O2 Sensor kit 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 氧气敏感型磷光探针可用氧气消耗量的检测。
氧气的消耗引起探针磷光信号的增强。
使用标准的酶标仪就可进行检测。
同时也提供用于胞内氧气检测的渗透性探针。
用于线粒体功能障碍和药物毒理检测。
可用于高通量筛选和实时检测。
试剂盒组分：Mito-ID® 胞外氧气敏感型探针，
Mito-ID® 油, 瓶。

MITO-ID Extracellular O2 Sensor Kit (High Sensitivity) 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 （高灵敏度） 品牌：Enzo

发表于由

品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51045-K100

 – 100 Reactions –

MITO-ID Extracellular O2 Sensor Kit (High Sensitivity) 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 （高灵敏度） 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 氧气敏感型磷光探针可用于培养细胞（贴壁和悬浮），，打孔细胞，3D培养的检测。
氧气的消耗引起探针磷光信号的增强。
使用标准的酶标仪就可进行检测。
与 Mito-ID® 胞外pH敏感型探针（ENZ-51048)同时使用，可实时监测线粒体呼吸和糖酵解，分析细胞的代谢表型，以及病理状态下的2条通道转移。
与Mito-ID® 线粒体膜电位毒理试剂盒(ENZ-51019)配套使用，可以确定线粒体特定的毒理效用。

MITO-ID Extracellular O2 Sensor Kit (High Sensitivity) 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 （高灵敏度） 品牌：Enzo

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品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51045-K500

 – 1 kit –

MITO-ID Extracellular O2 Sensor Kit (High Sensitivity) 线粒体-ID 胞外 O2 传感器 试剂盒 （高灵敏度） 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 氧气敏感型磷光探针可用于培养细胞（贴壁和悬浮），打孔细胞，3D培养的检测。
氧气的消耗引起探针磷光信号的增强。
使用标准的酶标仪就可进行检测。
与 Mito-ID® 胞外pH敏感型探针（ENZ-51048)同时使用，可实时监测线粒体呼吸和糖酵解，分析细胞的代谢表型，以及病理状态下的2条通道转移。
与Mito-ID® 线粒体膜电位毒理试剂盒(ENZ-51019)配套使用，可以确定线粒体特定的毒理效用。

MITO-ID Extracellular O2 Sensor kit 线粒体-ID 胞外 O2 传感器试剂盒 品牌：Enzo

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品牌：Enzo
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

ENZ-51044-K100

 – 100 Reactions –

MITO-ID Extracellular O2 Sensor kit 线粒体-ID 胞外 O2 传感器试剂盒 品牌：Enzo

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 氧气敏感型磷光探针可用氧气消耗量的检测。
氧气的消耗引起探针磷光信号的增强。
使用标准的酶标仪就可进行检测。
同时也提供用于胞内氧气检测的渗透性探针。
用于线粒体功能障碍和药物毒理检测。
可用于高通量筛选和实时检测。
试剂盒组分：Mito-ID® 胞外氧气敏感型探针，
Mito-ID® 油, 瓶。

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Alexa Fluor® 647 偶联) PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

发表于由

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Alexa Fluor® 647 偶联)

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

详细描述：

应用范围：IF-IC F； 反应种属：Human； 标记：Alexa Fluor® 647。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
41726S PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Alexa Fluor® 647 偶联) 100µl 咨询客服

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Pacific Blue™ 偶联) PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)

发表于由

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Pacific Blue™ 偶联)

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)

详细描述：

应用范围：F； 反应种属：Human； 标记：Pacific Blue™。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
55919S PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (Pacific Blue™ 偶联) 100µl 咨询客服

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (PE 偶联) PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (PE Conjugate)

发表于由

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (PE 偶联)

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (PE Conjugate)

详细描述：

应用范围：F； 反应种属：Human； 标记：PE。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
71391S PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 (PE 偶联) 100µl 咨询客服

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb

发表于由

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体

PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb

详细描述：

应用范围：IF-IC F； 反应种属：Human； 标记：无标记。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
86744S PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) 兔单克隆抗体 100µl 咨询客服

Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit酶试剂盒Takara

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上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635741 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Mini) 20 Minipreps ￥7,005 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Clontech 635748 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi) 8 Maxipreps ￥9,640 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
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■ 产品概述
本制品是基于Capturem新型膜技术的一次性使用离心柱，可在30 min内实现血浆等多种生物体液样品中细胞外囊泡（EVs）的简单快速提取。其基本原理是根据EVs的生化性质，选择与其特异性结合的凝集素（非抗体）固定于Capturem™膜上，进而对EVs进行提取，产物纯度高、污染少。
 
■ 产品特点
· 适用范围广— 可应用于全血、血浆、血清、唾液、尿液、脑脊液、母乳、细胞培养上清液等多种生物体液样品中的EVs提取
· 快速、重复性好– 30 min内即可从最高850 μl（Mini）或24 ml（Maxi）生物体液样品中快速提取EVs，不同操作者也可获得具有重复性的EVs收量
· 收量高— EVs最高收量可达1010（Mini）或1011（Maxi），可获得足够的exosomal RNA应用于下游的RT-qPCR、 NGS等研究
· 纯度高— 提取的EVs经Western Blot检测表达exosome蛋白质，而不表达nonexosomal污染蛋白质，如calnexin和 albumin
· 完整性好– 基于凝集素的提取原理，EVs不易被破坏，TEM下观察呈经典形态
· 简单易用— 试剂盒组分配备齐全，包含一次性的预清洁柱，一次性的离心柱，以及平衡、洗涤和洗脱缓冲液，且经过优化，操作简便
 
■ 操作流程
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
注：1. *过滤步骤使用100-kDa MWCO的过滤装置，过滤时间取决于样品的类型和体积。
    2. 本制品最大载样量约为1010 EVs/column（Mini）或1011 EVs/column（Maxi），多次上样收量也不会超过最大值。
 
■ 实验例
 
实验例 1
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
与超速离心法相比，本制品分离得到的EVs浓度和纯度更高。分别使用本制品和超速离心法从500 μl血浆样品中分离EVs，进行三次重复性实验，使用Nanoparticle tracking analysis (NTA) 检测。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。结果显示，本制品提取的EVs平均粒径大小为81 nm（D90=110 nm），超速离心法提取的EVs平均粒径大小为135 nm（D90=203 nm）。上图可见，使用本制品提取的EVs具有更窄的粒径分布范围，且稳定性更好。
 
实验例 2
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
使用本制品成功地从不同生物体液样品中提取EVs。上图NTA结果显示，本制品可以应用于多种生物体液样品的EVs提取，如母乳、唾液、脑脊液、血清、尿液、条件培养基。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。
 
实验例 3
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
对使用本制品与超速离心法提取的EVs中的目的蛋白质进行Western blot分析。结果显示，与超速离心法相比，本制品提取的EVs包含更多的exosome特异性标记物CD63、CD9和Alix，而non-exosome蛋白质（calnexin和albumin）含量较少。因此，本制品提取的EVs纯度更高、污染蛋白质更少。
 
实验例 4
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
与超速离心法相比，使用本制品提取的EVs，可获得更高的RNA收量。使用Capturem EV kit（Mini）从50 μl血浆中提取的EVs可以获得约100 pg/μl的RNA，而使用超速离心法，至少需要300 μl血浆才能获得同样收量的RNA。而使用Capturem EV kit（Maxi）从大量样本中提取的EVs，也可以获得稳定的RNA收量。
 
实验例 5
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
使用本制品提取的EVs，可获得足够的RNA用于下游RT-qPCR实验。本实验例是对Capturem分离的EVs进一步提取RNA再进行miRNA筛选。 首先使用PrimeScript RT Master Mix（Perfect Real Time）将RNA反转录为cDNA，然后使用Takara PreAmp Master Mix进行预扩增。应用SmartChip Real Time PCR系统对所得cDNA库进行1,200个miRNA靶标筛选，结果检测到108个miRNA，对表达量前8的miRNA进行了芯片外验证，结果显示miR-548w，miR-496，miR-744-3p，miR-660-3，miR-3167和miR-376A-3p在分离的EVs样品中拷贝数最高，其中很多microRNA已被验证过在血浆来源的EVs中表达量较高。本实验例表明，Capturem分离的EVs包含足够的RNA可用于下游的RT-qPCR实验。
 
实验例 6
Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
使用本制品提取的EVs，可获得足够的RNA用于下游NGS实验。以本制品提取的EVs中的RNA为样本，使用SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 – Pico Input Mammalian进行NGS建库。Bioanalyzer trace表明构建了良好且统一的文库，后续的测序表明，构建得到的NGS文库基因覆盖度良好。
 
 
产品详情请点击：Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit
 
 

页面更新：2020-06-01 15:04:35