Stellar化学转化感受态细胞酶试剂盒Takara

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Stellar化学转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 636763 Stellar Competent Cells 10 x 100 μl ¥2,315 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636766 Stellar Competent Cells 50 x 100 μl ¥8,189 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636767 Stellar Competent Cells (96-well plate) 96 x 20 μl ¥5,518 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636764 Stellar Competent Cells (dam-/dcm-) 10 transformations ¥2,532 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
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Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
 
Stellar化学转化感受态细胞
Stellar化学转化感受态细胞  
Stellar化学转化感受态细胞
 
 
Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系,具有很高的转化效率,可用于多种应用:cDNA或基因组DNA文库的制备,长片段基因组文库的构建,亚克隆,甚至甲基化DNA的克隆。Stellar Competent Cells缺失切断外源甲基化DNA的基因簇(mrr-hsdRMS-mcrBC and mcrA),所以可用于克隆甲基化DNA。 转化包含lacZ alpha基因的载体时,也可以使用Stellar Competent Cells进行蓝白筛选,例如alpha互补。 Stellar Competent Cells是Clontech's In-Fusion Cloning Kits配套使用的理想选择。
 
Stellar Competent Cells (dam/dcm)
Stellar Competent Cells (dam/dcm)属于E. coli HST04细胞系,缺失了甲基化DNA所必须的遗传因子(damdcm)。通常被dam或dcm甲基化而抑制的限制酶可以切断由该产品制备的质粒。
 
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Stellar电转化感受态细胞酶试剂盒Takara

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Stellar电转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 636765 Stellar Electrocompetent Cells 10 transformations ¥3,273 Stellar电转化感受态细胞 Stellar电转化感受态细胞 Stellar电转化感受态细胞
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Stellar Electrocompetent Cells具有高转化效率,适合于多种生物学应用,如cDNA文库构建或基因bank构建。可利用该感受态细胞的β-半乳糖苷酶的α互补特性进行重组克隆的蓝白斑筛选。该细胞株可代替DH10B使用,recA1基因和endA1基因的变异降低质粒DNA突变和被降解的风险。该产品也可用于基因组或cDNA文库的构建。
 
 
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In-Fusion Ready荧光蛋白质载体酶试剂盒Takara

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In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632498 pDsRed-Monomer-N In-Fusion Ready Vector 1 μg ¥5,124 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
Clontech 632499 pDsRed-Monomer-C In-Fusion Ready Vector 1 μg ¥5,124 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
Clontech 632500 pAcGFP1-C In-Fusion Ready Vector 1 μg ¥5,124 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
Clontech 632501 pAcGFP1-N In-Fusion Ready Vector 1 μg ¥5,124 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体 In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
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注意:购买以上产品时,需要填写专利确认书
 
为了简化荧光蛋白质的构建和检测,我们为您提供线性的DsRed-Monomer-N1/C1和AcGFP1-N1/C1克隆载体,可用于快速高效In-Fusion克隆。仅需使用合适的基因特异性引物,带有15个与线性载体末端同源序列,PCR扩增目的基因。一个插入片段可以直接被克隆到这四个载体中的任一个。节省时间,可在N端或C端平行克隆不同颜色的融合蛋白质。这对于了解目的蛋白质是否可以作为N端或C端融合蛋白质的实验很重要。
 
产品特点
· 灵活克隆,使用一个PCR产物,可选择DsRed-Monomer-N1/C1 或 AcGFP-N1/C1
· 可灵活检测蛋白质作为N端或C端融合的可行性
· 已线性化,轻松用于In-Fusion克隆
 
 
产品详情请点击:
632498、632499:In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
632500、632501:In-Fusion Ready荧光蛋白质载体
 
 

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PCR产物纯化-Cloning Enhancer酶试剂盒Takara

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PCR产物纯化-Cloning Enhancer
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 639615 Cloning Enhancer 200 μl ¥3,883 PCR产物纯化-Cloning Enhancer PCR产物纯化-Cloning Enhancer PCR产物纯化-Cloning Enhancer
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Cloning Enhancer用于克隆前PCR产物的纯化,消除背景质粒DNA和PCR体系中杂质。Cloning Enhancer处理可大大增加重组克隆的数量。Cloning Enhancer与PCR反应液在同一tube进行反应,所以可降低胶纯化导致的紫外损伤或切口生成,无需单独的纯化流程,也就降低了纯化时PCR产物的损失。
 
产品特点
· 无需纯化,方便的PCR产物纯化方式。
· 单管反应,避免样品损失。
· 温和处理流程,不产生DNA损伤或切口。
· 与不纯化插入片段相比,处理后效率可提高5倍。
 
 
产品详情请点击:PCR产物纯化-Cloning Enhancer
 
 

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突变克隆试剂盒酶试剂盒Takara

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突变克隆试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 638909 In-Fusion HD Cloning Plus 10 Rxns ¥3,788 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638910 In-Fusion HD Cloning Plus 50 Rxns ¥15,839 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638911 In-Fusion HD Cloning Plus 100 Rxns ¥27,272 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638912 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 8 Rxns ¥3,795 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638913 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 24 Rxns ¥9,573 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638915 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus 96 Rxns ¥19,758 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638916 In-Fusion HD Cloning Plus CE 10 Rxns ¥4,232 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638917 In-Fusion HD Cloning Plus CE 50 Rxns ¥16,630 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638918 In-Fusion HD Cloning Plus CE 100 Rxns ¥26,058 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638920 In-Fusion HD Cloning Plus 96 Rxns ¥26,029 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638956 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 96 Rxns ¥12,295 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638955 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 32 Rxns ¥5,352 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638954 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 8 Rxns ¥1,745 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638947 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 10 Rxns ¥1,155
¥866
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638948 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 50 Rxns ¥5,204
¥3,903
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638949 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 250 Rxns ¥20,747
¥15,560
突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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突变克隆试剂盒   突变克隆试剂盒
   
  突变克隆试剂盒  
   
  突变克隆试剂盒  
   
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  突变克隆试剂盒  
 
 
使用In-Fusion Cloning Kits可以进行PCR方法的DNA定点突变。一个精简的反应流程,就可以完成增加、删除或替换DNA区段,插入点突变,插入限制性位点等实验。
In-Fusion方法通过设计引物将突变(碱基变化、删除、增加)引入。以环形质粒作为模板,通过反向PCR即可生成带有突变区域的线性载体。这个线性载体可以通过In-Fusion再进行环化。试剂盒已经附带了高效感受态细胞。
 
产品特点
· 高效突变:体外定点突变,效率≥90%。
· 多用途:一个体系,可以进行替换、增加或删除最多12个碱基。
· 更少步骤:一个PCR反应即可;无需纯化或PCR产物的体外消化;无需连接。
· 方便性:试剂盒已附带高效感受态细胞。
 
突变克隆试剂盒点击图片查看相关资
 
 
产品详情请点击:突变克隆试剂盒
 
 

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cDNA文库构建酶试剂盒Takara

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cDNA文库构建
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634933 In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit 10 Rxns ¥18,158 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 634901 SMART cDNA Library Construction Kit Each ¥13,901 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 635003 pEXP-Lib Vector 20 μg ¥4,518 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 635002 pRetro-Lib Vector 20 μg ¥4,518 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
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由于产品升级,从即日起,您订购的In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit(634933)中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639649)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638948),该组分数量保持不变,请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件,请邮件联络zhukx@takarabiomed.com.cn
 
 
Clontech提供利用SMART技术构建全长cDNA的cDNA文库构建试剂盒。
 
创建长插入片段文库
SMART cDNA Library Construction Kit用于向噬菌体TriplEx2载体上克隆全长cDNA。试剂盒结合了RNA模板5’末端转换机制,即SMART技术,用于cDNA扩增,无需adaptor连接,即可定向克隆至TriplEx2载体。试剂盒提供了两种独立的流程,可以根据您的起始材料选择其中一种。起始材料有限可以使用长距离PCR(LD-PCR)方法,起始total RNA的量可以低至50 ng。另一种流程适用于起始材料充足的情况,例如起始材料是多于1 μg的 poly A+ RNA。与传统方法构建的cDNA文库或其他方法合成的全长cDNA比较,SMART文库包含了更大比例的全长克隆。所以,SMART cDNA文库分离出的克隆包含了对应的mRNA全部5’非翻译区的序列。
 
富集全长cDNA
SMART cDNA合成技术保证了cDNA合成连续不间断,得到的cDNA很好地反映了5’端的序列。
 
精简的流程更节省时间
由于高效的cDNA合成和克隆过程,In-Fusion SMARTer Library Construction流程比其他文库构建方法的步骤更少。全过程仅需三个酶,而其他方法需要6-8个酶参与反应。SMART(er) cDNA合成流程是用户友好的且更直接的,无需连接接头或加尾步骤。处理RNA样本的步骤少,从而降低了珍贵的RNA被降解的风险。
 
向任意载体插入您的文库
试剂盒结合In-Fusion克隆方法,仅需一个30分钟的反应即可把您的SMARTer cDNA文库克隆到In-Fusion SMARTer试剂盒附带的pSMART2IF或pSMART2IFD线性载体上。更重要的是,因为In-Fusion克隆是依赖于DNA片段末端15个互补碱基的,可以使用In-Fusion试剂盒准确地将您的SMARTer cDNA转移到任意线性载体上。如果您想把文库克隆到自己的表达载体上做功能分析,只需简单地通过反向PCR来扩增您的载体,生成线性载体时使用的引物需要与SMARTer cDNA末端互补。引物必须有两个特点:引物5’端包含15个碱基,这15个碱基与连接载体的DNA片段末端的15个碱基相互补;引物3’端必须包含与目标载体特异性结合的序列。
 
产品详情请点击:cDNA文库构建
 
 

页面更新:2021-11-30 16:50:19

SMART 5’ RACE & 3’ RACE酶试剂盒Takara

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SMART 5’ RACE & 3’ RACE
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634913 Marathon cDNA Amplification Kit 5 cDNA & 100 PCR Rxns ¥9,800 SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634858 SMARTer RACE 5’/3’ Kit 10 Rxns ¥8,143
¥6,514
SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634859 SMARTer RACE 5’/3’ Kit 20 Rxns ¥15,472
¥12,378
SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634499 SMARTer RACE 5’/3’ Kit (no competent cells) 20 Rxns ¥12,331
¥9,865
SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634922 Universal Primer Mix 100 Rxns ¥1,709
¥1,367
SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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由于产品升级,从即日起,您订购的SMARTer RACE试剂盒(634858/59)中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639648)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638947),该组分数量保持不变,请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件,请邮件联络zhukx@takarabiomed.com.cn
 
 
■ 制品说明
RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 是一种获得RNA转录本全长序列的技术。利用RACE技术可以根据转录本中的一小段已知序列获得转录本的5′端 (5′RACE-PCR) 或3′端 (3′RACE-PCR) 序列。
SMARTer RACE 5’/3′ Kit(Code No. 634858/59)是优化升级的试剂盒,具有更高的灵敏、更低的背景和更高的特异性。
采用SMART技术,以poly A+ 或总RNA为起始,合成的第一链cDNA可直接进行5′和3′RACE-PCR,不需要adaptor连接等步骤,整个流程更快、更易操作。SMART RACE 还结合了强有力的抑制性PCR,显著地减少了RACE实验中的弥散现象,是获得全长cDNA的有效方法。
SMARTer RACE 5’/3′ Kit(Code No. 634858/59)包含了除基因特异性引物外的所有组分,流程更精简。使用这一个试剂盒,即可以在8小时内完成第一链cDNA合成到克隆RACE片段的流程,并在第二天就可以挑取克隆进行分析。试剂盒包含了性能优良的SeqAmp DNA Polymerase,对于长片段或高GC含量等高难度片段的扩增也适用;NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit用于纯化PCR产物; 高效无缝克隆In-Fusion Snap Assembly Master Mix;高效率感受态细胞Stellar Competent Cells*
* SMARTer® RACE 5’/3′ Kit (no competent cells) (634499)为不含感受态细胞的包装形式,便于长时间存放,组分的选择空间更大,实验搭配更灵活。另有高转化效率的感受态细胞单品Stellar化学转化感受态细胞供您选择,满足多种实验需求。
SMART RACE具有以下优势:
1. 更便捷的操作
采用SMARTer RACE 技术,可以在一管内完成两步反应。只需很少的操作RNA和新合成cDNA的步骤,整个实验只需4小时。
2. 只需10 ng总RNA
SMARTer RACE 尤其适用于起始材料有限的情况,如活体组织检查样本、组织分离术样本、针吸活检样本、胚胎组织及病变组织样本等。优化的实验操作,显著地降低了非特异性扩增,这对有限的实验材料尤为重要。
3. 富集具有完整5′端序列的cDNA
专门设计的SMARTer Oligo 优先与新合成的cDNA 的5′端结合,可以富集具有完整5′端序列的cDNA,因此,可以获得全长基因序列或上游调控序列。
4. 不需要RNA预处理
SMARTer RACE方法不需要RNA预处理。可以采用总RNA,甚至是含有基因组DNA的RNA材料进行实验。
 
■ 制品特点
1. 低背景的完整RACE试剂盒
2. SMARTer技术合成完整的5′和3′端序列
3. 合成的第一链cDNA直接用于RACE PCR,无需接头连接
4. 只需10 ng总RNA
 
产品详情请点击:SMART 5’ RACE & 3’ RACE
 
 

页面更新:2021-12-25 08:56:33

SeqAmp DNA Polymerase酶试剂盒Takara

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SeqAmp DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 638504 SeqAmp DNA Polymerase 50 Rxns ¥1,446 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
Clontech 638509 SeqAmp DNA Polymerase 200 Rxns ¥4,051 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
Clontech 638526 SeqAmp CB PCR Buffer 50 Rxns ¥361 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
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SeqAmp DNA Polymerase是hot start型高保真酶,非常适合与各种SMARTer试剂盒一起使用进行下一代测序。该PCR酶已经过优化,即使含有高GC或高AT区域的困难模板,也证实了可以进行很好的扩增。
 
 
产品详情请点击:SeqAmp DNA Polymerase
 
 

页面更新:2020-08-03 10:01:45

ExpressHyb杂交液酶试剂盒Takara

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ExpressHyb杂交液
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 636833 ExpressHyb Hybridization Solution 1 L ¥9,459 ExpressHyb杂交液 ExpressHyb杂交液 ExpressHyb杂交液
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■ 制品说明
本制品可以减少杂交次数,同时提高灵敏度(Yang and Kain 1995)。其他杂交溶液通常需要过夜孵育,导致高背景。本制品可以有效地用于放射性或非放射性标记DNA或寡聚核苷酸探针或核糖核酸探针。
ExpressHyb杂交液是一种预配制的水溶液,比其他市售杂交溶液粘度小,可在室温下保存。可用于放射性同位素、比色法和化学发光检测系统中的Northern杂交、Southern杂交和菌落杂交操作流程。
 
■ 制品应用
1. 适用于各种杂交应用——Northern blots、Southern blots、dot blots、癌症和疾病阵列分析和菌落杂交。
2. 优化用于RNA blots和cDNA blots。
 
■ 保存
室温
 
■ 参考文献
Yang, T. T. & Kain, S. R. Fast hybridization solution for the detection of immobilized nucleic acids. Biotechniques 18, 498-503 (1995).
 
 
产品详情请点击:ExpressHyb杂交液
 
 

页面更新:2020-12-28 16:31:40

随机突变试剂盒酶试剂盒Takara

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随机突变试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 630703 Diversify PCR Random Mutagenesis Kit 30 Rxns ¥9,178 随机突变试剂盒 随机突变试剂盒 随机突变试剂盒
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Code No. 产品名称
630703   Diversify PCR Random Mutagenesis Kit
 
Diversify PCR Random Mutagenesis Kit采用无毒方法可突变长度至多4.0 kb的序列。 该试剂盒应用广泛,可用于所有的突变而不产生突变热点。
 
产品特点
· 可控的随机突变。可用于分析蛋白质功能
· 准确的控制突变率
· 无突变热点
· 获取所有的碱基替换
 
 
产品详情请点击:随机突变试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-05 11:35:31

TaKaRa MutanBEST Kit酶试剂盒Takara

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TaKaRa MutanBEST Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R401 TaKaRa MutanBEST Kit 20 Rxns ¥1,277 TaKaRa MutanBEST Kit TaKaRa MutanBEST Kit TaKaRa MutanBEST Kit
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■ 制品内容 (20 次量)
Pyrobest DNA Polymerase (5 U/μl) 15 μl
10×Pyrobest Buffer II 200 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 180 μl
10×Blunting Kination Buffer 50 μl
Blunting Kination Enzyme Mix 25 μl
Ligation Solution I* 150 μl
 
* Ligation Solution I 即为Ligation Kit Ver.2.1 的一种组份。
 
 
■ 制品说明
本制品是利用PCR技术进行定点突变操作的试剂盒。其原理是利用导入变异点的引物进行PCR反应后,对PCR产物进行末端平滑化及5’磷酸 (P) 化处理,再用高效连接试剂Ligation Solution I进行自身连接 (环化反应),然后转化、提取突变体DNA。
本试剂盒的原理十分简单,但Taq酶在PCR过程中的错配率限制了这一技术的应用。现在,Takara的Pyrobest DNA Polymerase使这一技术得到了很好的发挥。Pyrobest DNA Polymerase不仅具有很高的保真性(Fidelity),并且和TaKaRa Taq具有同样的扩增效率。与其他突变试剂盒相比,本试剂盒的特点是操作方便、简单,只需一天时间便可完成整个操作,并且不受载体、宿主菌的限制。
 
保存
-20℃。
 
■ TaKaRa MutanBEST Kit原理
试剂盒原理见下图,全套操作约需5小时,简单说明如下。
1. 设计一对5’端邻接,3’端方向相反的引物用以导入变异点。
2. 进行PCR扩增 (使用高保真DNA聚合酶Pyrobest DNA Polymerase)。
3. PCR片段的末端平滑及5’末端磷酸化反应 (在同一反应体系内进行,反应只需10分钟)。
4. 自身连接反应 (使用本试剂盒中的DNA高效连接液Ligation Solution I,连接反应只需30 分钟至1小时)。
5. 质粒DNA转化,挑选变异体。
 
TaKaRa MutanBEST Kit
 
注意事项
1. 当载体与插入的DNA片段的总长度小于5 kb时,使用本试剂盒较为合适;如果载体与插入DNA 片段长度太长时,不推荐使用本试剂盒。
2. PCR反应后的DNA片段应进行切胶回收纯化,然后再进行自身连接反应,这样可以提高突变成功率。
3. Ligation Solution I请于冰中融解,使用前混匀。应避免多次反复冻融。
4. 连接转化效率低时,请试用下述方法进行改进。
① 确认感受态细胞的转化效率。
② 延长连接反应时间至过夜反应。
 
 

页面更新:2020-01-16 13:49:56

Genome Walking Kit酶试剂盒Takara

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Genome Walking Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6108 Genome Walking Kit 10 Rxns ¥1,502 Genome Walking Kit Genome Walking Kit Genome Walking Kit
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■ 制品内容 (10 次量)
AP1 Primer (100 pmol/μl ) 30 μl
AP2 Primer (100 pmol/μl ) 30 μl
AP3 Primer (100 pmol/μl ) 30 μl
AP4 Primer (100 pmol/μl ) 50 μl
Control Template (100 ng/μl )*1 10 μl
Control Specific Primer SP1 (10 pmol/μl )*2 10 μl
Control Specific Primer SP2 (10 pmol/μl )*2 10 μl
Control Specific Primer SP3 (10 pmol/μl )*2 10 μl
TaKaRa LA Taq (5 U/μl ) 25 μl
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+plus) 1 ml
dNTP Mixture (2.5 mM each) 400 μl
6 × Loading Buffer 1 ml
 
*1 Control Template 是Human HL60来源的基因组DNA。
*2 Control Specific Primers是根据人基因组中的ALDOA基因设计的特异性引物。
 
■ 制品说明
染色体步移技术 (Genome Walking) 是一种重要的分子生物学研究技术,使用这种技术可以有效获取与已知序列相邻的未知序列。染色体步移技术主要有以下几方面的应用:
1. 根据已知的基因或分子标记连续步移,获取人、动物和植物的重要调控基因,可以用于研究结构基因的表达调控。如分离克隆启动子并对其功能进行研究;
2. 步查获取新物种中基因的非保守区域,从而获得完整的基因序列;
3. 鉴定T-DNA或转座子的插入位点,鉴定基因枪转基因法等转基因技术所导致的外源基因的插入位点等;
4. 用于染色体测序工作中的空隙填补,获得完整的基因组序列;
5. 用于人工染色体PAC、YAC和BAC的片段搭接。
对于基因组测序已经完成的少数物种 (如人、小鼠、线虫、水稻、拟南芥等) 来说,可以轻松地从数据库中找到某物种已知序列的侧翼序列。但是,对于大多数生物而言,在不了解它们的基因组序列以前,想要知道一个已知区域两侧的DNA序列,只能采用染色体步移技术。
以PCR技术为基础的染色体步移的主要问题是在预先不了解未知区域序列信息的情况下,如何设计两个特异性引物来扩增未知区域。而传统的染色体步移方法,如:反向PCR法、连接接头法等,都有操作复杂、非特异性扩增、连接效率低等弊端。
本试剂盒是一种根据已知基因组DNA序列,高效获取侧翼未知序列的试剂盒。本试剂盒是在TAIL-PCR (thermal asymmetric interlaced PCR,即交错热不对称PCR)的基础上进行改进的。相对于其它传统方法,本试剂盒具有高效、简便、特异性高、灵敏度高、一次性获得的未知序列较长等特点。其主要原理是根据已知DNA序列,分别设计三条同向且退火温度较高的特异性引物(SP Primer),与试剂盒中提供的四种经过特别设计的退火温度较低的兼并引物,即AP1、AP2、AP3、AP4进行热不对称PCR反应。通常情况下,其中至少有一种兼并引物可以与特异性引物之间利用退火温度的差异进行热不对称PCR反应,通过三次巢式PCR反应即可获取已知序列的侧翼序列。如果一次实验获取的长度不能满足实验要求时,还可以根据第一次步移获取的序列信息,继续进行侧翼序列获取。此外,本试剂盒中还含有Control DNA及Control Primer,可以方便进行Control实验。
 
■ 试剂盒原理:以使用兼并引物AP1为例。
 
Genome Walking Kit
图1. Genome Walking Kit的实验原理图
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列 (5’→3’)
       Control Specific Primer SP1     AAATGCTGCAGCCTCCCTCTCACCC
       Control Specific Primer SP2     AATACCAGAAATGTGCCCTCCCGTG
       Control Specific Primer SP3     TGAGCTGGCAGGTTGTAGTCTCTGT
 
■ 特异性引物的设计
 
Genome Walking Kit
图2. Genome Walking Kit特异性引物设计示意图
特异性引物设计原则:
根据经过验证的已知序列区 (最好不少于500 bp) 设计三个特异性引物 (见上图):设计方向为需要扩增的未知区域方向,SP2的位置应设计在SP1的内侧,SP3位于SP2的内侧。每两个引物之间的距离没有严格规定,一般以60-100 bp为宜。引物设计原则:引物的长度为22-26 nt,GC含量45-55%,Tm值60-70℃,引物Tm值计算公式:Tm=69.3+0.41(G/C)%×100 – 650/L (引物碱基数)。其他要求和普通PCR反应用引物相同。
 
■ 注意事项
1. 使用本试剂盒时,进行三次PCR反应时使用的AP引物必须是同种AP引物,即:1st PCR反应时使用的是AP1,则2nd和3rd PCR反应都必须使用AP1。对于不同物种,各条AP引物的扩增效率各不相同。
2. 在设计特异性引物时,SP3 Primer不要距离未知序列区域太远,一般以100-200 bp为宜,以增加获取未知序列的有效长度。
 
 

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pUC18 DNA酶试剂盒Takara

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pUC18 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3218 pUC18 DNA 25 μg ¥350 pUC18 DNA pUC18 DNA pUC18 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pUC18载体适用于双脱氧法对DNA片段进行测序,它克隆的DNA片段比使用M13 phage作载体时克隆的片段长。由于在lacZ领域中含有多克隆位点,因此可以在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因,使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以对克隆得到的长片段DNA进行测序。
 
■ 链长
2,686 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 使用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No. : 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pUC18多克隆位点图
 
pUC18 DNA
 
■ pUC18载体图谱
 
pUC18 DNA
 
 

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pUC19 DNA酶试剂盒Takara

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pUC19 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3219 pUC19 DNA 25 μg ¥350 pUC19 DNA pUC19 DNA pUC19 DNA
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□ 浓度  
     0.5 μg/μl  
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pUC19载体适用于双脱氧法对DNA片段进行测序,它克隆的DNA片段比使用M13 phage作载体时克隆的片段长。由于在lacZ领域中含有多克隆位点,因此可以在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因,使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Kilo-Sequence Deletion Kit (Code No.: 6030) 可以对克隆得到的长片段DNA进行测序。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
2,686 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 使用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Kilo-Sequencing Deletion Kit (Code No.: 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pUC19多克隆位点图
 
pUC19 DNA
 
 

页面更新:2019-03-18 11:58:23

pHSG298 DNA酶试剂盒Takara

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pHSG298 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3298 pHSG298 DNA 25 μg ¥350 pHSG298 DNA pHSG298 DNA pHSG298 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pHSG298是一种pUC系列的克隆载体,具有卡那霉素抗性基因作为选择标记,带有与pUC18 DNA完全一样的多克隆位点序列 (但是,Hind III 和Sma I 酶切位点不能使用)。
将DNA片段从pUC19转移到pUC18时,使用本制品替代pUC18,不必纯化DNA片段。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
2,673 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化cccDNA。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 使用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No.: 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pHSG298多克隆位点图谱
pHSG298 DNA
 
■ pHSG298载体图谱
pHSG298 DNA
 
 

页面更新:2021-02-25 11:32:14

pHSG299 DNA酶试剂盒Takara

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pHSG299 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3299 pHSG299 DNA 25 μg ¥350 pHSG299 DNA pHSG299 DNA pHSG299 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pHSG299是一种pUC系列的克隆载体,具有卡那霉素抗性基因作为选择标记,带有与pUC19 DNA完全一样的多克隆位点序列 (但是,Hind III 和Sma I 酶切位点不能使用)。
将DNA片段从pUC18转移到pUC19时,使用本制品替代pUC19,不必纯化DNA片段。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
2,673 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化cccDNA。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 使用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No.: 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pHSG299多克隆位点图谱
pHSG299 DNA
 
■ pHSG299载体图谱
pHSG299 DNA
 
 

页面更新:2019-04-12 11:07:07

pHSG396 DNA酶试剂盒Takara

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pHSG396 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3396 pHSG396 DNA 25 μg ¥350 pHSG396 DNA pHSG396 DNA pHSG396 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pHSG396是一种pUC系列的克隆载体,以氯霉素抗性基因作为选择标记。适合于用双脱氧法进行DNA测序。由于在lacZ基因中含有多克隆位点,因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主进行转化后,在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上进行培养时可以很容易地通过蓝白筛选,判断载体中DNA片段的插入。lac promoter可以用于外源基因的表达,M13 primers可以用于DNA的测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No. : 6030) 可对数千碱基的插入片段进行测序。pHSG396的多克隆位点是在pUC19的多克隆位点的基础上改造而成的。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
2,239 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化cccDNA。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No.: 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pHSG396多克隆位点图谱
pHSG396 DNA
 
■ pHSG396载体图谱
pHSG396 DNA
 
 

页面更新:2021-02-25 11:41:58

pHSG398 DNA酶试剂盒Takara

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pHSG398 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3398 pHSG398 DNA 25 μg ¥350 pHSG398 DNA pHSG398 DNA pHSG398 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pHSG398是一种pUC系列的克隆载体,以氯霉素抗性基因作为选择标记。它能够克隆比使用M13 phage作载体时更长的片段。适合于用双脱氧法进行DNA测序。由于在lacZ基因中含有多克隆位点,因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主进行转化后,在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上进行培养时可以很容易地通过蓝白筛选,判断载体中DNA片段的插入。lac promoter可以用于外源基因的表达,M13 primers可以用于DNA的测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No. : 6030) 可对数千碱基的插入片段进行测序。pHSG398的多克隆位点是在pUC18的多克隆位点的基础上改造而成的。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
2,227 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化cccDNA。
 
■ 用途
1. 外源基因的克隆以及使用lac启动子进行表达。
2. 用M13系列引物进行DNA测序。
3. 使用Deletion Kit for Kilo-Sequencing (Code No.: 6030) 进行长片段DNA测序。
 
■ pHSG398多克隆位点图谱
pHSG398 DNA
 
■ pHSG398载体图谱
pHSG398 DNA
 
 

页面更新:2019-04-12 11:30:02

pUC118 DNA酶试剂盒Takara

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pUC118 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3318 pUC118 DNA 25 μg ¥350 pUC118 DNA pUC118 DNA pUC118 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pUC118载体是利用pUC18载体的Nde I 酶切位点,插入含有M13 phage DNA Intergenic region (IG) 的HgiA I (5645) – DraI (5941) 片段构建而成的。由于在lacZ基因中含有多克隆位点,因此在含有IPTG、X-Gal 的平板培养基上可以很容易地通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因,使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以对克隆得到的数千碱基的DNA片段进行测序。
由于pUC118载体中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG),因此pUC118载体还可以在Helper phage M13K07的感染下产生单链DNA,包入Phage颗粒内后从菌体内放出,而不存在Helper phage单链DNA的污染。使用本制品时,可以稳定获得单链的长片段DNA (~7kb),并且没有缺失。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
3,162 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化。
 
■ GenBank
Entry Name : CVU07649
Accession No. : U07649
 
■ 注意
GenBank中2,540位为碱基"C",而本载体对应位置为"T"。
 
■ pUC118多克隆位点图
 
pUC118 DNA
 
■ pUC118载体图谱
 
pUC118 DNA
 
 

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pUC119 DNA酶试剂盒Takara

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pUC119 DNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3319 pUC119 DNA 25 μg ¥350 pUC119 DNA pUC119 DNA pUC119 DNA
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□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
pUC119载体是利用pUC19载体的Nde I 酶切位点,插入含有M13 phage DNA Intergenic region (IG) 的HgiA I (5645) – DraI (5941) 片段构建而成的。由于在lacZ基因中含有多克隆位点,因此在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上可以很容易地通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因,使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以对克隆得到的数千碱基的DNA片段进行测序。
由于pUC119载体中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG),因此pUC119载体还可以在Helper phage M13K07的感染下产生单链DNA,包入Phage颗粒内后从菌体内放出,而不存在Helper phage单链DNA的污染。使用本制品时,可以稳定获得单链的长片段DNA (~7kb),并且没有缺失。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 链长
3,162 bp
 
■ 制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化。
 
■ GenBank
Entry Name : CVU07650
Accession No. : U07650
 
■ 注意
GenBank中597位、852位、901位和2,540位为碱基"C",而本载体对应位置为"T"。
 
■ pUC119多克隆位点图
 
pUC119 DNA
 
■ pUC119载体图谱
 
pUC119 DNA
 
 

页面更新:2019-04-12 11:11:15