LDH-细胞毒性检测Wako LDH-Cytotoxic Test Wako

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LDH-细胞毒性检测Wako                              LDH-Cytotoxic Test WakoLDH-细胞毒性检测Wako

LDH-Cytotoxic Test Wako

 


背景


  在日本每年在动物实验中死亡的小鼠和大鼠达850万只。其中以兔子眼睛作为药品和化妆品检测的样本,利用德莱兹法观察角膜和结膜的变化检测毒性·刺激性的实验,是非常残忍的。

  因此,开发了在in vitro条件下的动物实验代替传统动物实验。此方法可检测培养细胞的毒性和细胞增值能力,不仅可测定因试剂破坏细胞而流出的酶量,还可以使色素渗入到活细胞中。比实验动物法实惠且节省操作,可客观地测定其毒性。

  本产品是使用培养细胞对各种试剂的毒性进行简便测定的试剂盒。

  可以直接测定细胞膜受到试剂影响而死亡的细胞中的游离LDH(乳酸脱氢酶),灵敏性高。

 


◆优点


● 可用于吸附细胞·浮游细胞

● 使用酶测定法进行测定,可以对细胞毒性进行精确的定量测定

● 通过调节样品处理时间和显色反应时间可以调节灵敏度

● 使用吸光全自动定量绘图酶标仪可以对多数样品进行测定

● 测定波长:吸光560 nm

 


测定原理


LDH-细胞毒性检测Wako                              LDH-Cytotoxic Test Wako

  在LDH的作用下乳酸会被丙酮酸氧化,而辅酶会被NADH还原。样品中根据LDH活性按比例生成的NADH会在心肌黄酶的作用下会将硝基蓝四氮唑还原,生成蓝紫色的双蚁酯。在560 nm(±10 nm)下测定这个显色液的吸光度。


LDH法

MTT法

测定对象

死细胞(&活细胞)

活细胞

测定时间(处理样品后)

1小时内

4~5小时

微量毒性的测定

适用

适用

微量死细胞测定时的误差

结果的客观性

 


◆试剂盒构成


显色试剂 硝基蓝四氮唑还原

心肌黄酶,NAD(3.7mg/vial)——————————————5 mL用×10支

缓冲液 DL-乳酸锂(50mg/mL)——————————————————55 mL×11支

反应停止液 盐酸(1mol/L)————————————————————55 mL×11支

96孔微量滴定板—————————————————————————10块(未灭菌)

◆使用方法


实验步骤

96孔板(灭菌)

↓→添加细胞。37℃下过夜

↓→PBS清洗

↓→添加检测物。37℃,15分钟

↓→离心分离

上清液

 


◆用途


  通过LDH法检测各种试剂毒性的试剂盒。

参考文献

[1] Korzeniewski, C. andCallewaert, D. M. : J. Immunol. Methods, 64, 313 (1983)

[2] Decker, T. andLohmann-Matthes, M. -L. : J. Immunol. Methods, 115, 61 (1988)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
299-50601 LDH-Cytotoxic Test Wako
LDH细胞毒性检测试剂盒
960次用 细胞毒性测定用