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ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
StemSure® Serum Replacement
本产品是ES细胞和iPS细胞培养中使用的血清代替品。血清含有分化诱导因子，会导致干细胞分化。使用本产品代替血清，可在ES和iPS细胞培养的同时，保持他们的未分化状态，达到稳定培养。
本产品不含剧毒物质，将其作为普通物质处理。
使用本产品配制培养基培养的小鼠ES细胞，可用于制备嵌合体小鼠，并确认其种系传递。
◆特点•优势
● 可用于嵌合体小鼠制备，并确认其种系传递。
● 作为血清替代品，用于小鼠ES细胞・人IPS细胞培养。
● 不含剧毒物质。
◆案例•应用
1、嵌合体小鼠的制备与种系传递Update！！
将组装 HaloTag® cDNA 的目标载体导入小鼠ES细胞，用含有 StemSure® Serum Replacement（SSR）的培养基培养。确认载体导入小鼠ES细胞后，将其注入至 ICR 小鼠的胚盘胞，并移植至 ICR 小鼠的子宫。得到的嵌合体小鼠与 C57BL/6J 小鼠交配，获得F1小鼠。
(1) 嵌合体小鼠
收集嵌合体小鼠的血液，用 TRITC（四甲基若丹明异硫氰酸盐）对 HaloTag® 蛋白质染色。发现小鼠ES细胞源的 HaloTag® 的血液被染色，可确认为嵌合化。
(2) F1小鼠
F1小鼠的血液发现 HaloTag® 存在，可确认用 SSR 培养基培养的ES细胞嵌合小鼠能够正常存活。
2、人iPS细胞201B7的培养
(1) 克隆形态与ALP染色
已确认可用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养人iPS细胞 201B7 株。ALP 染色呈阳性。
<培养基组成>
D-MEM/Ham's F-12 + 20% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5 ng/mL bFGF
(2) 未分化标记的发现
使用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养的人iPS细胞201B7株，确认各种未分化标记（Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81）呈阳性。
3、小鼠ES细胞D3的培养
(1) 细胞形态与ALP染色
使用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养小鼠ES细胞D3，能观察到小鼠ES细胞群特有的光泽，ALP染色呈阳性。
(2) 细胞增殖曲线
用不同培养基培养小鼠ES细胞D3进行14继代培养，比较细胞增殖。
如下图所示StemSure® 系列与Ａ公司有同等的性能。
< StemSure® 系列培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
（使用胶原包被的12孔板）
(3) 细胞群倍加数*
使用不同培养基对小鼠ES细胞D3进行继代培养，检查培养天数与细胞群倍加数的关系。
下图显示 StemSure® 系列与Ａ公司产品的细胞群倍加数相同。
*细胞群倍加数 cell population doubling level，缩写PDL，指从培养开始至现在细胞群的倍增次数。
<培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/ml StemSure® LIF
（使用胶原包被的12孔板）
(4) 未分化标记的检测
使用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行５代继代培养，各种未分化标记（Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1）呈阳性。
<培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
4、畸形瘤的形成
用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行继代培养。对免疫不全小鼠的皮下注射培养后细胞。在形成皮下畸形瘤，其内部检测出神经组织（外胚叶源）、软骨组织（中胚叶源）、管腔结构纤毛上皮（内胚叶源）。
<培养基组成 >
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
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ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品 |
★StemSure® 系列★
StemSure® 系列可培养ES细胞和iPS細胞。使用小鼠ES细胞D3检测每批产品的品质。
● StemSure® D-MEM・巯基乙醇，硫代甘油
● StemSure® 明胶溶液
● StemSure® LIF, 小鼠, 重组. 溶液,
● StemSure® 冻存溶液
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产品编号 |
产品名称 |
等 级 |
规 格 |
价格 |
保存温度・法规情报 |
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197-16275 |
StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol |
细胞培养用 |
500 mL |
询价 |
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198-15781 |
StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 |
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195-15791 |
StemSure® 50mmol/L Monothioglycerol Solution |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 |
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190-15805 |
StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution |
细胞培养用 |
500 mL |
询价 |
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199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
细胞培养用 |
106 units 106 units×10 |
询价 |
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195-16031 |
StemSure® Freezing Medium |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 | ||
已有案例引用的培养基配方
iPSC培养基组成如下：含15％StemSure Serum Replacement（197-16775; Wako Pure Chemical Industries） DMEM / F12，1％抗生素 – 抗真菌混合溶液，1％非必需氨基酸（139-15651; Wako Pure Chemical Industries ），2mM谷氨酸（16948-004; Nacalai Tesque）和0.1mMβ-巯基乙醇（21438-82; Nacalai Tesque）。文献全文请点击参考文献页面。
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 191-18375 | Stemsure® Serum Replacement Stemsure®血清替代品 |
500 mL | 细胞培养用 |