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人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

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StemSure® hPSC 培养基Δ人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

人多能性干细胞无血清培养基


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

 

　　本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白，批次间的差别较少，结果稳定。但是，本产品不含bFGF（碱性線成纤维细胞成长因子）。


◆特点


●　无血清、无饲养层培养人 ES· iPS 细胞

●　使用人 iPS 细胞 201B7 细胞系，进行每批次的质量检测

●　不含动物源成分

●　不属于医药用外毒物或剧毒物，保存及处理简单

●　不含蛋白的低蛋白培养基

●　可使用 Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin 等培养基质

●　可使用 Accutase, TrypLE Select 等解离液

●　传代培养时添加 Y-27632 可传代培养单细胞


◆检测项目


● 细胞繁殖能力测试（使用人iPS细胞201B7细胞系）

● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7细胞系）

● 无菌检测

● pH

● 渗透压

● 内毒素

● 支原体检测


◆使用注意

 

● 本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞成长因子）。

● 本产品需冷藏（-20℃）。溶解后无需再冷冻，请保存于２～10℃，并在１周内使用完毕。

 

◆人iPS细胞201B7细胞系


　　将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。



《 细胞形态 》

　　使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养的人iPS细胞的形态与Ａ公司培养基的几乎相同，没有发生分化，稳定地进行了培养。


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

《 细胞群倍加数 》

　　对比移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代的细胞，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞繁殖状况更好。

 ＜ 培养基成分 ＞　
　　StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF

＜ 细胞播种数 ＞　
　　1×105 cells/well（使用６孔培养板）

 

　


《 未分化性标记表达确认 》

　　使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。 　

　　　※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。

人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜ 培养基成分 ＞　
　　StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF

＜ 细胞播种数 ＞　
　　1×105 cells/well（使用６孔培养板）

 

　

《 未分化性标记表达确认 》

　　使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。 　

　　　※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。

人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜数据提供　独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞


◆人ES细胞201B7细胞系


　　将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人ES细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。

《 细胞形态 》

　　使用Ａ公司培养基的细胞，细胞在第２代以后出现了分化。另一方面，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞，没有发生分化，稳定地进行了培养。

　

人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

《 细胞群倍增数 》


　　比较两者移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代，细胞的繁殖能力没有差异。


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜ 培养基成分 ＞　
　　StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/ml bFGF

＜ 细胞播种数 ＞　
　　1×105 cells/well（使用６孔培养板）

 



《 未分化性维持確認 》


　　使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至第６代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。 　　

　　　※BC2LCN 是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜数据提供　独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师＞

 

 

核型解析


　　对使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析，没有发现染色体异常。　


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜数据提供　　独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师＞

 

 

人iPS细胞201B7分化成三胚层


　　使用 StemSure® hPSC 培养基Δ将人iPS细胞201B7细胞系培养至第３代，再使用 StemSure® 系列培养基进行驯化培养，可观察到 βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP，因此判断细胞形成胚体后，进行了三胚层分化。


人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ

＜ 培养基成分 ＞
　　StemSure® D-MEM + StemSure® Serum Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine + 10 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 x Non-essential Amino Acids Solution 　　

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
197-17571 StemSure® hPSC MediumΔ 100ml 用于细胞培养
193-17573 StemSure® hPSC MediumΔ 100ml×4 用于细胞培养
064-05381 　Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 50μg 用于细胞培养
068-05384 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 100μg 用于细胞培养
060-05383 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 1mg 用于细胞培养
257-00511 Y-27632 1mg 用于细胞培养
253-00513 Y-27632 5mg 用于细胞培养
251-00514 Y-27632 25mg 用于细胞培养
253-00591 5mmol/l Y-27632 Solution 300μl 用于细胞培养
220-02041 Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution 500μg 生物化学用
197-16275 StemSure® D-MEM（High Glucose）with Phenol Red and Sodium Pyruvate 500ml 用于细胞培养
197-16775 StemSure® Serum Replacement 500ml 用于细胞培养
198-15781 StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution （×100） 100ml 用于细胞培养
195-15791 StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution （×100） 100ml 用于细胞培养
190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution 500ml 用于细胞培养
199-16051 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units 用于细胞培养
195-16053 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units×10 用于细胞培养
195-16031 StemSure® Freezing Medium 100ml 用于细胞培养

Culture® A-83-01

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Culture® A-83-01Culture® A-83-01

用于ES·IPS细胞研究


　　本产品是ALK4、ALK5、ALK7的选择性抑制剂。可以抑制Smad2/3的磷酸化和TGF-β诱导性的上披肩组织转换。本产品对骨形成因子typeI受体、p38MAP激酶、细胞外抑制激酶几乎没有影响。

　　另外，在大鼠IPS细胞培养基中添加本产品，可以抑制大鼠IPS细胞分化，进行均一增殖，从而可以长期培养。


Culture® A-83-01                            Culture® A-83-01


◆优点 

●　已确认细胞毒性

●　纯度（HPLC）：98.0以上

●　外观：白色~黄色、结晶型粉末或块状

●　溶解性：可溶于DMSO


具体相关产品请查阅相关资料

欲了解更多相关产品请点击文字：ES/iPS细胞未分化维持研究用低分子化合物

相关产品

◆维持ES·IPS细胞的未分化能


产品编号

产品名称

规格

包装

013-22211

Adrenocorticotropic   Hormone

（1-24）（Human）【ACTH】

细胞生物学用

1mg

012-23021

ALK5 Inhibitor

【TGF-βRⅠ Kinase InhibitorⅡ】

细胞生物学用

1mg

021-17041

027-17043

（-）-Blebbistatin

细胞生物学用

1mg

5mg

029-16241

6-Bromoindirubin-3'-oxime【BIO】

【GSK-3 InhibitorⅨ】

细胞生物学用

1mg

029-05393

Butyric Acid

和光特级

25mL

023-05396

500mL

036-24001

Cyclic   Pifithrin-α Hydrobromide

细胞生物学用

5mg

041-30101

DNA   Methyltransferase Inhibitor

【RG108】

基因研究用

10mg

047-30103

25mg

056-08221

EHNA   Hydrochloride

细胞生物学用

10mg

079-03811

GF 109203X

生物化学用

1mg

086-10071

HA-100   Hydrochloride

细胞生物学用

10mg

110-00831

Kenpaullone

细胞生物学用

1mg

116-00833

5mg

115-01001

Ki16425

细胞生物学用

5mg

162-25291

PD0325901

细胞生物学用

5mg

168-25293

25mg

160-26831

PD173074

细胞生物学用

5mg

165-26761

PD184352

细胞生物学用

5mg

169-19211

PD-98059

生物化学用

5mg

198-16761

SB203580   Hydrochloride

细胞生物学用

1mg

193-01522

Sodium Butyrate

–

25g

197-01525

500g

193-16071

SU5402

细胞生物学用

1mg

202-18011

Thiazovivin

细胞生物学用

1mg

208-18013

5mg

211-01051

U0126

生物化学用

5mg

227-01071

Valproic Acid

生物化学用

5g

225-01072

25g

257-00511

Y-27632

细胞生物学用

1mg

253-00513

5mg

251-00514

25mg

253-00591

5mmol/ℓ Y-27632   Solution

细胞培养用

300μL

 


◆ES·IPS细胞的分化诱导、脱分化


产品编号

产品名称

规格

包装

011-25291

A-769662

细胞生物学用

5mg

017-25293

25mg

015-22531

AICAR

细胞生物学用

100mg

011-22533

1g

014-16631

Am580

生物化学用

5mg

014-25421

AMD3100   Octahydrochloride

细胞生物学用

10mg

031-18963

Ciclosporin A

细胞生物学用

50mg

035-18961

200mg

030-20981

Ciglitazone

细胞生物学用

5mg

034-21501

CKI-7   Dihydrochloride

细胞生物学用

5mg

043-33581

DAPT【γ-Secretase InhibitorⅨ】

细胞生物学用

5mg

049-33583

25mg

047-18863

Dexamethasone

生物化学用

100mg

041-18861

1g

067-02191

Forskolin

生物化学用

10mg

063-02193

25mg

092-07041

IPA-3

细胞生物学用

5mg

094-06381

IWR-1-endo

细胞生物学用

5mg

124-06011

LDN193189 Hydrochloride

细胞生物学用

2mg

129-04861

LY294002

生物化学用

5mg

125-04863

10mg

123-04864

25mg

166-23991

Purmorphamine

细胞生物学用

5mg

186-01114

all-trans-Retinoic   Acid

生物化学用

50mg

182-01116

100mg

182-01111

250mg

188-01113

1g

192-16541

SB431542

细胞生物学用

5mg

198-16543

25mg

198-09811

Spermine

生物化学用

250mg

194-09813

1g

203-17561

Trichostatin A

细胞生物学用

1mg

209-17563

5mg

209-19481

Troglitazone

细胞生物学用

5mg

205-19483

50mg

 

参考文献

［1］Li, W. et al. : Cell Stem Cell, 4, 16 （2009）.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
039-24111 CultureSure ® A-83-01 2 mg 细胞培养用
035-24113 CultureSure ® A-83-01 10 mg 细胞培养用

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit

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人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit

ReproNeuro Glu ™ kit


人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit


ReproNeuro Glu & Alzheimer’sDisease Model Cells 人iPS 细胞诱导的神经细胞，用于阿尔茨海默病的研究。

◆特点•优势


●　世界首例来源于人iPS 细胞的谷氨酸(Glu) 神经细胞和AD 模型神经细胞

●　实验成像图显示体外培养神经细胞与典型 AD 患者的表型相同(β 淀粉样蛋白聚集)

●　适用于高通量筛选


◆案例•应用

可根据实验需要选择以下三种产品


人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit



 高纯度（>80%）谷氨酸神经细胞

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit

Note) Blue:DAPI

阿尔茨海默病（AD）的体外检测

                           

Aβ 聚集

 体外AD 表型和药物作用的检测。

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞 ReproNeuro Glu™ kit


产品信息


产品编号

产品名称

产品描述

RCESDG002

ReproNeuro Glu™ kit

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞

Glutamatergic neurons derived from a human cell line without gene manipulatiuon.3×105 cells+reagents

RCESDG104

ReproNeuro Glu-AD™ (PS1 wild type)

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞（preseninlin-1的野生型拷贝）

Glutamatergic neurons derived from a human iPS cell line with a wild type copy ofPresenilin-1. 3×105cells+reagents

RCESDG106

ReproNeuro Glu-AD™ (PS1 P117L

人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞（preseninlin-1的突变体（P117L）拷贝）

Glutamatergic neurons derived from a human iPS cell line with a mutant   (P117L) copy of Presenilin-1added. 3×105 cells+reagents

Refill Reagents for ReproNeuro Glu™

Glu Matuation Medium™ , Glu Additive™ , Glu   Thawing Medium™ , Glu Coat™

ReproUNUS™

Service to establish customised transgenic/patient-derived model neurons

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
RCESDG002 ReproNeuro Glu™ kit
人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞		 1 Kit –
RCESDG104 ReproNeuro Glu-AD™ (PS1 wild type)
 人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞（preseninlin-1的野生型拷贝）		 –
RCESDG106 ReproNeuro Glu-AD™ (PS1 P117L
 人iPS细胞来源的谷氨酸能神经元祖细胞（preseninlin-1的突变体（P117L）拷贝）		 –

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit

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人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit

ReproNeuro Ach™ kit

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit


 ReproNeuro Ach & Alzheimer's Disease Model Cells  人iPS 细胞诱导的神经细胞，用于阿尔茨海默病的研究

◆特点•优势


●　世界首例来源于人iPS 细胞的商业化胆碱类（Ach）神经细胞和AD 模型神经细胞

●　实验成像图显示体外培养的神经细胞与典型 AD 模型患者表型相同（β 淀粉样蛋白聚集）

●　适用于高通量筛选


◆案例•应用


可根据实验需要选择以下三种产品

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit



高纯度（>80%）胆碱神经细胞


人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit           人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit

阿尔茨海默病（AD）的体外检测

　　

AD 表型和药物作用可以在体外通过常规检测仪器（PerkinElmer's AlphaLISA 和Enspire）被定量检出。

                   Aβ 聚集                                                                    EnSpire ™ /EnVision (PerkinElmer)

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit                                                   人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞 ReproNeuro Ach™ kit


◆产品信息


产品编号

产品名称

产品描述

RCESDA001

ReproNeuro Ach™ kit

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞

Cholinergic neurons derived from a human iPS cell line wihout gene manipulation. 3×106 cells+reagents

RCESDA103

ReproNeuro Ach-AD™ (PS1 wild type)

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞（preseninlin-1的野生型拷贝）

Cholinergic neurons derived from a human iPS cell line with a wild type copy of Presenilin-1. 3×106 cells+reagents

RCESDA105

ReproNeuro Ach-AD™ (PS1 P117L)

人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞（preseninlin-1的突变体（P117L）拷贝）

Cholinergic neurons derived from a human iPS cell line with a mutant (P117L) copy of Presenilin-1 added. 3×106 cells+reagents

Small pack

Includes 1/10 cells of RCESDA001/103/10 （3×105 cells+reagents）

Refil Reagents for ReproNeuro Ach™

Ach Maturation medium™, Ach Additive™ , Ach Thawing Medium™, Ach Coat™

ReproUNUS™

Service to establish customised   transgenic/patient-derived model neurons

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
RCESDA001 ReproNeuro Ach™ kit
人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞		 1 Kit –
RCESDA103 ReproNeuro Ach-AD™ (PS1 wild type)
人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞（preseninlin-1的野生型拷贝）		 1 Kit –
RCESDA105 ReproNeuro Ach-AD™ (PS1 P117L)
人iPS细胞来源的胆碱神经元祖细胞（preseninlin-1的突变体（P117L）拷贝）		 1 Kit –

人iPS细胞酶试剂盒Takara

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

人iPS细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y00185 Cellartis® human iPS cell line P11025 Kit 1 Kit ￥23,632 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00275 Cellartis® human iPS cell line 7 (ChiPSC7) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00285 Cellartis® human iPS cell line 12 (ChiPSC12) Kit 1 kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00315 Cellartis® human iPS cell line 21 (ChiPSC21) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00325 Cellartis® human iPS cell line 22 (ChiPSC22) Kit 1 kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00305 Cellartis® human iPS cell line 18 (ChiPSC18) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
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无标题文档

人iPS细胞
(Human Induced Pluripotent Stem Cells)
Cellartis人iPS细胞（Human iPS Cell Line）产品是达到了工业客户使用标准生产的干细胞产品。该产品包括细胞和用于增殖培养的Cellartis DEF-CS Culture System培养体系。iPS细胞已经在制品化时完成了对DEF-CS培养体系的适应。Cellartis DEF-CS Culture System培养体系是组分明确而且不依赖饲养层的便捷的干细胞培养体系。Cellartis DEF-CS Culture System适合高效率地增殖培养干细胞，并且保持干细胞在增殖过程中几乎无分化地生长，这使得不需要在大规模增殖培养过程中进行细胞筛选。因此，Cellartis人iPS细胞（Human iPS Cell Line）产品是一套完整的产品体系，对于科研级别和工业规模的需求都适合。
 
■ 产品特点
· Cell lines were created by reprogramming human skin fibroblasts using defective polycistronic retrovirus technology to deliver Oct-4, SOX2, KLF4, and c-Myc
· Cell lines are extensively analyzed for purity and stem-cell characteristics, including recovery after thawing, absence of mycoplasma and bacteria, expression of stem cell-specific markers (Oct-4, NANOG, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81), absence of differentiation markers (Beta-3 tubulin, FOXA2, ASMA), and expected karyotype
· Optimized for culture with the Cellartis DEF-CS Culture System
· Suitable for all major applications; cells can form derivatives of all three germ layers when differentiated
· Kits include the Cellartis DEF-CS 100 Culture System
 
■ 关联产品
Code No. Product Size
Y30010 Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System 1 Kit
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞
 
人iPS细胞
Characteristics of Cellartis human iPS cells. The cell lines were generated from fibroblasts using defective polycistronic retrovirus technology to deliver Oct-4, Sox-2, KLF-4, and c-Myc. The skin fibroblasts were obtained from donors of varying age and gender, have a normal karyotype, and have been confirmed to differentiate into specific cell lineages. Consent was obtained from all donors for commercial use.
 
参考文献：
1. de Peppo GM, et al. Osteogenic potential of human mesenchymal stem cells and human embryonic stem cell-derived mesodermal progenitors: a tissue engineering perspective. Tissue Eng Part A.2010 Nov;16(11):3413-3426.
2. Both SK, et al. Differential bone-forming capacity of osteogenic cells from either embryonic stem cells or bone marrow-derived mesenchymal stem cells. J Tissue Eng Regen Med.2011 Mar;5(3):180-190.
3. de Peppo GM, et al. Free-form-fabricated commercially pure Ti and Ti6A14V Porous Scaffolds support the growth of human embryonic stem cell-derived mesodermal progenitors. ScientificWorldJournal. 2012;2012:646417.Epub 2012 Jan 4.
4. Ou Li, et al. Human embryonic stem cell-derived mesenchymal stroma cells(hES-MSCs) engraft in vivo and support hematopoiesis without suppression immune function: implications for off –the shelf ES-MSC therapies. PLOS ONE.2013; 8(1):e55319.
 

页面更新：2019-12-25 10:11:30

Human iPS Cell Editing Systems酶试剂盒Takara

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上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

Human iPS Cell Editing Systems
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30021 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 1 kit ￥7,860 Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems
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从开始到结束：人iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统
Start-To-Finish hiPSC Editing and Single-Cell-Cloning Systems
人诱导多能干细胞（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型，因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外，人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响，因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。
CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具，因为其高的靶向特异性，编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单，因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可以决定靶向特异性（Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的（RNA-programmable）方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修复途径的易错特性，进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组（homology-directed repair，HDR)途径被用于基因敲入。
 
CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞，包括基于载体的表达系统，RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比，直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法，同时脱靶效应的可能性更小（Kim et al. 2014)。
 
一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入，为了分离和筛选感兴趣的基因型，单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的，因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常，这会导致细胞死亡和提前分化。然而，Cellartis单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基，包被剂，和添加剂组成)，用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统，规避了集落状培养带来的挑战，允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。
 
Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的，在无饲养层和成分确定条件下，用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
关联基因编辑系统：
一、电穿孔法基因编辑
通过电穿孔的方法对hiPSCs进行有效的基因编辑，Takara提供重组Cas9蛋白质和产生大量sgRNAs所有必要的试剂，用于电穿孔hiPSCs。后续与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
二、Gesicle法基因编辑
Gesicles法是一种无毒的、高效的、替代电穿孔的方法，不依赖昂贵的设备或耗材。通过Gesicle法导入Cas9/sgRNA复合物进行有效的基因编辑，Takara提供所有的必要试剂用于产生细胞衍生的纳米囊泡（Gesicles），来转导Cas9和sgRNA至hiPSCs。后续可与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
■ 产品特点
· Highly efficient gene editing in hiPSCs—use either electroporation or gesicles to deliver Cas9 protein and sgRNA with no genomic integration and reduced off-target effects
· Superior single-cell survival—edited hiPSCs exhibit high (typically ~50%) survival when seeded as single cells in a 96-well plate
· Maintenance of pluripotency after editing and during single-cell cloning—hiPSCs maintain high levels (>90%) of pluripotency markers Oct-4, TRA-1-60, and SSEA-4
· Stable karyotype from start to finish—maintain a normal and stable karyotype throughout editing, single-cell cloning, and expansion
· Flexibility to perform gene editing experiments your way—choose from complete kits that provide editing and single-cell cloning solutions using either electroporation-based or utilize the culture media kit (Code No. Y30021) to perform efficient single-cell cloning following your own editing experiments
· Continuous use of DEF-CS technology throughout gene editing/single-cell cloning experiments—use the Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010) before and during gene editing experiments, then during scale-up after single-cell cloning experiments
 
■ 产品组成
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
（Code No. Y30021，1 kit）
· Cellartis DEF-CS 500 Basal Medium (Code No. Y30011; 500 ml)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1 (Code No. Y30018; 2 × 800 μl)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Additives
   (Code No. Y30019; 2 × 750 μl, 1 × 500 μl, 1 × 500 μl)
 
关联基因编辑产品
电穿孔法基因编辑
Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (632635; 1 kit)
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) (632641; 100 μg)
Gesicle法基因编辑
Guide-it™ CRISPR/Cas9 Gesicle Production System (632613；1 kit)
 
■ 产品应用
· CRISPR/Cas9-mediated gene editing of hiPSCs
· Single-cell cloning of hiPSCs
· Disease modeling
 
■ 参考文献
Asplund, A. et al. One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev. Reports 12, 90-104 (2016).
Jinek, M. et al. A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity. Science 337, (2012).
Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J. & Kim, J.-S. Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Genome Res. 24, 1012-9 (2014).
Sander, J.-D. & Joung, J.-K. CRISPR-Cas9 systems for genomic editing, regulation and targeting. Nat. Biotechnol. 32, 347-55 (2014).
 
■ 产品详情请点击：Human iPS Cell Editing Systems
 
 
 
Human iPS Cell Editing Systems
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) growing in DEF-CS medium were edited with Cas9 and sgRNA specific to CD81. Pluripotency is maintained in edited human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) that have been seeded as single cells. 12 clonal lines created from single-seeded hiPSCs exhibit high levels of Oct-4 (97-99%), TRA-1-60 (98-99%), and SSEA-4 (98-99%).
  （图片来源于Takara Bio USA, Inc.）
 
 
 

页面更新：2022-02-11 16:10:36

人iPS细胞培养系统酶试剂盒Takara

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人iPS细胞培养系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30012 Cellartis® DEF-CS™ 500 COAT-1 4 ml 询价 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统
Cellartis Y30010 DEF-CS™ 500 1 Kit ￥5,979 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统
Cellartis Y30016 Cellartis® DEF-CS™ 500 Additives 1 set 询价 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统
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Human iPS和Human ES增殖用培养基
(DEF-CS Culture System, all-in-one format)
作为一款高端创新型的产品，Cellartis DEF-CS培养系统使得单细胞干细胞操作成为常规的操作。该产品是专门针对人类诱导干细胞（hiPS）和人类胚胎干细胞（hES）研发的高效率增殖用培养基产品体系。该产品系统为all-in-one型，包括了所有组分，客户不需要另外求购组分。该产品是成分确定的培养基产品，而且不需要饲养层。DEF-CS既可以实现单细胞培养，也可以用于传统的iPS培养模式以及大规模干细胞增殖。在使用DEF-CS培养基增殖干细胞时，几乎没有背景分化的问题，这使得细胞筛选不再必需。作为一款创新产品，利用DEF-CS培养干细胞时，可以使用酶消化法（enzymatic passaging）实现需要单细胞操作，这一特点十分有利于高通量细胞鉴别筛选（high-throughput screening）、转染（transfection）、框架接种（scaffold seeding）等。
 
■ 产品特点
· Feeder-free and chemically defined culture system for efficient expansion of human iPS cells
· Ideal system for culturing iPS cells; cells maintain pluripotency and long-term potential for self-renewal and differentiation
· Complete kit includes 500 ml basal medium, additives, and coating compound
· Robust system provides high reproducibility and stable growth
· Maintains cells in an undifferentiated state with virtually no background differentiation
 
■ 产品应用
· Scale-up and mass production of human iPS cells
· Single-cell culture of human iPS cells
· Transfection and reprogramming
· High-throughput screening
· Tissue engineering (seeding cells on a scaffold)
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞培养系统
 
人iPS细胞培养系统
Robust growth of human induced pluripotent stem (iPS) cells in the Cellartis DEF-CS Culture System. The number of iPS cells was quantified after being cultured for three weeks using either the Cellartis DEF-CS Culture System, a reference feeder system, or four other stem cell culture systems.
 
参考文献：
1. Sivertsson, Louise, et al. "Hepatic differentiation and maturation of human embryonic stem cells cultured in a perfused three-dimensional bioreactor." Stem cells and development 22.4 (2012): 581-594.
2. Hanson, Charles, et al. "Transplantation of human embryonic stem cells onto a partially wounded human cornea in vitro." Acta ophthalmologica 91.2 (2013): 127-130.
3. Norrman, Karin, et al. "Distinct gene expression signatures in human embryonic stem cells differentiated towards definitive endoderm at single-cell level." Methods 59.1 (2013): 59-70.
4. Ulvestad, Maria, et al. "Drug metabolizing enzyme and transporter protein profiles of hepatocytes derived from human embryonic and induced pluripotent stem cells." Biochemical pharmacology 86.5 (2013): 691-702.
5. Ramirez JM, et al. Side scatter intensity is highly heterogeneous in undifferentiated pluripotent stem cells and predicts clonogenic self-renewal. Stem Cells Dev.2013 Jun 15;22(12):1851-1860.
6. Borestrom, Cecilia, et al. “Footprint-free human induced pluripotent stem cells from articular cartilage with redifferentiation capacity: A first step toward a clinical-grade cell source.” Stem Cells Trans. Med. (2014) 3, 433-447.
7. Kia, Richard, et al. "MicroRNA-122: a novel hepatocyte-enriched in vitro marker of drug-induced cellular toxicity." Toxicological Sciences (2014): kfu269.
8. Valton, Julien, et al. "Efficient strategies for TALEN-mediated genome editing in mammalian cell lines."  Methods 69.2 (2014): 151-170.
9. Zandén, Carl, et al. "Stem cell responses to plasma surface modified electrospun polyurethane scaffolds." Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 10.5 (2014): 949-958.
10. Asplund, Annika, et al. “One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying? Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells” Stem Cell Rev and Rep (2015)
 
 
 
 

页面更新：2020-02-14 15:54:03

人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统酶试剂盒Takara

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人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30055 Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System 1 Kit ￥13,846 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统
Cellartis Y30051 Cellartis® Hepatocyte Maintenance Medium 100 ml ￥2,198 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统 人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统
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iPS向肝脏细胞定向分化操作系统
(Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System)
以肝脏细胞为模型的实验越来越受到重视，在肝脏病变机理研究、药物代谢研究、药物毒理评估等方面有广阔的应用前景。然而，以个体原代肝细胞为材料来源会产生如取材困难、材料批间差大、无法长期稳定供应等一系列难以克服的问题。因此，通过iPS批量转化生产肝细胞的方法就显示出特别的优势。Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System可以稳定地、规模化地实现iPS向hepatocyte的诱导转化生产，而且诱导转化出的肝细胞能够稳定表达药物代谢相关酶系统和药物转运系统。
Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System是一套Do-It-Yourself系统，客户既可以对某个特殊病人来源的iPS实现转化，也可以利用cellartis供应的iPS进行标准化操作。使用本产品的过程起始于诱导人iPS转化成为确定性内胚层（Definitive Endoderm (DE)）细胞，然后诱导转化DE至肝细胞。本产品是All-In-One型产品，实验所需的培养基、基质（coating）等包括在内。应用本产品转化约3 × 106 hiPS cells,可以获得约5 × 106 肝细胞（大约50 cm2面积的单层贴壁细胞）。
利用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System转化得到的肝细胞除了清晰表现出肝细胞的必备特征外（如肝细胞特异性标志物、CYP系列酶等），还保留了原始细胞供体者的遗传基因背景。另外，相比较从组织切除获得的原代肝脏细胞（通常需要低温保存），通过本产品系统转化获得的肝细胞在更长的时间跨度上保持着生理功能的稳定性。这一点对于毒理学评估和病毒感染评估具有显著的意义。为长时间维持培养hiPS转化而来的肝细胞，我们推荐Cellartis Hepatocyte Maintenance Medium (Cat. No. Y30051)。
 
关于Cellartis 卓越的iPS Cell to Hepatocyte Differentiation技术的专项说明，请点击：
详情
 
■ 产品特点
· Highly reproducible, robust system—the exact same protocol has been shown to work across 25 different iPS cell lines, so no need to optimize for your lines.
· Ideal for drug metabolism and safety studies—consistently generate panels of >90% pure, functional, hiPS cell-derived hepatocytes with diverse genetic backgrounds.
· Customized starting materials—start with any disease-relevant iPS cell lines and create accurate liver disease models.
· Ready for personalized medicine—make patient-specific, disease-specific cells for therapeutic applications.
· Extended experimental window—hepatocytes can be used for a minimum of 11 days for functional tests.
 
■ 产品成分
· Cellartis DEF-CS 100 Culture System (Y30020, not sold separately)
· Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit (Y30030, not sold separately)
· Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit (Y30050)
 
■ 产品详情请点击：人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统
 
人 iPS细胞向肝脏细胞定向分化系统
Immunocytochemistry analysis of hepatocyte differentiation. hiPS cells were differentiated into functional hepatocytes using the Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System. Hepatocytes were immunostained to detect early hepatic markers HNF4α (red, nuclear) and CK18 (green) on days 14 and 21. As the hepatocytes matured, expression of liver-specific markers CYP3A (red, cytoplasmic) and Albumin (green) increased as seen on day 28, as expected. Cell nuclei were stained with DAPI (blue).
 
参考文献：
Asplund, Annika, et al.One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying? Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev and Rep (2015).
 

页面更新：2019-12-25 09:39:27

人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统酶试剂盒Takara

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人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30035 Cellartis® Definitive Endoderm Differentiation Kit with DEF-CS™ Culture System 1 Kit ￥5,743 人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统 人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统 人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统
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Cellartis定向分化获取内胚层细胞试剂盒
(Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit)
The Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit用于定向分化hiPS获取definitive endoderm (DE) cells。本产品包含所有必需的培养基和coating材料。本产品还包括新一代的Cellartis DEF-CS 100 Culture System用于起始hiPS的维持培养用。使用本产品获得的DE细胞，可以作为起始材料进行定向分化至内胚层来源的细胞类型(如肝细胞，胰腺细胞)。Cellartis也提供分化DE细胞获取肝细胞的试剂盒（Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit (Cat. No. Y30050)；Cellartis也提供诱导分化hiPS获取肝细胞的试剂盒（Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System (Cat. No. Y30055)。
 
■ 产品特点
· Efficient differentiation—generates >80% SOX17-positive cells
· Robust protocol—successful definitive endoderm (DE) cell generation from more than 25 different hiPS cell lines
· Complete kit—media and ready-to-use coating for a seven-day protocol to reproducibly differentiate hiPS cells into DE cells
· Start with a homogeneous population of hiPS cells—kit includes the Cellartis DEF-CS 100 Culture System to maintain undifferentiated cells prior to the start of DE cell differentiation
 
 
■ 产品详情请点击：人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统
 
人 iPS细胞向定型内胚层细胞定向分化系统
mRNA expression profiles of definitive endoderm cells being generated from two hiPS cell lines (ChiPSC18 and P11025) using the Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit with DEF-CS Culture Medium. These graphs track the relative temporal mRNA expression levels of various markers during differentiation from hiPS cells (starting on Day 0) into DE cells (by Day 7), as measured by RT-qPCR.
 
 

页面更新：2019-12-25 09:40:07

人iPS细胞来源肝脏细胞酶试剂盒Takara

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人iPS细胞来源肝脏细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y10133 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC12) Kit 1 kit ￥21,173 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞
Cellartis Y10134 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC18) Kit 1 kit ￥21,173 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞
Cellartis Y10135 Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC22) Kit 1 kit ￥21,173 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞 人iPS细胞来源肝脏细胞
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人iPS干细胞分化来的肝细胞
Cellartis enhanced hiPS-HEP v2 kits 提供了可持续供应的、成熟的人诱导多能干细胞（hiPS）来源的肝脏细胞。在超过14天的检测窗口期，hiPS-HEP细胞拥有功能性的药物代谢机制，使其成为体外药物研发、药物代谢、和相关毒性研究的理想选择；具备成熟、稳健的代谢特征，支持其作为代谢疾病模型。方便使用的试剂盒包括完全的培养基和组份，用于长期检测。与其他肝脏细胞模型相比，培养的Cellartis hiPS-HEP细胞存活时间更长，进而拥有更长的检测窗口用于慢性-毒性实验和作为代谢疾病模型研究。
 
■ 产品特点
· Complete kit for thawing, plating, and culturing the provided cells
· Highly homogeneous population with consistent performance between batches and over time
· Cells are functional and stable for a 14-day assay window
· Cells show long-term, stable CYP450 activities
· Cells express key hepatocyte proteins, including α1AT, Alb, CK18, HNF4α, and E-cadherin
· Cells secrete physiologically relevant levels of albumin and urea
· Cells demonstrate functional insulin and glucose regulation
· Cells show phase I and II enzyme activities
· Cells demonstrate LDL uptake
 
■ 产品组成
· 1 vial of ～1.2 × 107 cells
· Hepatocyte thawing medium
· Hepatocyte coating
· Hepatocyte plating medium
· Hepatocyte washing medium
· Hepatocyte long-term maintenance medium
 
■ 产品应用
· Toxicity testing, including chronic toxicity assays
· Drug discovery and development
· Metabolic studies
· Metabolic disease modeling
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞来源肝脏细胞
 
人iPS细胞来源肝脏细胞
 
Cellartis 人iPS细胞来源的肝脏细胞可以作为长期的、可靠的肝脏疾病模型。
Cellartis human induced pluripotent stem (iPS) cell-derived hepatocytes are a long-lasting, reliable liver disease model. Ideal for long-term studies, these mature, functional, pure hepatocytes allow you to generate consistent results with low batch-to-batch variability. Cellartis iPSC-derived hepatocytes can be used for extended culture significantly longer than human primary hepatocytes—allowing you to get more data from your chronic toxicity studies.
 
人iPS细胞来源肝脏细胞
 
Cellartis enhanced hiPS-HEP cells可以稳定表达CYP450 活性超过21天。
CYP450 activity is stable in enhanced hiPS-HEP cells over 21 days. LC/MS was used to analyze CYP450 activity in cultured enhanced hiPS-HEP cells previously derived from the hiPS cell lines ChiPSC12, ChiPSC18, and ChiPSC22 (abbreviated as C12, C18, and C22). CYP3A (Panel A), CYP2C9 (Panel B), CYP1A (Panel C), and CYP2C19 (Panel D) activities in enhanced hiPS-HEP cells are stable over an extended culture time. Cryopreserved human primary hepatocytes (hphep), which are functional in culture for a significantly shorter time than enhanced hiPS-HEP cells, were thawed and cultured for 20 hours, and their data are shown as the black bar in each panel.
 
人iPS细胞来源肝脏细胞
 
Cellartis enhanced hiPS-HEP细胞在20天的培养中表达白蛋白（Albumin）。
Albumin is present in enhanced hiPS-HEP cells through 20 days in culture. Panel A. Representative images of enhanced hiPS-HEP cells from human iPS cell line ChiPSC18 (C18) taken 12 days after thawing (right), compared to cryopreserved human primary hepatocytes (hphep) taken 24 hr after thawing (left). Cells were stained for albumin and DAPI. Panel B. Albumin secretion as measured by ELISA; n=2 for enhanced hiPS-HEP cells, with the exception of C18 at 20 days (n=1), and n=3 donors for hphep.
 
（以上图片均来源于Takara Bio USA, Inc.）
 
参考文献：
1. Heins et al. Stem Cells 2004; 22: 367-376.United States National Stem Cell Bank; http://www.nationalstemcellbank.org.
2. Mantel N et al. Potential markers of attenuation of YF virus after infection of stem cell-derived human hepatocytes with wild-type Asibi or live-attenuated YF17D virus.Supplement to The American Journal of tropical Medicine and Hygiene, Volume 83, November 2010, Number 5, abstract 12.
3. Yildirimman R et al. Human embryonic stem cell derived hepatocyte-like cells as a tool for in vitro hazard assessment of chemical carcinogenicity. Toxicol. Sci. 2011 Dec; 124(2): 278-90.
4. Ulvestad M et al. Drug metabolizing enzyme and transporter protein profi les of hepatocytes derived from human embryonic and induced pluripotent stem cells. Biochem Pharmacol. 2013 Sep 1; 86(5):691-702.
 
 

页面更新：2019-12-29 15:12:53

人iPS细胞来源定型内胚层细胞酶试剂盒Takara

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人iPS细胞来源定型内胚层细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y10040 Cellartis® Definitive Endoderm Cells (from ChiPSC18) 1 Vial ￥8,387 人iPS细胞来源定型内胚层细胞 人iPS细胞来源定型内胚层细胞 人iPS细胞来源定型内胚层细胞
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Cellartis定型内胚层干细胞
[Cellartis Definitive Endoderm Cells (from ChiPSC18)]
Cellartis定型内胚层干细胞（DE cell）是从hiPS细胞株ChiPSC18经体外诱导分化得来。该产品中，大于90%的细胞显示表达SOX17蛋白。该产品为低温冷冻保存的细胞悬浮形式。本产品适合用于进一步诱导分化成为肝脏细胞类型或是胰脏细胞类型。特别地，Cellartis的肝脏细胞诱导分化试剂盒（Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit，Cat. No. Y30050）适合用于DE向肝脏细胞类型的诱导分化工作。
 
■ 产品特点
· Definitive endoderm cells with >90% SOX17-positive cells
· Can be used for generating further-specified cells of endodermal origin, such as hepatocytes or pancreatic endoderm
 
■ 关联产品
Code No. Product Size
Y10052 Cellartis® HEP Coat 3 ml
Y30012 Cellartis® DEF-CS™ 500 COAT-1 4 ml
T303 iMatrix-511 2 × 175 μg
T304 iMatrix-511 6 × 175 μg
Y30050 Cellartis® Hepatocyte Differentiation Kit 1 Kit
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞来源定型内胚层细胞
 
人iPS细胞来源定型内胚层细胞
Immunocytochemistry of Cellartis Definitive Endoderm Cells (from ChiPSC18). Cells were thawed, cultured for two days, fixed, and stained for the pluripotency marker OCT4, the definitive endoderm marker SOX17, and the nuclear marker DAPI. Results show that more than 90% of the cell population are definitive endoderm cells and have lost pluripotency.
 
 
 

页面更新：2019-12-25 09:45:34

人iPS细胞酶试剂盒Takara

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人iPS细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y00275 Cellartis® human iPS cell line 7 (ChiPSC7) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00285 Cellartis® human iPS cell line 12 (ChiPSC12) Kit 1 kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00315 Cellartis® human iPS cell line 21 (ChiPSC21) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00325 Cellartis® human iPS cell line 22 (ChiPSC22) Kit 1 kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
Cellartis Y00305 Cellartis® human iPS cell line 18 (ChiPSC18) Kit 1 Kit ￥23,108 人iPS细胞 人iPS细胞 人iPS细胞
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人iPS细胞
(Human Induced Pluripotent Stem Cells)
Cellartis人iPS细胞（Human iPS Cell Line）产品是达到了工业客户使用标准生产的干细胞产品。该产品包括细胞和用于增殖培养的Cellartis DEF-CS Culture System培养体系。iPS细胞已经在制品化时完成了对DEF-CS培养体系的适应。Cellartis DEF-CS Culture System培养体系是组分明确而且不依赖饲养层的便捷的干细胞培养体系。Cellartis DEF-CS Culture System适合高效率地增殖培养干细胞，并且保持干细胞在增殖过程中几乎无分化地生长，这使得不需要在大规模增殖培养过程中进行细胞筛选。因此，Cellartis人iPS细胞（Human iPS Cell Line）产品是一套完整的产品体系，对于科研级别和工业规模的需求都适合。
 
■ 产品特点
· Cell lines were created by reprogramming human skin fibroblasts using defective polycistronic retrovirus technology to deliver Oct-4, SOX2, KLF4, and c-Myc
· Cell lines are extensively analyzed for purity and stem-cell characteristics, including recovery after thawing, absence of mycoplasma and bacteria, expression of stem cell-specific markers (Oct-4, NANOG, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81), absence of differentiation markers (Beta-3 tubulin, FOXA2, ASMA), and expected karyotype
· Optimized for culture with the Cellartis DEF-CS Culture System
· Suitable for all major applications; cells can form derivatives of all three germ layers when differentiated
· Kits include the Cellartis DEF-CS 100 Culture System
 
■ 关联产品
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Y30010 Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System 1 Kit
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞
 
人iPS细胞
Characteristics of Cellartis human iPS cells. The cell lines were generated from fibroblasts using defective polycistronic retrovirus technology to deliver Oct-4, Sox-2, KLF-4, and c-Myc. The skin fibroblasts were obtained from donors of varying age and gender, have a normal karyotype, and have been confirmed to differentiate into specific cell lineages. Consent was obtained from all donors for commercial use.
 
参考文献：
1. de Peppo GM, et al. Osteogenic potential of human mesenchymal stem cells and human embryonic stem cell-derived mesodermal progenitors: a tissue engineering perspective. Tissue Eng Part A.2010 Nov;16(11):3413-3426.
2. Both SK, et al. Differential bone-forming capacity of osteogenic cells from either embryonic stem cells or bone marrow-derived mesenchymal stem cells. J Tissue Eng Regen Med.2011 Mar;5(3):180-190.
3. de Peppo GM, et al. Free-form-fabricated commercially pure Ti and Ti6A14V Porous Scaffolds support the growth of human embryonic stem cell-derived mesodermal progenitors. ScientificWorldJournal. 2012;2012:646417.Epub 2012 Jan 4.
4. Ou Li, et al. Human embryonic stem cell-derived mesenchymal stroma cells(hES-MSCs) engraft in vivo and support hematopoiesis without suppression immune function: implications for off –the shelf ES-MSC therapies. PLOS ONE.2013; 8(1):e55319.
 

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人iPS细胞培养系统酶试剂盒Takara

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人iPS细胞培养系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30010 DEF-CS™ 500 1 Kit ￥5,979 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统
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Human iPS和Human ES增殖用培养基
(DEF-CS Culture System, all-in-one format)
作为一款高端创新型的产品，Cellartis DEF-CS培养系统使得单细胞干细胞操作成为常规的操作。该产品是专门针对人类诱导干细胞（hiPS）和人类胚胎干细胞（hES）研发的高效率增殖用培养基产品体系。该产品系统为all-in-one型，包括了所有组分，客户不需要另外求购组分。该产品是成分确定的培养基产品，而且不需要饲养层。DEF-CS既可以实现单细胞培养，也可以用于传统的iPS培养模式以及大规模干细胞增殖。在使用DEF-CS培养基增殖干细胞时，几乎没有背景分化的问题，这使得细胞筛选不再必需。作为一款创新产品，利用DEF-CS培养干细胞时，可以使用酶消化法（enzymatic passaging）实现需要单细胞操作，这一特点十分有利于高通量细胞鉴别筛选（high-throughput screening）、转染（transfection）、框架接种（scaffold seeding）等。
 
■ 产品特点
· Feeder-free and chemically defined culture system for efficient expansion of human iPS cells
· Ideal system for culturing iPS cells; cells maintain pluripotency and long-term potential for self-renewal and differentiation
· Complete kit includes 500 ml basal medium, additives, and coating compound
· Robust system provides high reproducibility and stable growth
· Maintains cells in an undifferentiated state with virtually no background differentiation
 
■ 产品应用
· Scale-up and mass production of human iPS cells
· Single-cell culture of human iPS cells
· Transfection and reprogramming
· High-throughput screening
· Tissue engineering (seeding cells on a scaffold)
 
■ 产品详情请点击：人iPS细胞培养系统
 
人iPS细胞培养系统
Robust growth of human induced pluripotent stem (iPS) cells in the Cellartis DEF-CS Culture System. The number of iPS cells was quantified after being cultured for three weeks using either the Cellartis DEF-CS Culture System, a reference feeder system, or four other stem cell culture systems.
 
参考文献：
1. Sivertsson, Louise, et al. "Hepatic differentiation and maturation of human embryonic stem cells cultured in a perfused three-dimensional bioreactor." Stem cells and development 22.4 (2012): 581-594.
2. Hanson, Charles, et al. "Transplantation of human embryonic stem cells onto a partially wounded human cornea in vitro." Acta ophthalmologica 91.2 (2013): 127-130.
3. Norrman, Karin, et al. "Distinct gene expression signatures in human embryonic stem cells differentiated towards definitive endoderm at single-cell level." Methods 59.1 (2013): 59-70.
4. Ulvestad, Maria, et al. "Drug metabolizing enzyme and transporter protein profiles of hepatocytes derived from human embryonic and induced pluripotent stem cells." Biochemical pharmacology 86.5 (2013): 691-702.
5. Ramirez JM, et al. Side scatter intensity is highly heterogeneous in undifferentiated pluripotent stem cells and predicts clonogenic self-renewal. Stem Cells Dev.2013 Jun 15;22(12):1851-1860.
6. Borestrom, Cecilia, et al. “Footprint-free human induced pluripotent stem cells from articular cartilage with redifferentiation capacity: A first step toward a clinical-grade cell source.” Stem Cells Trans. Med. (2014) 3, 433-447.
7. Kia, Richard, et al. "MicroRNA-122: a novel hepatocyte-enriched in vitro marker of drug-induced cellular toxicity." Toxicological Sciences (2014): kfu269.
8. Valton, Julien, et al. "Efficient strategies for TALEN-mediated genome editing in mammalian cell lines."  Methods 69.2 (2014): 151-170.
9. Zandén, Carl, et al. "Stem cell responses to plasma surface modified electrospun polyurethane scaffolds." Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 10.5 (2014): 949-958.
10. Asplund, Annika, et al. “One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying? Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells” Stem Cell Rev and Rep (2015)
 
 

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Anti-Human iPS酶试剂盒Takara

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Anti-Human iPS
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara M221 Anti-Human Oct4, Monoclonal 0.1 mg Inquire Anti-Human iPS Anti-Human iPS Anti-Human iPS
Takara M222 Anti-Human Lin28, Monoclonal 0.1 mg Inquire Anti-Human iPS Anti-Human iPS Anti-Human iPS
Takara M223 Anti-Human Sox2, Monoclonal 0.1 mg Inquire Anti-Human iPS Anti-Human iPS Anti-Human iPS
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■ 制品内容
单克隆抗体 (冻干品) 0.1 mg
 
■ 制品说明
以基因重组Human Oct4全长蛋白质、Human Lin28全长蛋白质、Human Sox2肽 (219-236) [GSPTYSMSYSQQGTPGMA]-KLH复合物为免疫原获得的小鼠单克隆抗体。
克隆编号 特异性 亚型
Oct4 13-12F 与人Oct4特异性反应 Mouse IgG2b
Lin28 91-12A 与人Lin28特异性反应 Mouse IgG2b
Sox2 9B-12H 与人Sox2特异性反应 Mouse IgG2b
 
■ 保存
4℃。
本制品不含防腐剂。溶解后的抗体溶液 (2.0 mg/ml) 分成小包装后，-20℃可保存1年，添加0.1%NaN3后4℃可保存6个月。避免反复冻融，稀释后尽量不要保存。
 
■ 抗体溶解
使用50 μl灭菌蒸馏水溶解 (2.0 mg/ml，不含防腐剂)。
 
■ 用途
◇ 还原条件下的蛋白质印迹分析。
◇ 免疫细胞化学染色。
 
 

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iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System酶试剂盒Takara

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iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30055 Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System 1 Kit ￥13,846 iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
Cellartis Y30051 Cellartis® Hepatocyte Maintenance Medium 100 ml ￥2,198 iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
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iPS向肝脏细胞定向分化操作系统
(Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System)
以肝脏细胞为模型的实验越来越受到重视，在肝脏病变机理研究、药物代谢研究、药物毒理评估等方面有广阔的应用前景。然而，以个体原代肝细胞为材料来源会产生如取材困难、材料批间差大、无法长期稳定供应等一系列难以克服的问题。因此，通过iPS批量转化生产肝细胞的方法就显示出特别的优势。Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System可以稳定地、规模化地实现iPS向hepatocyte的诱导转化生产，而且诱导转化出的肝细胞能够稳定表达药物代谢相关酶系统和药物转运系统。
Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System是一套Do-It-Yourself系统，客户既可以对某个特殊病人来源的iPS实现转化，也可以利用cellartis供应的iPS进行标准化操作。使用本产品的过程起始于诱导人iPS转化成为确定性内胚层（Definitive Endoderm (DE)）细胞，然后诱导转化DE至肝细胞。本产品是All-In-One型产品，实验所需的培养基、基质（coating）等包括在内。应用本产品转化约3 × 106 hiPS cells,可以获得约5 × 106 肝细胞（大约50 cm2面积的单层贴壁细胞）。
利用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System转化得到的肝细胞除了清晰表现出肝细胞的必备特征外（如肝细胞特异性标志物、CYP系列酶等），还保留了原始细胞供体者的遗传基因背景。另外，相比较从组织切除获得的原代肝脏细胞（通常需要低温保存），通过本产品系统转化获得的肝细胞在更长的时间跨度上保持着生理功能的稳定性。这一点对于毒理学评估和病毒感染评估具有显著的意义。为长时间维持培养hiPS转化而来的肝细胞，我们推荐Cellartis Hepatocyte Maintenance Medium (Cat. No. Y30051)。
 
关于Cellartis 卓越的iPS Cell to Hepatocyte Differentiation技术的专项说明，请点击：
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■ 产品特点
· Highly reproducible, robust system—the exact same protocol has been shown to work across 25 different iPS cell lines, so no need to optimize for your lines.
· Ideal for drug metabolism and safety studies—consistently generate panels of >90% pure, functional, hiPS cell-derived hepatocytes with diverse genetic backgrounds.
· Customized starting materials—start with any disease-relevant iPS cell lines and create accurate liver disease models.
· Ready for personalized medicine—make patient-specific, disease-specific cells for therapeutic applications.
· Extended experimental window—hepatocytes can be used for a minimum of 11 days for functional tests.
 
■ 产品成分
· Cellartis DEF-CS 100 Culture System (Y30020, not sold separately)
· Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit (Y30030, not sold separately)
· Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit (Y30050)
 
■ 产品详情请点击：iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
 
iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
Immunocytochemistry analysis of hepatocyte differentiation. hiPS cells were differentiated into functional hepatocytes using the Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System. Hepatocytes were immunostained to detect early hepatic markers HNF4α (red, nuclear) and CK18 (green) on days 14 and 21. As the hepatocytes matured, expression of liver-specific markers CYP3A (red, cytoplasmic) and Albumin (green) increased as seen on day 28, as expected. Cell nuclei were stained with DAPI (blue).
 
参考文献：
Asplund, Annika, et al.One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying? Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev and Rep (2015).
 
用户分享：
◆ 东海大学医学部-纸谷聪英教授
   利用人iPS细胞体外构建多囊性肝病（Polycystic liver disease）模型
 
iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
纸谷聪英教授使用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）构建肝脏疾病模型的研究成果已刊登在Stem Cell Research。
【论文】
Akihide, K., Hiromi, C., Kinuyo, I., Emi, A., Kota, T., & Tatehiro, K., et al. (2018). An in vitro model of polycystic liver disease using genome-edited human inducible pluripotent stem cells. Stem Cell Research, 32, 17-24.
 
实验数据
 
iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
 
图：使用 Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）获得的人iPSC来源肝前体细胞（iPS-HPCs）诱导分化为胆管状Cyst结构。
（引用自文献Akihide Kamiya et al., Stem Cell Research, 2018）
 
访谈时间：
1. 开始使用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）的契机是什么？
很多研究组已经报道了多种从人iPS细胞诱导分化形成肝脏细胞的方法，我们研究组也在做相关工作。由于细胞分化不稳定，我担心使用饲养层细胞培养人iPS细胞会对肝脏分化产生影响，因此决定尝试使用Cellartis iPS细胞无饲养层培养系统Cellartis DEF-CS™ 500 Culture System（Y30010）和肝脏分化系统Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）。
 
2.实际使用后感觉如何？
与之前使用的饲养层培养方法相比，Y30010能更简便高效的进行培养；使用Y30055进行的肝脏分化非常稳定，进一步提升了实验效率。
 
3. 对暂未使用该制品的用户有什么寄语？
人iPS细胞向肝脏细胞分化过程中，细胞密度对分化效率有很大影响，进而影响实验结果。我认为Cellartis系统的优点主要在于各个实验阶段偏差小，结果稳定，适合追求实验效率的人。
 
 
◆ 东京医科齿科大学-柿沼晴教授
   先天性肝纤维化模型的开发和病理阐明的研究
 
iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System
柿沼晴教授使用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）构建肝脏疾病模型的研究成果已刊登在Journal of Hepatology。
 
【论文】
Tsunoda, T., Kakinuma, S., Miyoshi, M., Kamiya, A., Kaneko, S., & Sato, A., et al. (2019). Loss of fibrocystin promotes interleukin-8-dependent proliferation and ctgf production of biliary epithelium. Journal of Hepatology.
 
访谈时间：
1.开始使用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）的契机是什么？
一起进行研究的老师使用后能够进行稳定的培养，我们研究室也正好想利用无饲养层培养系统，所以开始使用了Cellartis DEF-CS™ 500 Culture System（Y30010）和肝脏分化系统Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30055）。
 
2.实际使用后感觉如何？
Y30010无饲养层培养系统使用比较简便，同时能够稳定的培养人iPS细胞。这次实验中，利用Y30055分化至肝前体细胞（iPS-HPCs），进一步诱导分化成了胆管细胞，我认为诱导分化的再现性好。不仅分化至成熟肝细胞谱系，同时相比于以往报道的方法，再现性更稳定。
 
3. 对暂未使用该制品的用户有什么寄语？
在人iPS细胞的培养和分化至肝细胞谱系的诱导中，即使是对人iPS细胞使用经验尚浅的实验者，也能够进行培养并得到稳定的再现。
 
 

页面更新：2020-01-16 16:00:18

Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector酶试剂盒Takara

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Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3671 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector 10 μg ￥10,014 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
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□ 浓度 0.5 μg/μl
     
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
Limited Use Label License: [L44], [M71]
 
■ 制品说明
本制品是制备Human iPS细胞诱导用逆转录病毒所使用的载体。在高效、高表达逆转录病毒载体pDON-5 DNA(Code No.: 3658)上，插入了iPS细胞诱导用基因OCT3/4和SOX2、KLF4、LIN28和NANOG，各基因以Thosea asigna virus 的2A*1序列连接在一个载体上。本载体与Retrovirus Packaging Kit Ampho(Code No.: 6161)中的pGP Vector以及pE-ampho Vector共转染至逆转录病毒制备用细胞G3T-hi(Code No.: 6163)后，可以制备iPS诱导用逆转录病毒。如此制备的重组逆转录病毒由于和RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)(Code No.: T100A/B)有高亲和性，所以在向目的细胞中导入基因时，使用经RetroNectin®处理后的培养皿或平板，可以得到较高的基因导入率，有效提高iPS细胞的诱导效率。
*1 5种基因转录在同一个mRNA上，翻译时在2A序列的特定位点被分割，使5种蛋白质可以等量表达。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 各载体的遗传信息
  基因名   GenBank Accession No.
  OCT4   NM_002701.4
  SOX2   NM_003106.2
  KLF4   NM_004235.3＊2
  LIN28   NM_024674.4
  NANOG   NM_024865.2
*2 更新的NM_004235.4中，CDS的5’端追加了对应9个氨基酸的碱基。本制品的KLF4基因中不含N端的这9个氨基酸的序列，已经确认可以有效诱导iPS细胞。
 
■ 载体图谱
Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
 
 
 
 

页面更新：2019-07-18 15:02:30

Mouse ES and iPS cell culture medium (2i)酶试剂盒Takara

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Mouse ES and iPS cell culture medium (2i)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y40031 Cellartis® 2i mES/iPSC Culture Medium 200 ml ￥3,158 Mouse ES and iPS cell culture medium (2i) Mouse ES and iPS cell culture medium (2i) Mouse ES and iPS cell culture medium (2i)
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小鼠ES/iPS细胞培养基（2i Medium）
Cellartis 2i mES/iPSC Culture Medium是一款无血清的、成分确定的细胞培养基，可用于小鼠ES和iPS细胞建系。该培养基含有两种小分子抑制剂（基于2i技术：CHIR99021、PD0325901），分别是用于抑制GSK3β和ERK/MEK介导的分化诱导信号通路，以及促进细胞增殖。
单独使用Cellartis 2i mES/iPSC Culture Medium，可以长期维持小鼠ES细胞处于原始状态和基态（Naive, ground state）或者小鼠iPS细胞处于完全多能性（Fully pluripotent）的状态。添加LIF（Leukemia Inhibitory Factor），可以通过调节Nanog信号通路使得Partial-iPS细胞或Pre-iPS细胞有效转化为具有完全多能性的iPS细胞(Silva et al. 2008; Silva et al. 2009).
2i技术也应用于从难获得具有生殖系能力（germline-competent）ES细胞的小鼠品系中建立ES细胞系(Nichols et al. 2009)，以及用于从人类和家畜物种中诱导iPS细胞(Wang et al. 2011; Malaver-Ortega et al. 2012)。
 
■ 产品特点
· 成分确定、无血清，促进细胞增殖并维持多能性状态
· 通过添加小分子抑制剂来阻断GSK3β和 ERK/MEK介导的分化诱导通路，并维持小鼠ES细胞和iPS细胞长期具备生殖系能力
· 添加 LIF，使Partial-iPS细胞或Pre-iPS细胞有效转化为具有完全多能性的iPS细胞
 
■ 产品应用
· 建立小鼠ES细胞系和iPS细胞系
· 长期维持纯的ES细胞或iPS细胞
· 使Partial-iPS细胞或Pre-iPS细胞转化为具有完全多能性的iPS细胞（需添加 LIF）
 
■ 产品组成
· 1 bottle (200 ml) of Cellartis mES/iPSC Culture Basal Medium
· 1 tube (200 μl) Cellartis 2i mES/iPSC Supplement
 
 
■ 产品详情请点击：Mouse ES and iPS cell culture medium (2i)
 
■ 参考文献
1. Malaver-Ortega, L. F. et al. The state of the art for pluripotent stem cells derivation in domestic ungulates. Theriogenology 78, 1749–1762 (2012).
2. Nichols, J. et al. Validated germline-competent embryonic stem cell lines from non-obese diabetic mice. Nat. Med. 15, 814–818 (2009).
3. Silva, J. et al. Promotion of reprogramming to ground state pluripotency by signal inhibition. PLoS Biol. 6, e253 (2008).
4. Silva, J. et al. Nanog is the gateway to the pluripotent ground state. Cell 138, 722–37 (2009).
5. Wang, W. et al. Rapid and efficient reprogramming of somatic cells to induced pluripotent stem cells by retinoic acid receptor gamma and liver receptor homolog. PNAS 108, 18283–18288 (2011).
 

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Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)酶试剂盒Takara

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Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y40011 Cellartis® 3i mES/iPSC Culture Medium 200 ml ￥4,226 Mouse ES and iPS cell culture medium (3i) Mouse ES and iPS cell culture medium (3i) Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
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小鼠ES/iPS细胞培养基（3i Medium）
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium是一款无血清的、成分确定的细胞培养基，可用于小鼠ES细胞的建系、多能性维持和增殖培养。该培养基含有三种小分子抑制剂（基于3i技术：ERK/MEK inhibitor、GSK3β inhibitor、FGFR-TK inhibitor），用于抑制分化诱导信号通路和促进细胞增殖，以及可以在无需额外添加细胞因子刺激的情况下维持多能性基态（Pluripotent ground state）。因此，Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium可以应用于多能性分子机制研究和分析。
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium也应用于从标准条件下难建立ES细胞的小鼠品系中建立ES细胞系(Ying et al. 2008)。相较于LIF（Leukemia Inhibitory Factor）+血清或BMP（Bone Morphogenetic Protein）条件下培养的小鼠ES细胞，使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养的小鼠ES细胞可以持续地以双倍速度扩增 (Ying et al. 2008; Kiyonari et al. 2010; Iijima et al. 2010)。此外，同样与LIF+血清或BMP条件下培养的小鼠ES细胞相比，使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养的小鼠ES细胞表现出更高的多能性克隆形成效率(Clonogenicity)。
 
■ 产品特点
· 成分确定、无血清、无饲养层、无细胞因子
· 通过添加小分子抑制剂来抑制分化诱导通路并维持小鼠ES细胞处于多能性状态
· 支持小鼠ES细胞增殖并维持≥99%纯度
 
■ 产品应用
· 维持小鼠ES细胞处于多能性状态
· 从难建系的小鼠品系中制备小鼠ES细胞
· 高效制备具有完全多能性的小鼠ES细胞
 
■ 产品组成
· 1 bottle (200 ml) of Cellartis mES/iPSC Culture Basal Medium
· 1 tube (200 μl) of Cellartis 3i mES/iPSC Supplement
 
 
■ 产品详情请点击：Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
 
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium维持小鼠ES细胞处于同质化、未分化状态。
Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
小鼠ES细胞系ES-E14TG2a分别使用Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium（A）和 GMEM-based medium（B）培养，通过碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase, AKP）染色检测ES细胞多能性，左边为染色前，右边为AKP染色后结果，可以看出Cellartis 3i Medium培养的小鼠ES细胞为均一的、未分化细胞。
 
Cellartis 3i mES/iPSC Culture Medium培养建立的小鼠ES细胞系具备高嵌合率。
Mouse ES and iPS cell culture medium (3i)
将ES细胞注射并植入胚胎后，通过出生小鼠个体的毛色来判断ES细胞的嵌合率。从Cellartis 3i medium培养建立的ES细胞所获得的小鼠均为黑色毛，即在单代内就获得了完全是ES细胞来源的嵌合体小鼠（A），具备高嵌合率。而从常规培养基培养建立的ES细胞所获得的嵌合体小鼠毛色混杂，未完全嵌合（B）。
 
■ 参考文献
1. Ying, Q. L. et al. The ground state of embryonic stem cell self-renewal. Nature 453, 519–23 (2008).
2. Kiyonari, H. et al. Three inhibitors of FGF receptor, ERK, and GSK3 establishes germline-competent embryonic stem cells of C57BL/6N mouse strain with high efficiency and stability. Genesis 48, 317–327 (2010).
3. Iijima, S. et al. Effect of different culture conditions on establishment of embryonic stem cells from BALB/cAJ and NZB/BINJ mice. Cell Reprogram. 12, 679–688 (2010).
 
 

页面更新：2020-07-13 10:08:12

iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System酶试剂盒Takara

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iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y50300 MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit 1 Kit ￥13,273 iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
Cellartis Y50301 MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit with DEF-CS™ 500 Culture System 1 Kit ￥18,627 iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
Cellartis Y50053 MiraCell® EC Culture Medium 500 ml ￥4,148 iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
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iPS向血管内皮细胞定向分化系统
(iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System)
MiraCell iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit用于人iPS细胞向血管内皮细胞定向分化诱导，试剂盒中包含2种包被剂、2种分化用基础培养基和6种培养基添加剂，足够支持1个T25培养瓶 (1.5×105 Cells）或3个6孔板单孔（1.8×105 cells）的iPS细胞进行内皮方向分化诱导，分化周期为12天（Day0至Day11）。建议分化起始的iPS细胞先使用Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System（Y30010）驯化3-5代，以确保iPS细胞处于良好的多能性状态。
诱导分化获得的高纯度（CD31阳性率＞80％＊）血管内皮细胞，经鉴定表达CD31、CD144、Tie2、VEGFR2等血管内皮标志物和具备小管（Tube）形成能力。分化好的血管内皮细胞(Day12以后)可以使用MiraCell EC Culture Medium(Y50053)长期扩大培养，也可以冷冻保存备用。（*起始的人iPS细胞株不同，得到的血管内皮细胞性能可能不同。）
 
本产品使用京都大学iPS细胞研究所开发的人血管内皮细胞的制备技术，由Takara和iHeart Japan公司共同研发，由Takara制造并销售。
 
■ 产品特点
· 完整的试剂盒，支持人iPS细胞-中胚层细胞-血管内皮细胞定向分化
· 多个iPS细胞株测试验证，支持高效分化诱导(>80%)
· 无需基因修饰和药物筛选过程，操作简便
· 获得的血管内皮细胞，可冷冻保存和扩大培养
 
■ 产品组成
MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit，Y50300
· Coating Reagent 1 (Day0 ＆ 2)；Coating Reagent 2 (Day11)
· EC Differentiation Basal Medium 1 (Day3～9)；EC Differentiation Basal Medium 2 (Day11)
· Supplement 1 (Day3)；Supplement 2 (Day4)；Supplement 3 (Day7)；Supplement 4 (Day8)；Supplement 5 (Day9)；Supplement 6 (Day11)
 
iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
 
MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit with DEF-CS™ 500 Culture System，Y50301
· MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit，Y50300
· Cellartis® DEF-CS™ 500 Culture System，Y30010
 
iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
 
■ 实验例
iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
图1. 3种人iPS细胞株使用MiraCell iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit分化诱导，获得的血管内皮细胞的形态比较(A)和标志蛋白质(B)比较。
 
iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
图2. 3种人iPS细胞株使用MiraCell iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit分化诱导，获得的血管内皮细胞继续使用MiraCell EC Culture Medium维持培养，可长时间维持高纯度。（）内的数值表示Day32的细胞扩大倍数，以Day8的细胞数为1。
 
iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation System
图3. 冷冻保存的、使用MiraCell iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit分化诱导的血管内皮细胞（Day16），在解冻复苏培养Day8后的小管形成实验结果。
 
 
 
产品详情请点击：http://catalog.takara-bio.co.jp/product/basic_info.php?unitid=U100009383
 
 

页面更新：2020-02-13 14:58:53

Human iPS Cell Editing Systems酶试剂盒Takara

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上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

Human iPS Cell Editing Systems
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y30021 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 1 kit ￥7,860 Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems
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从开始到结束：人iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统
Start-To-Finish hiPSC Editing and Single-Cell-Cloning Systems
人诱导多能干细胞（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型，因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外，人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响，因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。
CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具，因为其高的靶向特异性，编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单，因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可以决定靶向特异性（Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的（RNA-programmable）方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修复途径的易错特性，进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组（homology-directed repair，HDR)途径被用于基因敲入。
 
CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞，包括基于载体的表达系统，RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比，直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法，同时脱靶效应的可能性更小（Kim et al. 2014)。
 
一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入，为了分离和筛选感兴趣的基因型，单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的，因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常，这会导致细胞死亡和提前分化。然而，Cellartis单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基，包被剂，和添加剂组成)，用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统，规避了集落状培养带来的挑战，允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。
 
Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的，在无饲养层和成分确定条件下，用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
关联基因编辑系统：
一、电穿孔法基因编辑
通过电穿孔的方法对hiPSCs进行有效的基因编辑，Takara提供重组Cas9蛋白质和产生大量sgRNAs所有必要的试剂，用于电穿孔hiPSCs。后续与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
二、Gesicle法基因编辑
Gesicles法是一种无毒的、高效的、替代电穿孔的方法，不依赖昂贵的设备或耗材。通过Gesicle法导入Cas9/sgRNA复合物进行有效的基因编辑，Takara提供所有的必要试剂用于产生细胞衍生的纳米囊泡（Gesicles），来转导Cas9和sgRNA至hiPSCs。后续可与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
■ 产品特点
· Highly efficient gene editing in hiPSCs—use either electroporation or gesicles to deliver Cas9 protein and sgRNA with no genomic integration and reduced off-target effects
· Superior single-cell survival—edited hiPSCs exhibit high (typically ~50%) survival when seeded as single cells in a 96-well plate
· Maintenance of pluripotency after editing and during single-cell cloning—hiPSCs maintain high levels (>90%) of pluripotency markers Oct-4, TRA-1-60, and SSEA-4
· Stable karyotype from start to finish—maintain a normal and stable karyotype throughout editing, single-cell cloning, and expansion
· Flexibility to perform gene editing experiments your way—choose from complete kits that provide editing and single-cell cloning solutions using either electroporation-based or utilize the culture media kit (Code No. Y30021) to perform efficient single-cell cloning following your own editing experiments
· Continuous use of DEF-CS technology throughout gene editing/single-cell cloning experiments—use the Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010) before and during gene editing experiments, then during scale-up after single-cell cloning experiments
 
■ 产品组成
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
（Code No. Y30021，1 kit）
· Cellartis DEF-CS 500 Basal Medium (Code No. Y30011; 500 ml)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1 (Code No. Y30018; 2 × 800 μl)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Additives
   (Code No. Y30019; 2 × 750 μl, 1 × 500 μl, 1 × 500 μl)
 
关联基因编辑产品
电穿孔法基因编辑
Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (632635; 1 kit)
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) (632641; 100 μg)
Gesicle法基因编辑
Guide-it™ CRISPR/Cas9 Gesicle Production System (632613；1 kit)
 
■ 产品应用
· CRISPR/Cas9-mediated gene editing of hiPSCs
· Single-cell cloning of hiPSCs
· Disease modeling
 
■ 参考文献
Asplund, A. et al. One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev. Reports 12, 90-104 (2016).
Jinek, M. et al. A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity. Science 337, (2012).
Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J. & Kim, J.-S. Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Genome Res. 24, 1012-9 (2014).
Sander, J.-D. & Joung, J.-K. CRISPR-Cas9 systems for genomic editing, regulation and targeting. Nat. Biotechnol. 32, 347-55 (2014).
 
■ 产品详情请点击：Human iPS Cell Editing Systems
 
 
 
Human iPS Cell Editing Systems
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) growing in DEF-CS medium were edited with Cas9 and sgRNA specific to CD81. Pluripotency is maintained in edited human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) that have been seeded as single cells. 12 clonal lines created from single-seeded hiPSCs exhibit high levels of Oct-4 (97-99%), TRA-1-60 (98-99%), and SSEA-4 (98-99%).
  （图片来源于Takara Bio USA, Inc.）
 
 
 

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