Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测 货号22807-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测     货号22807 货号 22807 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 tests 价格 2544
Ex (nm) 613 Em (nm) 631
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位(MMP)的消失来检测细胞凋亡。 MMP的凋亡与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合,导致细胞色素C释放到细胞质中,进而触发了细胞凋亡级联反应中的其他下游事件。我们的Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒可通过优化的测定方法提供所有基本成分。荧光测定法使用我们专有的阳离子MitoTell Red检测MMP消失的细胞凋亡。在正常细胞中,当MitoTell Red堆积在线粒体中时,红色荧光强度会增加。但是,在凋亡细胞中,MMP凋亡后,MitoTell Red的荧光强度降低。 MitoTell Red染色的细胞可以通过荧光显微镜Cy5通道或荧光酶标仪读取。该试剂盒经过优化,可通过荧光酶标仪读取凋亡激活剂和抑制剂。而且该测定可以以方便的96孔和384孔荧光酶标仪进行检测,而无需清洗步骤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 610nm
发射: 650nm
cutoff: 630nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备细胞
  2. 添加测试化合物
  3. 添加MitoTell Red工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
  4. 将板在5%CO2、37°C的培养箱中孵育30分钟
  5. 添加测定缓冲液B(50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板)
  6. 在Ex / Em = 610/650 nm(截止= 630 nm)或使用Cy5滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加(底部读取模式)

 

溶液配制

将50 µL的200X MitoTell Red(组分A)添加到10 mL的测定缓冲液A(组分B)中,并充分混合以制成MitoTell Red工作溶液,避光。

 

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。注意:我们用20 µM CCCP处理HeLa细胞15分钟,以改变线粒体膜电位。CCCP或FCCP可以与MitoTell Red同时添加。为了获得最佳结果,可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

2.将100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoTell Red工作溶液加入细胞板。

3.在避光的条件下,将板在37ºC下孵育15-30分钟。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

4.将50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的测定缓冲液B(组分C)添加到细胞板中。注意:加载后请勿洗涤细胞。对于非贴壁细胞,建议在加入测定缓冲液B(组分C)后,以800 rpm离心细胞板2分钟,然后制动。

5.加入测定缓冲液B(组分C)后10到30分钟,用荧光酶标仪(Ext / Em = 610/650 nm(截止= 630 nm))检测荧光强度,或在荧光下用带Cy5滤镜的显微镜观察荧光信号。

 

参考文献

Safranine O as a fluorescent probe for mitochondrial membrane potential studied on the single particle level and in suspension
Authors: Perevoshchikova IV, Sorochkina AI, Zorov DB, Antonenko YN.
Journal: Biochemistry (Mosc) (2009): 663

Computer-assisted live cell analysis of mitochondrial membrane potential, morphology and calcium handling
Authors: Koopman WJ, Distelmaier F, Esseling JJ, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Methods (2008): 304

Determination of high mitochondrial membrane potential in spermatozoa loaded with the mitochondrial probe 5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethylbenzimidazolyl-carbocyanine iodide (JC-1) by using fluorescence-activated flow cytometry
Authors: Guthrie HD, Welch GR.
Journal: Methods Mol Biol (2008): 89

Effects of eprosartan on mitochondrial membrane potential and H2O2 levels in leucocytes in hypertension
Authors: Labios M, Martinez M, Gabriel F, Guiral V, Ruiz-Aja S, Beltran B, Munoz A.
Journal: J Hum Hypertens (2008): 493

Evaluation of sperm mitochondrial membrane potential by JC-1 fluorescent staining and flow cytometry
Authors: Xia XY, Wu YM, Hou BS, Yang B, Pan LJ, Shi YC, Jin BF, Shao Y, Cui YX, Huang YF.
Journal: Zhonghua Nan Ke Xue (2008): 135

How DASPMI reveals mitochondrial membrane potential: fluorescence decay kinetics and steady-state anisotropy in living cells
Authors: Ramadass R, Bereiter-Hahn J.
Journal: Biophys J (2008): 4068

Life cell quantification of mitochondrial membrane potential at the single organelle level
Authors: Distelmaier F, Koopman WJ, Testa ER, de Jong AS, Swarts HG, Mayatepek E, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Cytometry A (2008): 129

Mitochondrial membrane potential in axons increases with local nerve growth factor or semaphorin signaling
Authors: Verburg J, Hollenbeck PJ.
Journal: J Neurosci (2008): 8306

The mitochondrial membrane potential and Ca2+ oscillations in smooth muscle
Authors: Chalmers S, McCarron JG.
Journal: J Cell Sci (2008): 75

Cyclosporin A-induced oxidative stress is not the consequence of an increase in mitochondrial membrane potential
Authors: van der Toorn M, Kauffman HF, van der Deen M, Slebos DJ, Koeter GH, Gans RO, Bakker SJ.
Journal: Febs J (2007): 3003

说明书
Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测 .pdf