钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1 货号22002-AAT Bioquest荧光染料

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钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1    货号22002 货号 22002 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1236
Ex (nm) 501 Em (nm) 521
分子量 994.86 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂,钙黄绿素,也称为荧光素,荧光素复合物,是一种荧光钙指示剂,其激发和发射波长分别为495和515nm。钙黄绿素在100 mM以上的浓度下会自动猝灭。它用作EDTA滴定钙离子和荧光测定钙的络合指示剂,微溶于水。质子解离常数为pKa1的= 2.1,pKa2 = 2.9,pKa3 = 4.2,pKa4 = 5.5,pKa5 = 10.8和pKa6 = 11.7。钙黄绿素溶液在酸性条件下发出黄绿色荧光,而在碱性条件下不发出荧光。但是,钙黄绿素在碱性条件下在金属离子(例如Al,Ba,Cu,Mg和Zn)存在下发出荧光。因此,钙黄绿素还可以用于除Ca之外的这些重金属离子的直接荧光滴定。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙黄绿素。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
推荐孔板: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC
发射: FITC
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板
读取模式: 底读模式

产品说明书

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们在溶液中易于水解。 它们应在使用前用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)溶解。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯可以稳定数月。

        以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。最终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议长期储存含有Pluronic®F-127的AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议最终浓度范围为4至5μM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以保证每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

 

参考文献

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产品名称 货号
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说明书
钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1.pdf