荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK 货号13418-AAT Bioquest荧光染料

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荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK

荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK

荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK    货号13418 货号 13418 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 12336
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 1037.07 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱天冬酶的激活在细胞凋亡中起重要作用。 FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK为活细胞中活化的胱天蛋白酶-3的灵敏检测提供了方便的手段。 FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK是细胞可渗透的,无毒的,并且在凋亡细胞中不可逆地结合活化的胱天蛋白酶-3。 基于我们的内部研究,与我们测试的其他DEVD-FMK探针相比,FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK具有最高的信号/背景比。 FITC标签允许通过荧光显微镜,流式细胞术或荧光板读数器直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Activation of caspase-like activity and poly (ADP-ribose) polymerase degradation during sporulation in Aspergillus nidulans
Authors: Thrane C, Kaufmann U, Stummann BM, Olsson S.
Journal: Fungal Genet Biol (2004): 361

[Antitumor mechanism of 3-bromopropionylamino benzoylurea on leukemia and lymphoma]
Authors: Li JN, Song DQ, Jiang JD.
Journal: Yao Xue Xue Bao (2004): 491

Caspase-dependent and independent cell death in rat hepatoma 5123tc cells
Authors: Pandey S, Smith B, Walker PR, Sikorska M.
Journal: Apoptosis (2000): 265

C-myc antisense oligodeoxynucleotides can induce apoptosis and down-regulate Fas expression in rheumatoid synoviocytes
Authors: Hashiramoto A, Sano H, Maekawa T, Kawahito Y, Kimura S, Kusaka Y, Wilder RL, Kato H, Kondo M, Nakajima H.
Journal: Arthritis Rheum (1999): 954

说明书
荧光底物FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK.pdf