MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット MT-1 MitoMP Detection Kit　同仁化学研究所

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MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット MT-1 MitoMP Detection Kit　同仁化学研究所MT-1 MitoMP Detection Kit

05 細胞染色用色素

MT-1 MitoMP Detection Kit

MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット MT-1 MitoMP Detection Kit　同仁化学研究所

  • 細胞染色用色素
  • ミトコンドリア関連

MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット

  • 生細胞で使用できる、染色後に固定化できる
  • ミトコンドリア膜電位のモニタリングができる
  • ミトコンドリア膜電位の変化を高感度に検出できる
  • 製品コード
    MT13　 MT-1 MitoMP Detection Kit
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set ￥28,000 343-09781

＜使用回数の目安＞ 1 set あたり、35 mm dish 30 枚

キット内容
1 set MT-1 Dye
Imaging Buffer (10x) 		20 μl ×3本
11 ml ×1本

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技術情報

従来試薬の３つの課題を解決

ミトコンドリア膜電位を観察する際、JC-1やTMRE、TMRMが使用されていますが、PFA固定不可、光退色などの試薬特性により、データの再現性に課題がありました。MT-1 MitoMP Detection Kitは、これらの課題を克服したミトコンドリア膜電位の検出キットです。
さらに、本キットに含まれる Imaging Bufferにより、蛍光バックグラウンドと細胞へのダメージを抑えた状態で観察することができます。

参考文献

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文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1 細胞
(STHdh cell)		 蛍光顕微鏡 N. Okada, T. Yako, S. Nakamura, M. Shimazawa, H. Hara, "Reduced mitochondrial complex II activity enhances cell death via intracellular reactive oxygen species in STHdhQ111 striatal neurons Q1 with mutant huntingtin", J. Pharmacol. Sci., 2021, doi:10.1016/j.jphs.2021.09.001.
2 細胞
(膵臓癌細胞)		 蛍光顕微鏡 N. Okuni, Y. Honma, T. Urano, K. Tamura, "Romidepsin and tamoxifen cooperatively induce senescence of pancreatic cancer cells through downregulation of FOXM1 expression and induction of reactive oxygen species/lipid peroxidation", Mol. Biol. Rep., 2022, doi:10.1007/s11033-022-07192-9.
3 細胞
(BM Cells)		 蛍光顕微鏡 Y. Aoyagi, Y. Hayashi, Y. Harada, K. Choi, N. Matsumura, D. Sadato, Y. Maemoto, A. Ito, S. Yanagi, D. Starczynowski, H. Harada, "Mitochondrial Fragmentation Triggers Ineffective Hematopoiesis in Myelodysplastic Syndromes", Cancer Discovery, 2022, doi:10.1158/2159-8290.CD-21-0032.
4 細胞
(ハエの間接飛行筋肉細胞)		 蛍光顕微鏡 N. Nozawa, M. Noguchi, K. Shinno, M. Tajima, S. Aizawa, T. Saito, A. Asada, T. Ishii, M. Ishizuka, K. Iijima and K. Ando, "5-Aminolevulinic acid and sodium ferrous citrate ameliorate muscle aging and extend healthspan in Drosophila", FEBS Open Bio, 2022, doi:10.1002/2211-5463.13338.
5 細胞
(悪性中皮腫細胞)		 蛍光顕微鏡 Y. Sakai, M. Taguchi, Y. Morikawa, H. Miyazono, K. Suenami, Y. Ochiai, E. Yanase, T. Takayama, A. Ikari, T. Matsunaga, "Apoptotic mechanism in human brain microvascular endothelial cells triggered by 40-iodo-α-pyrrolidinononanophenone: Contribution of decrease in antioxidant properties", Toxicol. Lett., 2022, doi:10.1016/j.toxlet.2021.11.018.
6 細胞
(MIN6-M9)		 蛍光顕微鏡 R. Inoe, T. Tsuno, Y. Togashi, T. Okuyama, A. Sato, K. Nishiyama, M. Kyohara, J. Li, S. Fukushima, T. Kin, D. Miyashita, Y. Shiba, Y. Atobe, H. Kiyonari, K. Bando, A. S. Shapiro, K. Funakoshi, R. N. Kulkarni, Y. Terauchi, and J. Shirakawa, "Uncoupling protein 2 and aldolase B impact insulin release by modulating mitochondrial function and Ca2+ release from the ER", 2022, iScience,  doi:10.1016/j.isci.2022.104603.

よくある質問

Q

タイムラプスイメージングする場合の注意点はありますか？

A

注意点として、励起光を最大限に抑え、検出感度を上げた上でご撮影ください。
細胞への断続的な励起光の照射は、細胞へのダメージと蛍光色素の分解を引き起こす可能性がありますので、インターバルの時間などをご検討ください。

Q

本品で染色後、細胞の固定化は可能ですか？

A

染色後、4% PFAで細胞を固定化できますが、膜透過処理は色素が漏れ出す原因となるためできません。

Q

細胞を固定化後に染色することは可能ですか？

A

ミトコンドリア膜電位に依存してミトコンドリアに集積するため、固定化後の染色はできません。

Q

蛍光強度を比較する場合のポジティブコントロールになる実験例はありますか？

A

ポジティブコントロールとして、取扱説明書にFCCP(carbonylcyanide-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone)を用いた実験例を掲載しています。

Q

染色条件を検討する場合、MT-1 Dyeはどれくらいの濃度で使用すればよいですか？

A

MT-1 Dyeの濃度は1000倍希釈での使用を推奨しておりますが、染色条件を最適化される場合は以下をご参考ください。
　<蛍光強度が弱い場合>
　　500～1,000倍希釈の間でご検討ください。
　<非特異吸着がみられる場合>
　　1,000～2,000倍希釈の間でご検討ください。

Q

HBSSは どのようなものを使用すればよいですか？

A

フェノールレッドフリーのHBSS(+)をご使用ください。

(使用実績のあるHBSS)
製品名：HBSS(1x), 　メーカー：GIBCO, Code：14025-092

Q

MT-1 working solutionの添加後、洗浄操作を行わずに観察できますか？

A

染色後は未洗浄でも観察可能ですが、未洗浄での長時間観察は細胞毒性を生じる可能性があるため、お勧めしません。
上澄みを除いて、ご使用の培地へ置換することをお勧めします。

Q

MT-1 working solutionの調製にバッファーは使用できますか？

A

Hanks’ HEPES やHBSSが使用可能です。また、10 % FBS含有MEM、RPMI、MEMを用いて調製することもできます。

Q

MT-1で染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？

A

細胞へのダメージを軽減するため、HBSSの使用を推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお勧めします。

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取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット MT-1 MitoMP Detection Kit　同仁化学研究所
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