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品牌：Daicel
CAS No.： 储存条件：室温 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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383-01061 |
– | 1 EA | – | 咨询 | – | – |
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* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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| TRACP & ALP double-stain Kit | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | MK300 | TRACP & ALP double-stain Kit | 1 Kit | ￥2,423 |  |
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| 【产品规格变更通知】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 自2020年2月4日发货的lot开始（Lot. AJG0826A），本试剂盒中的细胞固定液【Fixation base solution】变更为不含有丙酮和乙醇的包装。 客户需要另外单独准备丙酮及乙醇（一般的试剂级别即可）。 |
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| 上述日期以前收到的产品，请使用此说明书 |
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■ 制品内容  |
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| ■ 制品说明 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 本制品是将成骨细胞的特异标志酶碱性磷酸酶 (ALP) 的显色基质和破骨细胞的特异标志酶抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRACP) 的显色基质直接加入到样品中，对碱性磷酸酶和酸性磷酸酶染色的同时并进行活性比较的双重染色试剂盒。同时与试剂盒中附带的核染色试剂组合使用，还可以观察到破骨细胞的多核。 有两种细胞在骨代谢中起着重要的作用，一种是吸收骨基质的破骨细胞，另一种是合成骨基质的成骨细胞，骨形成与骨吸收形成骨代谢平衡。通过对两种特异性标志酶的同时检出，可以分析骨相关细胞的分化及骨组织的分布情况。 本制品中的两种基质是预混型，配制反应液十分简便，可以在对碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶双重染色的同时并进行活性比较。如果需要使用水溶性基质，那么可以选择TRACP & ALP Assay Kit (Code No. : MK301)。使用时请根据实验目的进行选择。 |
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| ■ 保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| -20℃。开封后按照各试剂的适宜温度保存。 |
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| ■ 特点 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| ◇ 反应液的配制十分简便。 ◇ 可进行酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性的单独染色和双重染色。 ◇ 试剂盒中含有细胞固定液和核染色用试剂。 |
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页面更新：2020-02-12 11:09:07
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| TRACP & ALP Assay Kit | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | MK301 | TRACP & ALP Assay Kit | 500 次 | ￥2,403 | |
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| ■ 制品内容 |
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| ■ 制品说明 | ||||||||||||
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页面更新：2017-10-18 13:28:27
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| TRACP & ALP double-stain Kit | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | MK300 | TRACP & ALP double-stain Kit | 1 Kit | ￥2,423 | |
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| 【产品规格变更通知】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 自2020年2月4日发货的lot开始（Lot. AJG0826A），本试剂盒中的细胞固定液【Fixation base solution】变更为不含有丙酮和乙醇的包装。 客户需要另外单独准备丙酮及乙醇（一般的试剂级别即可）。 |
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| 上述日期以前收到的产品，请使用此说明书 |
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| ■ 制品内容 |
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| ■ 制品说明 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 本制品是将成骨细胞的特异标志酶碱性磷酸酶 (ALP) 的显色基质和破骨细胞的特异标志酶抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRACP) 的显色基质直接加入到样品中，对碱性磷酸酶和酸性磷酸酶染色的同时并进行活性比较的双重染色试剂盒。同时与试剂盒中附带的核染色试剂组合使用，还可以观察到破骨细胞的多核。 有两种细胞在骨代谢中起着重要的作用，一种是吸收骨基质的破骨细胞，另一种是合成骨基质的成骨细胞，骨形成与骨吸收形成骨代谢平衡。通过对两种特异性标志酶的同时检出，可以分析骨相关细胞的分化及骨组织的分布情况。 本制品中的两种基质是预混型，配制反应液十分简便，可以在对碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶双重染色的同时并进行活性比较。如果需要使用水溶性基质，那么可以选择TRACP & ALP Assay Kit (Code No. : MK301)。使用时请根据实验目的进行选择。 |
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| ■ 保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| -20℃。开封后按照各试剂的适宜温度保存。 |
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| ■ 特点 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| ◇ 反应液的配制十分简便。 ◇ 可进行酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性的单独染色和双重染色。 ◇ 试剂盒中含有细胞固定液和核染色用试剂。 |
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| TRACP & ALP Assay Kit | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | MK301 | TRACP & ALP Assay Kit | 500 Assays | ￥2,403 | |
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| ■ 制品内容 |
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| ■ 制品说明 | ||||||||||||
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页面更新：2017-10-18 13:28:09
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品牌：Daicel
CAS No.： 储存条件：室温 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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305-97451 |
– | 1 column | – | 咨询 | – | – |
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品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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291-58601 |
for Cellbiology | 900 tests | – |
替代品：633-51021 |
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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 Wako的LabAssay系列试剂盒是利用小鼠血清进行生化检测的试剂盒。使用微孔板检测，仅需少量样品，即可同时进行多样品检测。检测常规的临床生化指标（蛋白，酶，脂类物质）。
检测样品：血清、细胞、组织
检测范围：0~0.5mmol/L
检测灵敏度：>0.06mmol/L
相关动物模型：骨生长。
检测原理：p-对硝基苯酚磷酸盐作为碱性磷酸酶的底物。
TRAP/ALP染色试剂盒
破骨/成骨双重染色
正常的骨代谢是通过成骨细胞生长与破骨细胞建立骨吸收而维持平衡。成骨细胞的标记酶是碱性磷酸酶（ALP）。破骨细胞的标记酶是抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）。这两种标记酶在组织切片或者培养细胞过程中，被作为成骨细胞、破骨细胞存在的标记指标。
本试剂盒可通过骨组织切片以及培养细胞中TRAP/ALP酶活性进行组织染色。通过观察成骨细胞和破骨细胞的染色成像，可检查细胞的分化状态和骨组织的分布情况。
◆特点
● 使用时混合3种溶液，可制备TRAP酶活性染色的显色底物溶液。
● ALP酶活性染色使用的是预混物溶液，操作简便。
● TRAP的活性部位呈红紫色，ALP的活性部位呈蓝色（茶褐色），可双重染色。
● 适用于骨组织切片（脱钙GMA树脂包埋切片）以及培养细胞。
◆试剂盒组成
| ● 酒石酸溶液（×10）·······3 mL ● 酸性磷酸酶底物液A······30 mL ● 酸性磷酸酶底物液B······3 mL ● 核染色试剂··············10 mL ● 碱性磷酸酶预混物溶液····30 mL
<备注>本产品可对应培养细胞包装24孔板-5次，96孔板-6次。 骨组织载玻片（一个载玻片约使用500 μL）包装为60个。 |
◆培养细胞TRAP/ALP酶活性染色案例
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● 用TRAP染色剂使破骨细胞呈红色 ● 用ALP染色剂使成骨细胞的细胞膜、软骨细胞和细胞间膜呈茶褐色 ● 用核染色试剂使各种细胞核呈蓝绿色。 |
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RAW264细胞的TRAP活性染色 |
MC 3T3-E1细胞ALP活性染色 |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PMC-AK20-COS | Alkaline Phosphatase Staining Kit 碱性磷酸酶染色试剂盒 |
1 kit |
| PMC-AK04F-COS | TRAP Staining Kit 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒（TRAP） |
10 plate |
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石蜡切片骨相关酶（TRAP，ALP）双重染色
◆实验材料及方法
材料的获取：1年龄小鼠的上、下肢骨以及脊椎骨（切除软组织）
↓
一次固定：4%多聚甲醛溶液·10%福尔马林溶液
二次固定：纯乙醇
部分脊椎骨的非脱钙GMA树脂包埋处理，其他部分做脱钙处理。
↓
脱脂、脱钙：脱钙液是ZnSO4加EDTA溶液。（与其它方法相比）
脱钙装置Histra-DC（普通光）8~16℃连续操作。
↓
脱水、包埋：ETP（Sakura产品）处理16小时，使用融点为58-60℃嵌入式硬石蜡包埋。
部分右上肢和腰椎脱钙GMA树脂处理。
↓
薄切、干燥：制作4 μｍ切片，43℃伸展30分钟后，37℃干燥处理。
↓
染色、封装：TRAP/ALP染色试剂盒（Wako）染色，37℃干燥后，二甲苯透明处理
Malinol封装液封装
↓
镜检，染色性评估
◆标准标本制作
用之前使用的树脂包埋法或冷冻切片法制成的标本作为标准标本，和脱钙石蜡切片相比。即酒精固定小鼠肘关节，用乙二醇甲基丙烯酸树脂包埋，硬组织切片机制作2 μｍ切片，然后进行TRAP和ALP染色（图1）。还有脱钙冷冻切片也可以作为标准标本（图2）。然后，研究或改良固定、脱钙、染色等各阶段双重染色的可行性。
图1：标准标本（GMA树脂包埋）照片是本实验标准标本——小鼠肘关节染色标本。左图为TRAP染色，右图为ALP染色。下图是二者的双重染色。染色效果均佳。以此作为阳性对照，与脱钙石蜡切片一起染色，进行染色性评估。
图2：脱钙冷冻切片酶染色—将柠檬酸脱钙的小鼠腰椎和右上肢浸泡在30%蔗糖溶液，后经OCT复合包埋，Tissue‐tekPINO冻结，Cryo制作5μｍ冷冻切片。再对切片进行酶染色。不仅可进行TRAP染色（左：红色）和ALP染色（中：褐色）的单染色，双重染色（右）也呈阳性。
固定
ALP染色使用不能用福尔马林固定的新鲜材料，如果未在短时间内固定，会导致酶失活，因此推荐80%乙醇固定。①小鼠膝关节不进行一次固定，直接用乙醇直接浸泡进行二次固定组。②小鼠腰椎用福尔马林（4％多聚甲醛溶液）固定16小时后再用乙醇进行二次固定。③小鼠腰椎用福尔马林固定4天后进行二次固定。④临床案例也用福尔马林固定1个月后，再进行二次固定。对上述四种类型进行TRAP·ALP双重染色，研究染色的可行性。如图3所示。本实验证明福尔马林固定从16小时到4天时间范围内均可进行TRAP·ALP双重染色。
图3：福尔马林的1次固定的固定时间和TRAP/ALP的染色性研究—①是未经福尔马林固定，仅用酒精2次固定的样品，ALP染色呈强阳性。TRAP染色呈阴性。②是福尔马林固定16小时和③是固定4天，TRAP/ALP的染色效果均佳。并且，福尔马林固定1个月的临床案例（骨软骨瘤）中TRAP染色呈阳性，但不能ALP染色。
脱钙
ALP酶是含有金属Zn蛋白。通过脱钙处理，酶的组成成分Zn被去除，导致酶失活。为弥补此缺点，需要添加ZnSO4，作为ALP活化剂。换言之，100 mL脱钙液需添加0.4 mL 1%ZnSO4，来补充Zn离子。并且，作为脱钙剂，在柠檬酸盐酸缓冲液添加Zn的同时，也可尝试添加相同螯合剂EDTA溶液进行研究。另外，也可研究酸性脱钙剂（甲酸福尔马林溶液）能否进行酶反应。结果显示，脱钙液添加EDTA溶液后染色良好。反之，甲酸福尔马林溶液不能进行酶染色。（图4）脱钙方法利用超声波脱钙装置（Histra-DC，正常光）在8~16℃的低温环境下，连续操作3-6天，对样品进行脱钙处理。脱钙后用添加甘氨酸的巴比妥缓冲液（pH7.4）清洗，磷酸钙附着在组织上，防止沉淀。
图4：脱钙液的种类不同可否双重染色—左图是选用酸性脱钙溶液中对组织伤害较少的甲酸福尔马林
脱钙溶液脱钙3天（Histra-DC,8～16℃）后的大鼠膝关节。（Histra-DC，8-16℃）TRAP和ALP均不能染色。相对来说，中图、右图均可进行TRAP/ALP双重染色。
染色
染色法是Lorch的Gomori法。本次用的是偶氮染料法和耦合法结合的TRAP/ALP染色试剂盒（Wako，产品编号：294-67001）。对于切片的厚度，Lorch推荐8 μm，同时也研究了普通的4 μm切片是否能染色、双重染色的顺序应该先染TRAP和ALP中的哪一个、封片剂是否必须选水溶性封片剂等问题。
染色法结果：偶氮染料法中切片过厚导致酶扩散图像。即用TRAP染色骨质有红染倾向，但即使是4 μm厚度，只要增强反应条件（反应温度和反应时间），也能充分染色的。换言之，TRAP染色中反应温度从室温调至37℃，反应时间从30分钟调至45分钟或60分钟。ALP染色在37℃反应45分钟至3小时，或者室温下翻译时间至一晚。此结果显示，两者色调平衡，染色效果好。（图5）但是，反应条件的增强导致ALP染色切片产生了很多色素颗粒（图2）。另外，TRAP和ALP的染色顺序哪一个先染色都是可以的。如果先进行ALP染色时，在TRAP阳性部位呈明显的红色，鲜艳处为破骨细胞。获得比较好的标本。但是，ALP的反应产物经过TRAP溶液处理后，会产生白色混浊颗粒，沉淀在组织上。因此，先TRAP染色，接着ALP染色的方法是可行的。封装法是利用甲基绿数秒间核染色处理。水洗后，37℃下干燥，二甲苯浸透，用马里醇(Marinol)永久封存。在浸透前用推荐使用酒精脱水，但是会产生反应产物的溶解、扩散。
图5：脱钙石蜡包埋切片的TRAP/ALP双重染色—利用1年龄小鼠腰椎的EDTA脱钙石蜡切片，进行TRAP/ALP双重染色。TRAP阳性将破骨细胞染成红色，将强细胞活性的细胞（成骨细胞、软骨细胞）染成褐色。（上：弱扩大，下：强扩大）
◆相关资料
TRAP/ALP染色试剂盒说明书
参考文献
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 294-67001 | TRAP/ALP Stain Kit TRAP/ALP双重染色试剂盒 |
60次 | 病理研究用 |
病理学试剂
◆产品列表
|
产品编号 |
英文名称 |
中文名称 |
包装 |
|
干燥剂 |
|||
|
131-13531 |
Molecular Sieves Pack 3A |
分子筛3A型 |
25 g×10 |
|
染液 |
|||
|
294-67001 |
TRAP/ALP Stain Kit |
TRAP/ALP双重染色试剂盒 |
60次 |
|
296-21541 |
Berlin Blue Staining Set |
普鲁士蓝染色液套装 |
1 set |
|
298-21741 |
Weigert's Iron Hematoxylin Staining Set |
Weigert铁苏木素染色液套装 |
1 set |
|
202-14535 |
0.05%Toluidine Blue Solution(pH 2.5) |
0.05％甲苯胺蓝溶液（pH2.5） |
500 mL |
|
209-14545 |
0.05%Toluidine Blue Solution(pH4.1) |
0.05％甲苯胺蓝溶液（pH4.1） |
500 mL |
|
206-14555 |
0.05%Toluidine Blue Solution(pH7.0) |
0.05%甲苯胺蓝指示液（pH7.0） |
500 mL |
|
077-04711 |
0.1 mol/L Glycine-HCl Buffer Solution (pH 2.2) |
0.1 mol/L 甘氨酸-盐酸缓冲液（pH 2.2） |
1 L |
|
039-18165 |
0.1 mol/L Cacodylate Buffer (pH 7.4) |
0.1 mol/L甲次砷酸盐溶液（pH 7.4） |
500 mL |
|
036-18175 |
0.2 mol/L Cacodylate Buffer (pH 7.4) |
0.2 mol/L甲次砷酸盐溶液（pH 7.4） |
500 mL |
|
159-02245 |
0.8% Orange G Solution |
0.8%酸性橙10溶液 |
500 mL |
|
051-06515 |
1% Eosin Y Solution |
1％曙红Y溶液 |
500 mL |
|
015-13805 |
Alcian Blue Solution, pH2.5 |
阿尔新蓝8GX溶液，pH2.5 |
500 mL |
|
012-18055 |
Aniline Blue . Orange G Solution |
苯胺蓝-酸性橙10溶液 |
500 mL |
|
015-18045 |
Aniline Blue Solution |
苯胺蓝溶液 |
500 mL |
|
021-14861 |
Biebrich Scarlet Stain Solution |
比布里希猩红染色溶液 |
200 mL |
|
030-12931 |
Cacodylic Acid Iron Colloid Stock Solution |
二甲胂酸铁胶体溶液 |
100 mL |
|
032-14635 |
Carrazzi's Hematoxylin Solution |
Carrazzi's苏木精溶液 |
500 mL |
|
039-17705 |
Carrazzi's Hematoxylin Solution (×2) |
Carrazzi's苏木精溶液(×2) |
500 mL |
|
039-14645 |
Cold Schiff's Reagent |
冷席夫试剂 |
500 mL |
|
037-11601 |
Colloidal Iron Stock Solution |
胶态铁原液 |
100 mL |
|
038-17792 |
Crystal Violet |
结晶紫 |
25 g |
|
047-21911 |
Decalcifying Solution A |
Plank-Rychlo脱钙液A |
1 L |
|
041-22031 |
Decalcifying Solution B |
脱钙溶液B |
1 L |
|
056-06722 |
Eosin Y |
曙红Y溶液 |
25 g |
|
112-00651 |
Kalkitox |
Kalkitox脱钙液 |
1 L |
|
131-13732 |
Malachite Green Oxalate |
孔雀石绿草酸盐 |
25 g |
|
131-09665 |
Mayer's Hematoxylin Solution |
苏木素染液 |
500 mL |
|
138-11645 |
May-Grunwald's Eosin Methylene Blue Solution |
May-Grunwald's 伊红美蓝溶液 |
500 mL |
|
141-06822 |
Nile Blue Hydrogensulfate |
尼罗蓝硫酸盐 |
25 g |
|
140-08813 |
Nile Red |
尼罗红 |
100 mg |
|
144-08811 |
25 mg |
||
|
154-02072 |
Oil Red O |
油红O |
25 g |
|
152-02252 |
Orange G |
酸性橙10 |
25 g |
|
169-15615 |
Phosphotungstic Acid Hematoxylin Solution |
磷钨酸苏木精染剂 |
500 mL |
|
166-19765 |
Ponceau Xylidine . Acid Fuchsin . Azophloxine Solution |
二甲苯胺丽春红-酸性品红-酸性偶氮红溶液 |
500 mL |
|
191-08441 |
Schiff's Reagent |
席夫试剂 |
100 mL |
|
193-08445 |
500 mL |
||
|
196-16201 |
Sirius Red |
天狼星红 |
10 g |
|
194-16202 |
25 g |
||
|
206-18612 |
Thionin Acetate |
硫堇（劳氏紫） |
25 g |
|
208-18611 |
5 g |
||
|
221-01415 |
Van Gieson Solution F |
Van Gieson染色液F |
500 mL |
|
223-01475 |
Victoria Blue Solution |
维多利亚蓝染色液 |
500 mL |
|
固定溶液 |
|||
|
023-17361 |
Bouin Solution |
Bouin固定液 |
1 L |
|
192-16301 |
Softmount® |
SoftMount® 无毒型封片剂 |
250 mL |
|
263-01991 |
Zamboni Solution |
Zamboni固定液 |
1 L |
|
130-14307 |
Mildform 15N |
免疫组化固定液 Mildform 15N |
20 L |
|
132-14301 |
1 L |
||
|
137-14317 |
Mildform 15NM |
免疫组化固定液 Mildform 15NM |
20 L |
|
161-28321 |
PathoClean |
PathoClean病理标本二甲苯替代品 |
1 L |
|
169-28327 |
18 L |
||
|
034-17711 |
Carnoy Solution |
卡诺氏液 |
1 L |
|
023-17361 |
Bouin Solution |
布安氏液 |
1 L |
|
290-63201 |
PLP Solution Set |
PLP固定液套装 |
250 mL用 |
|
脱色液 |
|||
|
043-34561 |
deColorizing Solution 1 |
组织标本脱色剂溶液1 |
250 mL |
|
046-34551 |
deColorizing Solution 2 |
组织标本脱色剂溶液2 |
250 mL |
|
脱钙液 |
|||
|
196-11985 |
5% Sodium Sulfate Solution (for Decalcification) |
5％硫酸钠溶液（脱钙用） |
500 mL |
|
其他缓冲液 |
|||
|
208-14691 |
0.05 mol/L Tris-HCl Buffer Solution (pH7.6) |
0.05mol/L Tris-HCl缓冲溶液（pH7.6） |
1 L |
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
