大型干燥柜ALW型(自动型,模型:(ALW-A-NK)、层架:8块) 品牌:Sanplatec


大型干燥柜ALW型(自动型,模型:(ALW-A-NK)、层架:8块)

品牌:Sanplatec
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CD57 (NK-1)抗体 CD57 (NK-1)

CD57 (NK-1)抗体

CD57 (NK-1)

详细描述:
Over 100 cell surface markers have been identified through the use of monoclonal antibodies. Many of these markers have proven useful in identifying a specific subpopulation of cells within a mixed colony. Accordingly, these molecules have been assigned a

应用范围:WB, IP, IF, IHC(P), FCM; 反应种属:m, r, h; Isotype:mouse monoclonal IgM; 标记:无标记。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
sc-6261 CD57 (NK-1)抗体 200 µg/ml 咨询客服

CD57 (NK-1)抗体 (FITC 标记) CD57 (NK-1) FITC

CD57 (NK-1)抗体 (FITC 标记)

CD57 (NK-1) FITC

详细描述:
Over 100 cell surface markers have been identified through the use of monoclonal antibodies. Many of these markers have proven useful in identifying a specific subpopulation of cells within a mixed colony. Accordingly, these molecules have been assigned a

应用范围:WB, IP, IF, IHC(P), FCM; 反应种属:m, r, h; Isotype:mouse monoclonal IgM; 标记:FITC。

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sc-6261 FITC CD57 (NK-1)抗体 (FITC 标记) 200 µg/ml 咨询客服

CD57 (NK-1)抗体 (PE 标记) CD57 (NK-1) PE

CD57 (NK-1)抗体 (PE 标记)

CD57 (NK-1) PE

详细描述:
Over 100 cell surface markers have been identified through the use of monoclonal antibodies. Many of these markers have proven useful in identifying a specific subpopulation of cells within a mixed colony. Accordingly, these molecules have been assigned a

应用范围:WB, IP, IF, IHC(P), FCM; 反应种属:m, r, h; Isotype:mouse monoclonal IgM; 标记: PE。

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sc-6261 PE CD57 (NK-1)抗体 (PE 标记) 200 µg/ml 咨询客服

NK细胞相关因子

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NK细胞相关因子NK细胞相关因子


产品名称

规格

产品编号

包装

Interleukin-2   (IL-2), Human, recombinant

白介素-2(IL-2),人,重组体

生化学用

097-03951

50 μg

093-03963

1 mg

IL-2是受抗原或有丝分裂原刺激的T细胞所分泌的T细胞增殖因子。主要由CD4+T细胞分泌,但naïve B细胞和胸腺细胞也会分泌IL-2.

有人认为,IL-2在体外实验中,作为T细胞活化增殖因子,诱导CD4+和CD8+T细胞的增殖、分化;在体内实验中参与了CD4+ CD25+ Treg细胞在胸腺内的分化和在末梢中的增殖。

另外,IL-2作为激活淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、NK细胞、细胞毒性T细胞的诱导因子被人们熟知。

期待IL-2被用于癌症免疫疗法的临床应用中。

成人IL-2和小鼠、大鼠的氨基酸序列分别具有56%和66%的同源性。

细胞毒性:低于0.1 ng/μg

活性……ED50:低于0.1 ng/mL(比活性:相当于1×107 units/mg以上)

根据刺激小鼠CTLL-2细胞增殖的用量

参考文献:

1) Gillis, S.et al.: J. Immunol.,120,207(1978).

2) Fukuse, S. et al.: Int. Arch. Allergy Immunol., 99,411(1992).

表达宿主

分子量

大肠杆菌

15.5 kDa

形态/保存条件

法规

冻干品/-20℃

C10(CCL6),   Mouse, recombinant

C10(CCL6),小鼠,重组体

细胞

生物学用

032-22381

10 μg

小鼠C10是CC趋化因子家族之一。主要是通过与CCR1受体作用。在GM-CSF、M-CSF、IL-3、IL-4存在情况下,发现表达于培养的骨髓细胞中。C10对B细胞、CD4+T细胞、单核细胞、NK细胞有趋化活性。

Interleukin-15,   Human, recombinant,

 Animal-derived-free

白细胞介素-15,人,重组,无动物源

细胞

生物学用

095-07031

10 μg

091-07033

1 mg

本产品在培养、纯化过程中不使用动物来源的原料。

IL-15具有活化T细胞的作用,是NK细胞发育、激活、生存所必须的。另外,也认为IL-15的过度表达与类风湿关节炎、炎症性肠炎、HIV和HTLV-1相关疾病具有关联性。

IL-15是由115氨基酸残基组成的分子量为12.9 kDa的蛋白质。

α1-Acid   Glycoprotein, from Human Plasma

α1-酸性糖蛋白,人血浆来源

生化学用

017-24671

10 mg

本产品可选择性抑制由IFN-α和IFN-γ引起的NK细胞活化,是可在各种肿瘤中作为肿瘤标记物的糖蛋白。

Interferon-γ,   Human, recombinant, 

Animal-derived-free

IFN-γ,人,重组体,无动物源

细胞

生物学用

099-06113

1 mg

本产品是不使用动物来源原料进行培养、纯化的细胞因子。

干扰素-γ(IFN-γ)是由活化刺激的NK细胞、CD4+细胞、CD8+细胞产生的II型干扰素。IFN-γ在病毒感染时诱导具有抗病毒活性的分子转录,激活巨噬细胞。另外,在抗原提呈细胞、抗原标记B/T淋巴细胞中,IFN-γ信号传达还能够调节免疫应答对抗原的特异性。

Interleukin-4,   Human, recombinant, 

Animal-derived-free

白细胞介素-4,人,重组,无动物源

细胞

生物学用

093-05734

1 mg

本产品是在培养、纯化过程中不使用动物源原料的细胞因子。

IL-4主要由T细胞、NK-T细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞产生的具有多种功能的细胞因子。它作用于naïve   CD4+T细胞,通过表达GATA-3促进Th2的分化,进一步诱导产生负责体液免疫的细胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-10或IL-13。而且,它主要的功能是诱导IgM开始向IgG1以及IgE的免疫球蛋白类别转换。由Th2细胞引起的IL-4过量生成与IgE产生增加或过敏有关。

通过IL-4及GATA-3等相关分子的发现及其功能调节,期待能开发出过敏性疾病或自身免疫疾病的预防及治疗方法。

Interferon-γ,   Mouse, recombinant

IFN-γ,小鼠,重组体

生化学用

090-04703

1 mg

本产品是由受同种异体抗原、肿瘤、有丝分裂原刺激的活性T细胞和NK细胞产生的,它的作用涉及抗病毒、抑制肿瘤细胞的增殖、以及促进B细胞向抗体生成细胞的最终分化等多个方面。

对于细胞毒性TNF-α与IFN-γ具有部分协同效应,但由于特异性膜受体的存在,可以通过特异性膜受体作用于细胞。

Interferon-γ,   Human, recombinant

IFN-γ,人,重组

细胞生物

学用

099-05633

1 mg

干扰素(IFN)是由被病毒感染的细胞产生的病毒生长抑制蛋白,是具有抑制细胞生长、抗肿瘤、免疫调节等生物防御作用的细胞因子。

IFN-γ是淋巴细胞、NK细胞、树突状细胞或巨噬细胞产生的Ⅱ类干扰素。IFN受体在大多数免疫细胞中表达,IFN受体增加可提高细胞表面MHCⅠ类分子的表达,促进CD4辅助性T细胞的抗原识别。而且还会刺激巨噬细胞、NK细胞或中性粒细胞的抗菌作用、抗肿瘤作用以及淋巴细胞活性。

 

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

NK 细胞抑制剂 Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

  • 产品特性
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NK细胞抑制剂NK 细胞抑制剂                              Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)



糖脂神经节苷脂GM1(ASGM1)在感染病毒时的T细胞及自然杀伤(NK)细胞中表达。ASGM1局部存在于NK和CD8(+)细胞的脂筏结构中,抗Asialo- GM1抗体可降低在各种小鼠、大鼠中的NK细胞活性。

接种抗Asialo-GM1抗体至实验动物,去除NK细胞,用于NK细胞的功能分析或移植其他物种来源的肿瘤组织至小鼠体内1)2)

ASGM1也在嗜碱性细胞中表达,有报告称,抗Asia-GM1抗体也可用于去除嗜碱性细胞3)

■ 参考文献


1)

Kasai M., Iwamori M., Nagai Y., Okumura K., and Tada T. : J. Immunol., 10, 175 (1980).

2)

Habu S., Fukui H., Shimamura M., Kasai M., Nagai Y., Okumura K., and Tamaoki N. : J. Immunol., 127, 34 (1981).

3)

Hideto, N., Kaori, M., Yohei, K., Yoshiyuki, M., and Hajime K., .: J. Immunol., 186, 10, 5766(2011)

原理介绍


   Anti Asialo-GM1(Rabbit)抗血清可以减少大鼠或者小鼠来源的自然杀伤细胞(NK 细胞)的活性。该抗体可以与 NK 细胞发生特异性结合,从而抑制 NK 细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。NK 细胞是一种免疫监视细胞,其靶细胞包括肿瘤细胞、同种异体移植的器官、组织等。可运用于药物筛选,器官移植,自身免疫疾病等研究。

  每个产品有具体的体内外的滴定数据。

◆特点


● 已经体内NK细胞活性验证

● 众多文献应用案例


 特性

 抗Asialo-GM1抗体、冻干品

 免疫方法

 牛脑组织纯化的Asialo-GM1甲基化BSA(bovine   serum albumin),与FCA(Freund’s complete adjuvant)

 同时对兔免疫。

 纯化方法

 50%硫酸铵盐化后,使用含有磷酸缓冲液(pH=7.2)的生理盐水透析。

 特异性

 与小鼠、大鼠的NK细胞以及小鼠胚胎胸腺细胞反应。

 复溶

 请在1 mL蒸馏水中复溶。建议使用磷酸缓冲液(pH 7.2)进行稀释。

 接种方法

 一只小鼠静脉注射10~50 μL。


◆注射方法


小鼠-静脉注射:

10-50 μL(推荐 20 μL)具体剂量由滴度和规格而定。第一次注射在4天内有效,因此两周内需要注射3-4次。

大鼠-静脉注射:

50-250 μL(小鼠剂量的4或5倍)具体剂量还须考虑大鼠的健康状况、体重和 NK 活性。

小鼠和大鼠-腹腔给药:

同等剂量或多于静脉注射。


产品信息


 

制备:

 

从牛脑组织里提纯的 Asialo-GM1 与甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐剂一起使用,可进行反复免疫。用含有磷酸缓冲盐水(ph7.2)的 50% 硫酸铵透析后,得到血清里的丙种球蛋白(Gammaglobulin)片段。

内容:

含有唾液酸抗体 GM1 的兔血清 50% 硫酸铵盐析分层物(含蛋白量约 10 mg/mL)。

提纯法:

50% 的硫酸铵盐析后 ,用含有磷酸缓冲液的生理盐水透析,然后冻干。

特异性:

作用于小鼠和大鼠的自然杀伤细胞;小鼠单核细胞(是一种不含自然杀伤细胞、骨髓、胎儿肝细胞和裸鼠脾脏巨噬细胞的肝细胞);小鼠胎儿胸腺细胞(12日龄;生存率不断降低直到没有出现新生小鼠)(备注:如果浓度高,也能作用于成熟的T淋巴细胞)

免疫球蛋白类型:

IgG、IgA 和 IgM

重组:

建议用蒸馏水(1 mL)。由于该产品是使用盐来进行冻干的,如果用其它溶剂如 PBS 或 MEM,就能增加其盐浓度。

抗体滴度:

通过免疫凝聚实验得出结果,抗体滴度比例约 1 : 1,000

保存方法:

存储在2~10℃下

包装规格:

1mL样瓶

形状:

干冻品


NK 细胞抑制剂                              Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

 

 欲了解详情请看相关资料


应用案例

 

 适用的动物模型

 运用

 肿瘤动物模型

 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型内,研究抗肿瘤药物的作用机理。

 肝纤维化动物模型

 与治疗肝纤维化的药物混合后注入动物模型体内,研究抗肝纤维化药物的作用机理。

 器官移植动物模型

 器官移植后,会产生免疫排斥反应,机体内的免疫监视会清除”异己“的细胞和器官。

 可用于研究器官移植后使用的免疫抑制剂的作用机理

 自身免疫疾病动物模型

 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。

 干细胞动物模型

 抑制 NK 细胞的活性,从而有利于干细胞动物模型的建立。

 糖尿病动物模型

 研究炎症与糖尿病的关系。



◆抗Asialo-GM1抗体体外活性


向抗Asialo-GM1抗体中添加豚鼠来源补体,并在BALB/c小鼠的胰腺细胞中进行处理。通过靶向YAC-1细胞(●)体外检测NK活性。

效应子/靶标的比率为50:1,○表示补体处理后BALB/c小鼠胰腺细胞的NK活性。

※ BALB/c小鼠经聚(I:C)钠盐100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)处理后,正常饲养18小时后开始下一步操作。


NK 细胞抑制剂                              Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)



◆抗Asialo GM1抗体体内活性


向BALB/c小鼠腹腔内注射抗Asialo-GM1抗体,并检测单次给药(效应子/靶标= 50:1)3天后收集的胰腺细胞对YAC-1细胞的肿瘤溶解度。

※ BALB/c小鼠经聚(I:C)钠盐100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)处理后,正常饲养18小时后开始下一步操作。



■ 对照:正常兔血清

腹腔注射量

肿瘤溶解度(%)

100 μL

70.8

■ 抗Asialo-GM1抗体

腹腔注射量

肿瘤溶解度(%)

10 μL

7

25 μL

8.4

50 μL

2

100 μL

0

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相关资料

NK 细胞抑制剂                              Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

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◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

产品等级

017-26751

Anti ATRX, Monoclonal Antibody (AMab-6)

抗ATRX,单克隆抗体(AMab-6)

100 μg

免疫化学用

013-27191

Anti HB-EGF, Monoclonal Antibody(Y-073)

抗HB-EGF,单克隆抗体(y-073)

10 μL

免疫化学用

019-27193

50 μL

014-26381

Anti IDH1, Rat Monoclonal Antibody (RcMab-1)

抗IDH1,大鼠单克隆抗体(RcMab-1)

100 μg

免疫化学用

018-24081

Anti IDH1-R132H, Monoclonal Antibody (HMab-1)

异柠檬酸脱氢酶1   R132H抗体(HMab-1)

100 μg

免疫化学用

013-26851

Anti IDH1-R132H, Monoclonal Antibody (HMab-2)

抗IDH1-R132H,单克隆抗体(HMab-2)

100 μg

免疫化学用

015-24091

Anti IDH1-R132S, Monoclonal Antibody (SMab-1)

异柠檬酸脱氢酶1   R132S抗体(SMab-1)

100 μg

免疫化学用

011-24071

Anti IDH2, Monoclonal Antibody (RMab-22)

异柠檬酸脱氢酶2抗体(RMab-22)

100 μg

免疫化学用

015-25691

Anti Mutated IDH1/2, Monoclonal Antibody (MsMab-1)

抗突变IDH1 / 2,单克隆抗体(MsMab-1)

100 μg

免疫化学用

011-27491

Anti Human Podocalyxin, Monoclonal Antibody (PcMab-47b)

抗人Podocalyxin,单克隆抗体(PcMab-47b)

100 μg

免疫化学用

018-24101

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (NZ-1.2)

人平足蛋白抗体(NZ-1.2)

100 μg

免疫化学用

013-27071

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-10)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-10)

100 μg

免疫化学用

014-27001

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-12)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-12)

100 μg

免疫化学用

011-27011

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-13)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-13)

100 μg

免疫化学用

018-27021

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-17)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-17)

100 μg

免疫化学用

017-27471

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-19)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-19)

100 μg

免疫化学用

014-27481

Anti Human Podoplanin, Monoclonal Antibody (LpMab-21)

抗人平足蛋白,单克隆抗体(LpMab-21)

100 μg

免疫化学用

015-27031

Anti Rat Podoplanin, Monoclonal Antibody (PMab-2)

抗大鼠平足蛋白,单克隆抗体(PMab-2)

100 μg

免疫化学用

012-27041

Anti Rabbit Podoplanin, Monoclonal Antibody (PMab-32)

抗兔平足蛋白,单克隆抗体(PMab-32)

100 μg

免疫化学用

015-24111

Anti Mouse Podoplanin, Monoclonal Antibody (PMab-1)

鼠平足蛋白抗体(PMab-1)

100 μg

免疫化学用

017-27091

Anti Dog Podoplanin, Monoclonal Antibody (PMab-38)

抗犬Podoplanin,单克隆抗体(PMab-38)

100 μg

免疫化学用

010-26861

Anti TERT, Monoclonal Antibody (TMab-6)

抗TERT单克隆抗体(TMab-6)

100 μg

免疫化学用

[1]

Nishikado H, Mukai K, Kawano Y, et al. NK cell-depletinganti-asialo GM1 antibody exhibits a lethal off-target effect on basophils invivo[J]. The Journal of Immunology, 2011, 186(10): 5766-5771.

[2]

Kasai, M., Iwamori, M., Nagai, Y., Okumura, K. and Tada, T.: Eur. J. Immunol., 10, 175 (1980)

[3]

Habu, S., Fukui, H., Shimamura, M., Kasai, M., Nagai, Y., Okumura, K. and Tamaoki, N.: Immunol., 127, 34 (1981)

[4]

Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139.

[5]

Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015), Article ID 532717, 10 pages.

[6]

Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083

[7]

Ivanova, D. L., Denton, S. L., & Gigley, J. (2019). Anti-Asialo GM1 treatment during secondary Toxoplasma gondii infection is lethal and depletes T cells. bioRxiv, 550608.

[8]

Sung, C. C., Horng, J. H., Siao, S. H., Chyuan, I. T., Tsai, H. F., Chen, P. J., & Hsu, P. N. (2020). Asialo GM1-positive liver-resident CD8 T cells that express CD44 and LFA-1 are essential for immune clearance of hepatitis B virus. Cellular & Molecular Immunology, 1-11.

[9]

Fujii, Y., Gerdol, M., Kawsar, S. M., Hasan, I., Spazzali, F., Yoshida, T., … & Sugawara, S.

(2019). A GM1b/asialo‐GM1 oligosaccharide‐binding R‐type lectin from purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP kinases. The FEBS journal.

[10]

Kikuchi, N., Ye, J., Hirakawa, J., & Kawashima, H. (2019). Forced expression of CXCL10

prevents liver metastasis of colon carcinoma cells by the recruitment of natural killer cells. Biological and Pharmaceutical Bulletin, 42(1), 57-65. 

[11]

Jones, N. M., Yang, H., Zhang, Q., Morales-Tirado, V. M., & Grossniklaus, H. E. (2019). Natural killer cells and pigment epithelial-derived factor control the infiltrative and nodular growth of hepatic metastases in an Orthotopic murine model of ocular melanoma. BMC cancer, 19(1), 484. 

[12]

Vandenhaute, J., Avau, A., Filtjens, J., Malengier-Devlies, B., Imbrechts, M., Van den Berghe, N., …& Wouters, C. (2019). Regulatory Role for NK Cells in a Mouse Model of Systemic Juvenile Idiopathic Arthritis. The Journal of Immunology, 203(12), 3339-3348.

[13]

Junqueira-Kipnis, A. P., Trentini, M. M., Marques Neto, L. M., & Kipnis, A. (2020). Live

Vaccines Have Different NK Cells and Neutrophils Requirements for the Development of a Protective Immune Response Against Tuberculosis. Frontiers in Immunology, 11, 741. 

[14]

Murer, P., Kiefer, J. D., Plüss, L., Matasci, M., Blümich, S. L., Stringhini, M., & Neri, D. (2019). Targeted delivery of TNF potentiates the antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity of an anti-melanoma immunoglobulin. Journal of Investigative Dermatology, 139(6), 1339-1348.

[15]

Turaj, A. H., Dahal, L. N., Beers, S. A., Cragg, M. S., & Lim, S. H. (2017). TLR-3/9 Agonists

Synergize with Anti-ErbB2 mAb. Cancer research, 77(12), 3376-3378.

[16]

Sorski, L., Melamed, R., Matzner, P., Lavon, H., Shaashua, L., Rosenne, E., & Ben-Eliyahu, S. (2016). Reducing liver metastases of colon cancer in the context of extensive and minor surgeries through β-adrenoceptors blockade and COX2 inhibition. Brain, behavior, and immunity, 58, 91-98.

◆其他文献

本公司的抗Asialo-GM1抗体在以下为代表的各种文献中均有应用案例。

1. 

Hudson, W. A., Li, Q., Le, C., and Kersey, J. H., : Leukemia12, 2029 (1998).


2. 

Murphy W. J., Durum S. K., Longo D. L., : PNAS, 89, 10, 4481 (1992).


3. 

Bentzmann S., Roger P., Dupuit F., Bajolet-Laudinat O., Fuchey C., Plotkowski C. M., Puchelle E. : Infection and immunity64, 5, 1582 (1996).


4. 

Nishikado H., Mukai K., Kawano Y., Minegishi Y., Karasuyama H. : J. Immunol., 186, 10, 5766(2011).


5. 

Victorino, F., Sojka, K. D., Brodsky, S. K. McNamee, N. E., Masterson, C. J., Homann, D., Yokoyama, M. W., Eltzschig, K. H., Clambey, T. E., : J. Immunol., 195, 10, 4973(2015).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
014-09801(986-10001) Anti asialo GM1 (Rabbit) 
NK细胞抑制剂
1 mL for Immunochemistry

BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源) BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs

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BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)                              BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs

 

◆原理

 

  BINKIT® 可从外周血单核细胞扩增高活性的自然杀伤(NK)细胞。

 


◆优点・特色

 

● 无需饲养层细胞,即可从外周血细胞(PBMCs)中扩增 NK 细胞

● 3周时间内 NK 细胞的数目可扩增几百到几千倍

● NK 细胞将获得增强的细胞杀伤性

● 该试剂盒适合 20~50 mL 的外周血细胞

● 无动物来源蛋白(含人白蛋白)

 

 

◆案例・应用

 

<试剂盒组成>


● NK 细胞初始培养基

● NK 细胞初始培养瓶

● NK 细胞传代培养基

● BINKIT® 明细表( PDF 格式)

 


<未提供材料>


● Ficoll 淋巴细胞分层液(GE Healthcare)

● 无菌 PBS

● FBS 或自体血浆(56℃ 加热 30 分钟以灭活)

 


<结果>


BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)                              BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs

 

图 1 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增


利用 BINKIT® 对外周血单核细胞进行 NK 细胞扩增,CD3-CD56+ 细胞从 15.8% 增加到 88.6% 。

 BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)                              BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs


图 2 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增


利用 BINKIT® 对外周血单核细胞(来自健康自愿者,HD, n=3)进行 NK 细胞扩增。

细胞计数(左)和倍率的变化(右)表明 NK 细胞体在外高效扩增。

 

BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)                              BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs 


图3  使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增


分别以 BINKIT 扩增的 NK 细胞(实线)和从3名志愿者新鲜分离的 NK 细胞(虚线)来检测 NK 细胞对 K562 细胞的杀伤性。

结果表明,扩增后的 NK 细胞对 K562 细胞杀伤性显著增强(P< 0.01)。

 


<培养步骤>


(1) 准备试剂

在 NK 细胞初始培养基和 NK 细胞传代培养基中,加入5% (v/v) 的热灭活 FBS 或自体血浆。

 

(2) 制备外周血单核细胞(PBMCs)

通过 Ficoll 密度梯度离心,从人全血中分离外周血单核细胞。

 

(3)清洗NK细胞初始培养瓶

加入 10 mL PBS 至 NK 细胞初始培养瓶。倾斜培养瓶使 PBS 覆盖整个表面。

将培养瓶中液体全部倒出,小心以免刮伤培养瓶的表面。重复洗涤过程两次。

 

(4)从PBMCs中培养NK细胞

将 1×106 cells/mL 的 PBMCs 悬浮于 NK 细胞初始培养基中。每 1 mL 细胞悬浮液加入 40 μL 的 NK 细胞初始混合物。

细胞悬液转移至预洗涤的 NK 细胞初始培养瓶,在 37℃,5%的 CO培养3天。

 

(5)更换培养基及传代

同贴壁细胞处理一样,转移时置于锥形离心管,200×g 离心8分钟。

去除上清,将 1×106 cells/mL 细胞悬浮于添加了5% (v/v) 热灭活 FBS 或自体血浆的NK细胞传代培养基中。

转移后的悬浮细胞置于常规培养瓶中,在 37℃,5% CO条件下培养。

每2-3天将 0.8×106 cells/mL 细胞置于完全 NK 细胞传代培养基中,进行传代培养。

 

<建议培养期>

2-3周

 

注意:试剂仅供科研使用,不可用于临床。 

 

参考文献

1.

Xuewen Deng, Hiroshi Terunuma, Mie Nieda, Weihua Xiao, Andrew Nicol, Synergistic cytotoxicity of ex vivo expanded natural killer cells in combination with monoclonal antibody drugs against cancer cells, Int Immunopharmacol, 14 (2012) 593-605 PMID: 23063974

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
BIJ-N501-1 BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs 
BINKIT ®  NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源)
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