Anti DYKDDDDK tag Antibody Magnetic Beads DYKDDDDK标签抗体磁珠品牌：Wako

发表于2024年4月22日由上海金畔生物科技有限公司

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–

产品编号 (生产商编号)	等级	规格	运输包装	零售价(RMB)	库存情况	参考值
013-25153	for Immunochemistry	2 ml×5	–	24,680.00	–	–

* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用

* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 DYKDDDDK标签单克隆抗体树脂，用于竞争性洗脱来纯化DYKDDDDK标签重组蛋白[组成]
0.99% Anti-DYKDDDDK磁珠, 50%(w/v)甘油, 1×TBS缓冲液和0.05%(w/v) 叠氮化钠.
克隆号：1E6
抗体亚型：IgG2b

Anti DYKDDDDK tag Magnetic Beads 抗DYKDDDDK标签磁珠品牌：Wako

发表于2024年4月12日由上海金畔生物科技有限公司

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–

产品编号 (生产商编号)	等级	规格	运输包装	零售价(RMB)	库存情况	参考值
017-25151	for Immunochemistry	2 ml	–	6,060.00	–	–

* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用

PA tag Washing Solution PA 标签洗涤溶液品牌：Wako

发表于2024年1月6日由上海金畔生物科技有限公司

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：室温
纯度：–

产品编号 (生产商编号)	等级	规格	运输包装	零售价(RMB)	库存情况	参考值
169-27261	for Genetic Research	50 ml	–	1,350.00	–	–

* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 PA标签树脂纯化PA标签融合蛋白时候

Multitope, Denatured, recombinant, Solution 表位标签（变性）重组溶液品牌：Wako

发表于2024年1月4日由上海金畔生物科技有限公司

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–

产品编号 (生产商编号)	等级	规格	运输包装	零售价(RMB)	库存情况	参考值
133-16374	for Immunochemistry	2 ml	–	咨询	–	–

* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用

产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 74 kDa的重组蛋白，含7 种抗原表位标签(TRX、GFP、HA、DYKDDDDK、GST、6 x His、c-Myc) 用于标签融合蛋白质的阳性对照。

DYKDDDDK标签蛋白质免疫沉淀 Buffer Set(FLAG标签)酶试剂盒Takara

发表于2023年9月25日由上海金畔生物科技有限公司

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DYKDDDDK标签蛋白质免疫沉淀 Buffer Set(FLAG标签)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635687	Immunoprecipitation Buffer Set	30 Rxns	￥6,519

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■ 产品描述

DYKDDDDK标签（FLAG标签）是常用的亲水性八肽标签，是鉴定和监控DYKDDDDK（FLAG）标签蛋白质表达的理想选择。将高特异性的anti-DYKDDDDK单克隆抗体（不与内源性的蛋白质产生交叉反应）与琼脂糖珠交联，即可用来从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀DYKDDDDK（FLAG）标签蛋白质。本制品是用于DYKDDDDK（FLAG）标签蛋白质免疫沉的buffer set，是高度优化的缓冲液组合，建议与anti-DYKDDDDK琼脂糖珠搭配使用，背景非常低。

■ 应用

· Western blotting
· 免疫荧光染色
· ELISA
· 使用琼脂糖珠的蛋白质纯化和免疫沉淀

页面更新：2020-04-07 11:34:14

His-标签蛋白质检测抗体酶试剂盒Takara

发表于2023年9月22日由上海金畔生物科技有限公司

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His-标签蛋白质检测抗体
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631213	6xHN Polyclonal Antibody	200 μl	￥6,689
Clontech	631212	6xHis Monoclonal Antibody (Albumin Free)	200 μg	￥7,051
Clontech	631210	6xHis mAb/HRP Conjugate	100 μl	￥4,833
Clontech	631206	c-Myc Monoclonal Antibody	200 μg	￥4,532

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无标题文档

Code No.	产品名称
631213	6xHN Polyclonal Antibody
631212	6xHis Monoclonal Antibody (Albumin Free)
631210	6xHis mAb-HRP Conjugate
631206	c-Myc Monoclonal Antibody

■ 产品描述

His标签和HA标签蛋白质检测抗体可在Western Blotting、ELISA以及免疫组织化学实验中检测融合表达His标签的蛋白质，这些抗体能够高灵敏度、高特异性地作用于His标签。

6xHis单克隆抗体（不含白蛋白）

本抗体是来源于小鼠腹水的IgG2a同种型，因其不含白蛋白，所以信噪比很高，可以对低至1 ng的6×His标签蛋白质进行检测。同时还采用无盐形式来提高稳定性，通过使用带标记的小鼠二抗就可以检测出本抗体与目的蛋白质形成的复合物。

偶联HRP的6xHis单克隆抗体

本抗体是将上述抗体偶联了辣根过氧化物酶（HRP），进而可以通过化学发光法、比色法或荧光底物检测法来检测和观察6×His标签蛋白质，不需要使用二抗。

6xHN多克隆抗体（不含白蛋白）

本抗体是用于检测6xHN标签重组蛋白质的兔来源的多克隆抗体，不含白蛋白，可用于Western Blotting和ELISA检测。

c-Myc单克隆抗体

本抗体识别的是人p62-c-Myc蛋白质410-419的残基表位，适用于从细胞裂解液中免疫沉淀融合表达c-Myc标签的蛋白质、ELISA、显微注射或转染细胞的免疫细胞化学和c-myc标签蛋白质的定位。

HA标签多克隆抗体

本抗体是使用合成的HA肽（YPYDVPDYA，甲型流感病毒血凝素表位）免疫兔，并使用protein A纯化而制备的，可用于Western Blotting，免疫沉淀，免疫荧光和ELISA检测。

■ 应用

Western Blotting、IP、ELISA

■ 实验例

6xHis单克隆抗体检测6xHis-LacZ。使用TALON树脂从裂解液中纯化蛋白质，10 mM咪唑buffer洗涤，150 mM咪唑buffer洗脱。图A是SDS-PAGE对TALON树脂纯化6xHis-LacZ过程中各组分分析的结果。图B是使用不含白蛋白的6xHis单克隆抗体做Western Blotting检测的结果。

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页面更新：2019-11-12 10:58:03

HAT-标签酶试剂盒Takara

发表于2023年9月20日由上海金畔生物科技有限公司

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HAT-标签
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631205	HAT Protein Expression and Purification System	1 Set	￥8,518

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无标题文档

Code No.	产品名称
631205	HAT^™ Protein Expression & Purification System

■ 产品介绍

HAT（组氨酸亲和标签）蛋白质表达和纯化系统为蛋白质表达和纯化提供了方便且有效的解决方案。
HAT载体编码一种新的多聚组氨酸表位标签，这种标签可以使细菌中表达的蛋白质在中性或生理pH、变性或非变性条件下进行纯化。

HAT系统

    HAT表位是天然存在的非相邻组氨酸残基序列，其总电荷比具有连续His残基标签的低。
    HAT融合蛋白质的溶解度更接近野生型蛋白质，同时对固定化金属离子仍具有很强的亲合力，使用HAT系统纯化蛋白质有两个主要优点：
    ● 蛋白质是可溶的，因此它不会形成聚集体或包涵体
    ● 蛋白质可以在温和条件（例如中性pH或低咪唑浓度）下洗脱
    使用TALON树脂纯化pHAT载体表达的蛋白质是一种很好的选择，搭配分批法、重力流法或者使用TALON superflow树脂搭配中压的FPLC纯化。TALON树脂的钴离子对HAT以及其他的多聚组氨酸标签蛋白质有很强的亲和力，对其他蛋白质的亲和性很低。TALON树脂理想的选择特异性降低了背景，洗涤的步骤较少并且为中性，因此能够非常好的保持蛋白质的完整性。

pHAT载体

HAT系统包含3种pHAT载体——pHAT10/11/12，三者结构相同，只是多克隆位点处的阅读框稍有不同。每个载体都有肠激酶（EK）切割位点，用来将纯化的蛋白质的HAT序列除去。限制性酶切位点的存在是为了可以将HAT序列切除（带或不带EK位点），以便于克隆至其他载体。
单独提供的pHAT20载体，具备pHAT10/11/12的所有优点，并且提供额外的克隆位点，使用方便，更容易将您的cDNA框与HAT序列融合。

产品特点

● 在中性pH下纯化蛋白质
● 在变性或非变性条件下使用
● 蛋白质溶解度更高
● 用TALON IMAC树脂可以得到优化的纯化产物

应用

在细菌系统中更容易表达和纯化蛋白质，并且蛋白质溶解度更高。

实验例

FPLC方法纯化HAT标签蛋白质。使用组分为50 mM sodium phosphate，0.3 M NaCl，5 mM imidazole，pH7.0的buffer破碎E. coli细胞提取蛋白质并纯化，最终以150 mM imidazole进行洗脱。

图A. 使用TALON Superflow柱对细胞裂解液进行纯化
图B. SDS-PAGE 分析
M: 分子量marker

6xHis、6xHN和HAT标签的氨基酸序列

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页面更新：2019-11-11 14:47:08

His-标签酶试剂盒Takara

发表于2023年9月20日由上海金畔生物科技有限公司

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His-标签
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631431	pET Express & Purify Kit—His60	20 Purifications	￥14,130
Clontech	631428	pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion Ready)	20 Purifications	￥14,801
Clontech	631430	pET Express & Purify Kit—HisTALON	20 Purifications	￥11,247
Clontech	631429	pET Express & Purify Kit—HisTALON (In-Fusion Ready)	20 Purifications	￥11,941

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Code No.	产品名称
631431	pET Express & Purify Kit—His60
631428	pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion^® Ready)
631430	pET Express & Purify Kit—HisTALON^™
631429	pET Express & Purify Kit—HisTALON^™ (In-Fusion^® Ready)

■ 产品介绍

pET表达系统是基因过表达研究中常用的细菌系统。我们提供一个完整的方案，有N端或C端的6 xHN标签载体可供选择，同时搭配IMAC纯化树脂。

pET表达系统提供高水平的蛋白质表达

    pET系统通过使用两种不同的带有lac操纵子的启动子实现2个级别的调控，因此能够提供高水平的蛋白质表达并可以对基础表达进行非常严密的控制。
    第一级别的调控来自pET6xHN系列载体。目的基因被克隆在由T7启动子和lac操纵子组成的强大的T7 lac杂交启动子下游，由于T7 RNA聚合酶对这种杂交启动子有非常强烈的选择结合性，因此会调动细胞的大部分资源来表达目的基因。
    第二级别的调控由宿主细胞执行。将T7 RNA聚合酶基因整合至宿主基因组中，由同样包含一个lac操纵子的lac UV5启动子调控。这使得T7 RNA聚合酶的表达受宿主基因组和pET6xHN载体中表达lac阻遏物的lac I基因的控制。
    在未诱导的状态下，lac阻遏物抑制T7 RNA聚合酶和目的基因的表达，当诱导期间加入IPTG时，它会与lac阻遏物结合，进而促使阻遏物与lac操纵子分离，解除抑制作用。这时T7 RNA聚合酶得以表达，再与刚刚去阻遏的T7 lac杂交启动子结合，从而转录目的基因。目的基因在宿主细胞中就可以进行高水平的蛋白质表达。

用于pET 表达&纯化系统的载体—pET6xHN

Clontech的pET表达和纯化kit中包含的pET载体（pET6xHN系列载体）能够编码N端或C端6xHN融合标签，这些在我们进行简单的In-Fusion克隆或传统的限制酶酶切法克隆时都可灵活选择，以满足用户的实验需求。

pET Express & Purify Kit—一个完整的表达&纯化系统

pET Express & Purify kit提供了IMAC树脂和缓冲液，用于纯化组氨酸标签蛋白质，有高结合力的His60镍离子树脂和高纯度的TALON钴离子树脂可供选择。试剂盒以预装重力柱的形式提供这两种树脂其中之一，并配以蛋白质提取和纯化操作必须的所有试剂。

镍离子树脂 – His60 Ni Superflow Resin

● 60 mg/ml的结合能力
● 纯度可高达95%
● 金属离子泄漏率低
● 多种产品形式，例如大量的树脂，耐压预装柱以及重力柱

产品特点

高效

可实现目的基因更高水平的表达和更严格的调控

快速

基于E. coli BL21(DE3)的系统

多功能

载体表达的6xHN标签，可选择标记在N端或者C端

方便

可以选择快速简单的In-Fusion PCR法克隆或传统的T4 DNA ligase法克隆

配备齐全

可以使用His60镍离子树脂或TALON钴离子树脂纯化目的蛋白质

■ pET Express & Purify Kit的克隆选择

■ pET Express & Purify Kit的实验流程

■ 使用pET系统在非诱导的细菌宿主细胞中表达重组蛋白质的分子机制

■ 使用pET系统在IPTG诱导的细菌宿主细胞中表达重组蛋白质的分子机制

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页面更新：2019-11-11 14:48:50

亲和性标签肽重组蛋白提取用

发表于2023年5月12日由上海金畔生物科技有限公司

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

亲和性标签肽重组蛋白提取用

重组蛋白提取用

亲和性标签肽

亲和性标签肽重组蛋白提取用

◆亲和性标签肽

本产品是可用于竞争洗脱各种标签抗体珠回收到的重组蛋白的肽。

产品名称	备注	规格	产品编号	包装
DYKDDDDK标签肽
DYKDDDDK肽 DYKDDDDK Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	044-30951	5 mg
			040-30953	25 mg
His标签：HHHHHH（6×Histidine）
6×组氨酸肽 6×Histidine Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	087-09251	5 mg
			083-09253	25 mg
HA标签：YPYDVPDYA
HA 肽 HA Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	088-09161	5 mg
			084-09163	25 mg
c-Myc标签：EQKLISEEDL
c-Myc肽 c-Myc Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	132-16361	5 mg
			138-16363	25 mg

◆相关产品

内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白, 单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白, 单抗	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody 抗GAPDH, 单抗	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 抗GAPDH, 单抗, 过氧化酶结合	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	–
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

发表于2023年5月12日由上海金畔生物科技有限公司

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

重组蛋白纯化检测用

亲和标签抗体系列

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

　　和光为您准备了DYKDDDDK, 6×His, GFP, HA, MBP, c-Myc, GST,V5融合蛋白提纯、检测用抗体及珠。
　　另外，和光还准备了上述各样品的试用装，您可向当地代理商索取。

◆DYK标签：DYKDDDDK

　　DYK标签是识别DYKDDDDK肽的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物中的DYKDDDDK标签融合蛋白。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

数据提供：　
鹿儿岛大学研究生院医疗牙科综合研究科附属顽固病毒病理控制研究中心分子病毒感染研究领域草野秀一老师

将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞株中，经过24小时培养后，随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行溶解，对所得的细胞溶解液用Western Blot法检测，可检测出3×FLAG标签融合蛋白。

分别用Wako（克隆号 1E6）（产品编号：018-22381）抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。

与A公司抗体相比，Wako（克隆号 1E6）抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。

A公司产品和Wako产品在Western Blot检测中的灵敏度比较

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

Lane 1: 293T细胞溶解液
Lane 2: 瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3: 瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭：含5%脱脂奶的TBS-T、4℃，一晚

抗体反应：2小时、室温
发光剂：ImmunoStar^® LD
检测：LAS-3000、曝光时间15分

Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗DYKDDDDK标签，单抗 Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody	小鼠IgG_2b 1E6	WB,IP,FCM,ChIP	免疫化学用	018-22381	200 μg
				014-22383	1 mg
				012-22384	5 mg
抗DYKDDDDK标签，单抗 Anti DYKDDDDK tag,Monoclonal Antibody,Rat	大鼠IgG₁ 6F7	WB,IP,ELISA,IHC,FCM	免疫化学用	018-23621	200 μg
				012-23624	1 mg
HRP标签单抗
抗DYKDDDDK标签，单抗，过氧化酶结合 Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2b 1E6	WB	免疫化学用	015-22391	200 μL
				019-22394	1 mL

◆6×His标签：HHHHHH (6×组氨酸)

　　可用于检测His(6×组氨酸)标签融合蛋白。克隆不同，识别端的特异性、应用也有所不同。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

克隆号	识别端	Western blot		Immunoprecipitation		ELISA	产品编号
克隆号	识别端	N端	C端	N端	C端	ELISA	产品编号
9F2	C端	ND	+++++	ND	++	–	010-21861
9C11	N・C端	+++++	++++	+++++	++	○	011-23091
21-48	N・C端	+++	++++	+++	+++	○	017-23211
28-75	N・C端	++	++	+++++	+++++	○	014-23221
9F2	C端	ND	+++++	–	–	–	013-23171
9C11	N・C端	+++++	++++	–	–	◎	010-23181

B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blot检测功能比较

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

N端His：HEK293T表达的6×His-

ProteinZ, 1×10⁵ cells
C端His：Protein P-6×His＋CHO细胞溶解液, 1×10⁵ cells

一抗：1 μg/mL
二抗：抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液
可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。

6×His tag抗体　选购指南

N端的检测中，最强的克隆号是什么？
WB：9C11　IP： 9C11, 28-75
C端的检测中，最强的克隆号是什么
WB：9F2　IP：28-75
适用于WB检测中，识别N/C端的克隆号是什么？
9C11
适用于IP检测中，识别N/C端的克隆号是什么？
28-75

可灵活应用于WB/IP的万能型克隆号是哪个？
21-48
适用于WB检测的克隆号是哪个？
9C11
适用于IP检测的克隆号是哪个？
28-75
只识别C端的性价比较高的克隆号是哪个？
9F2

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9F2)	小鼠IgG₁ 9F2	WB,IP	免疫化学用	010-21861	200 μg
				014-21864	1 mg
				010-21866	5 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9C11)	小鼠IgG₁ 9C11	WB,IP,ELISA	免疫化学用	011-23091	200 μg
				015-23094	1 mg
				011-23096	5 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(21-28)	小鼠IgG₁・κ 21-48	WB,IP,ELISA	免疫化学用	017-23211	200 μg
				011-23214	1 mg
抗6×组氨酸，单抗 Anti 6×His,Monoclonal Antibody(28-75)	小鼠IgG₃・κ 28-75	WB,IP,ELISA	免疫化学用	014-23221	200 μg
				018-23224	1 mg
HRP标签单抗
抗6×组氨酸，单抗，过氧化酶结合 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9F2	WB	免疫化学用	013-23171	100 μL
				017-23174	500 μL
抗6×组氨酸，单抗，过氧化酶结合 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9C11	WB	免疫化学用	010-23181	100 μL
				014-23184	500 μL

◆GFP tag： Green Fluorescent Protein (GFP)

　　可识别Green Fluorescent Protein (GFP)抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白，可应用于各个领域。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗及多抗
抗绿色荧光蛋白，单抗 Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP, MoAb)	小鼠IgG_2a・κ mFX73	IP, IHC	免疫化学用	012-20461	100 μL
	小鼠IgG_2a・κ mFX73	IP, IHC	免疫化学用	018-20463	100 μL×5
抗绿色荧光蛋白，单抗 Anti GFP,MoAb(mF×75)	小鼠IgG_2a・κ mFX75	WB	免疫化学用	012-22541	100 μL
抗绿色荧光蛋白，多抗 IS，兔 Anti Green Fluorescent Protein,Rabbit Polyclonal IS	–	WB, IHC	免疫化学用	013-23811	20 μg

◆HA tag：YPYDVPDYA

　　血凝素（HA）来源(98-106 aa)的多肽：抗YPYDVPDYA单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	容量
单抗
抗血凝素, 单抗 Anti HA,MoAb	小鼠IgG_2b 4B2	WB, IP	免疫化学用	014-21881	200 μg
				018-21884	1 mg
				014-21886	5 mg
HRP标签单抗
抗血凝素, 单抗，过氧化酶结合 Anti Hemagglutinin,Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2b 4B2	WB	免疫化学用	011-21911	100 μL
				015-21914	500 μL

参考数据

抗绿色荧光蛋白, 单抗（012-22541）
抗体浓度：1 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GFP重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，并取

　　　　10 μL进行电泳操作
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

抗血凝素，单抗（014-21881）

抗体浓度：0.5 μg/mL
抗原量：对5 ng HA标签重组蛋白进行电泳操作
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

◆MBP tag：Maltose Binding Protein

　　可识别Maltose-binding Protein (MBP)单抗。MBP是对麦芽糖、麦芽糊精具有结合性的蛋白，具有通过与目的蛋白融合，提高表达蛋白可溶性的特点，可简便纯化、检测重组蛋白。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗麦芽糖结合蛋白，单抗 Anti MBP, Monoclonal Antibody, Rat	大鼠IgG_2b TMab-2	ELISA, WB	免疫化学用	016-24141	200 μg

◆c-Myc标签：EQKLISEEDL

　　可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗c-Myc，单抗 ANTI c-Myc, Monoclonal Antibody	小鼠IgG₁ 9E10	WB, IP	免疫化学用	017-21871	200 μg
				011-21874	1 mg
				017-21876	5 mg
抗c-Myc，单抗 Anti c-Myc, Monoclonal Antibody (10D11)	小鼠IgG₁ 10D11	WB, IP	免疫化学用	017-26511	20 μg
				013-26513	200 μg
				011-26514	1 mg
HRP标签单抗
抗c-Myc, 单抗，过氧化酶结合 Anti c-Myc,MoAb, Peroxidase Conjugated	小鼠IgG₁ 9E10	WB	免疫化学用	014-21901	100 μL
				018-21904	500 μL
抗c-Myc, 单抗，过氧化酶结合 Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated (10D11)	小鼠IgG₁ 10D11	WB	免疫化学用	014-26521	10 μL
				010-26523	100μL
				018-26524	500 μL

◆GST标签：Glutathione-S-transferase

　　可识别Glutathione S-transferase（GST）单抗。

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗谷胱甘肽 S-转移酶，单抗 Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody	小鼠IgG_2b 5A7	WB, IP	免疫化学用	013-21851	200 μg
				017-21854	1 mg
				013-21856	5 mg
HRP标签单抗
抗谷胱甘肽 S-转移酶，单抗，过氧化酶结合 Anti Glutathione S-transferse,Monoclonal Antibody, HRP Conjugated	小鼠IgG_2b 5A7	WB	免疫化学用	011-21891	100 μL
				015-21894	500 μL

参考数据

抗c-Myc, 单抗（017-21871）
抗体浓度：0.25 μg/mL
抗原量：对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

抗谷胱甘肽 S-转移酶, 单抗（013-21851）
抗体浓度：1.0 μg/mL
抗原量：将100 μL表达GTS标签重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释，

　　　　并取10 μL进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

◆V5 tag：GKPIPNPLLGLDST

　　可识别多肽GKPIPNPLLGLDST单抗｡

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗V5 tag, 单抗 Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5)	小鼠IgG_2a 6F5	WB, IP	免疫化学用	011-23591	200 μg
				015-23594	1 mg
				011-23596	5 mg
HRP标签单抗
抗V5tag，单抗，过氧化酶结合 Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5), Peroxidase Conjugated	小鼠IgG_2a 6F5	WB	免疫化学用	019-24371	100 μL

◆相关产品

内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白，单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
抗β-微管蛋白，单抗 Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
抗GAPDH，单抗 Anti GAPDH, Monoclonal Antibody	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
抗GAPDH，单抗，过氧化酶结合 Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III，DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V（无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	–
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

发表于2023年5月12日由上海金畔生物科技有限公司

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

重组蛋白纯化检测用

PA标签系统

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

◆特点

●　通过树脂再生，降低运行成本

●　超高亲和性抗体，实现高回收率、高纯度纯化

●　在动物细胞表达系（HEK293T细胞、CHO细胞等）中，有效纯化蛋白

●　PA标签系统是使用可识别肽标签（12个氨基酸残基）的单抗（NZ-1）。日本开发的亲和性纯化标签系统。

●　NZ-1单抗对PA tag具有高亲和性和特异性，可应用于Western Blotting、细胞流式分析、免疫组化（ICC）。

　通过免疫沉淀，可纯化PA标签融合蛋白以及树脂再生。

●　PA标签系统，可一步纯化高纯度PA标签融合蛋白。

◆PA标签系统

　　Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affi nity antibody against a dodecapeptide derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).

Fujii, Y. et al.

　　新型亲和标签系统“PA tag”的应用方法~蛋白的纯化及检测~

　　蛋白科学学会档案, 7, e075 (2014)

◆PA标签表达载体案例

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

载体	表达模式	宿主细胞	MCS启动子
pCAG	瞬时表达	灵长类（人、猴）、犬细胞等粘着细胞和啮齿动物细胞	CAG

和光还推出除上述抗性基因载体外的其他载体。（请点击参考。）

测序用引物序列、其他载体序列的相关详细信息，已附在产品现货说明书中。

另外可点击和光主页/TARGET标签，查看序列信息、Multi Cloning Site(MCS)信息。

◆用PA标签从培养上清中亲和提纯的案例

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

数据提供：大阪大学蛋白研究所附属蛋白分析先进研究中心

分子创制学研究室高木淳一老师，藤井勇树老师

◆Protocol目的蛋白的纯化

１．哺乳类动物细胞转染(HEK293T)
　　转染处于40-60%融合状态的细胞
　　培养基：D-MEM, 5%FBS

２．回收培养上清和吸附蛋白树脂
　　转染48-72小时后，回收约420 mL培养上清，加入8 mL抗PA标签抗体琼脂糖珠，混合2小时（2-10℃）

３．树脂回收
　　用50 mL的纯化柱。回收步骤2)中的琼脂糖珠

４．树脂洗涤
　　加入珠4倍量的TBS 缓冲液（20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl），清洗5次

５．PA标签肽从树脂中竞争性洗脱
　　加入经1×TBS溶液, pH 7.5溶解过的PA 标签肽（终浓度0.1 mg/mL），体积量需为珠的一倍，

　　然后分10次回收PA标签融合蛋白X

６．SDS-PAGE
　　样品量
　　c. sup：5 μL, flow through：5 μL, wash：5 μL,
　　肽洗脱（1-10）：各10 μL

　　可纯化PA标签融合蛋白X且不依赖PA标签。→可实现极高纯度的亲和纯化。

◆通过PA tag降低背景的方法

PA标签系统重组蛋白纯化检测用
可在含有高浓度NaCl的TBS溶液中，通过前清洗去除杂质蛋白！！

M: Marker
I: input 100ng分
P: 纯化前样品
1: wash片段①
2: wash片段②
3: wash片段③
4: wash片段④
5: wash片段⑤
6: wash片段⑥
7: wash片段⑦
8: wash片段⑧
9: wash片段⑨
10: 酸洗脱①
11: 酸洗脱②
12: 酸洗脱③
13: 酸洗脱④
14: 酸洗脱⑤

　　在20 mL的昆虫细胞溶解液中加入蛋白Z，使其浓度变为1.0 mg/L后，添加200 μL抗PA标签抗体琼脂糖珠，4℃温度条件下，搅拌3小时。

　　分别用不同浓度的TBS溶液（0.15 M、0.5 M、1.0 M NaCl）进行调整，用琼脂糖珠50倍量清洗。在回收的各珠中加入0.5 mL 0.1 M Glycine-HCl(pH 2.7)，室温条件下平稳震动5 min。

　　离心后回收上清，用1 M Tris-HCl (pH 9.0)做中和处理。

　　SDS-PAGE后进行银染，比较去除污染蛋白之后，不同浓度下的结果。

◆使用案例：Western Blotting

PA标签系统重组蛋白纯化检测用
数据提供：东北大学研究生院医学系研究科

地域革新领域加藤幸成老师，金子美华老师

NZ-1显示出与天然抗体具有相同的高检测灵敏度。

Lane 1

一抗：抗IDH1抗体（RcMab-1）, 1 μg/mL

二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

Lane 2

一抗：抗PA tag抗体, 1 μg/mL

二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

Lane 3

一抗：抗DYKDDDDK标签抗体, 3.5 μg/mL

二次抗体：抗小鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

样品量：各10 μg
曝光时间：10分钟

◆PA标签系列

产品名称	子类克隆号	适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗PA标签, 大鼠单抗 Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody	大鼠IgG_2a NZ-1	IP, WB, FCM, ICC	免疫化学用	016-25861	200 μL
				012-25863	1 mL
HRP标签单抗
抗PA标签, 大鼠单抗,过氧化酶结合 Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	大鼠IgG_2a NZ-1	WB	免疫化学用	015-25951	200 μL
				011-25953	1 mL

产品名称	子类克隆号	规格	产品编号	包装
抗体结合琼脂糖珠
抗PA标签抗体琼脂糖珠 Anti PA tag Antibody Beads	大鼠IgG_2a NZ-1	免疫化学用	012-25841	2 mL(Net 1 mL)
			018-25843	10 mL (Net 5 mL)
			016-25844	50 mL (Net 25 mL)
识别N端、C端的PA标签使用载体：4% 琼脂糖溶液组成：1 x PBS (pH7.2), 0.05 w/v%叠氮化钠抗体结合量：参见标签记载结合容量：1 mL本品可结合约0.015-1.0 mg的PA标签融合蛋白
抗体结合磁珠
MagCaptureTM HP 抗PA标签抗体磁珠 MagCapture™ HP Anti PA tag Antibody Magnetic Beads	大鼠IgG_2a NZ-1	免疫化学用	137-18751	2 mL
溶液组成：1×TBS(pH 7.4), 50% glycerol, 0.05 w/v% sodium azide

产品名称	备注	规格	产品编号	包装
肽
PA标签肽 PA tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	167-25501	5 mg
PA标签肽 PA tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	163-25503	25 mg
清洗溶液
PA标签清洗溶液 PA tag Washing Solution	已过滤消毒即用型	基因研究用	169-27261	50 mL

产品名称	可选Marker		产品编号	包装
产品名称	大肠杆菌	动物细胞	产品编号	包装
瞬时载体
pCAG-Ble PA 标签-C pCAG-Ble PA tag-C	Bleomycin		161-26861	20 μg
pCAG-Ble PA 标签-N 信号增加型 pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus	Bleomycin		168-26871	20 μg
pCAG-Bsd PA 标签-C pCAG-Bsd PA tag-C	Blasticidin S		165-26881	20 μg
pCAG-Bsd PA 标签-N 信号增加型 pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus	Blasticidin S		162-26891	20 μg
pCAG-Neo PA 标签-C pCAG-Hyg PA tag-C	Hygromycin B		165-26901	20 μg
pCAG-Hyg PA 标签-N 信号增加型 pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus	Hygromycin B		162-26911	20 μg
pCAG-Neo PA 标签-C pCAG-Neo PA tag-C	Kanamycin	G418	169-26921	20 μg
pCAG-Neo PA 标签-N 信号增加型 pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus	Kanamycin	G418	166-26931	20 μg

◆相关产品

内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白, 单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白, 单抗	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody 抗GAPDH, 单抗	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 抗GAPDH, 单抗, 过氧化酶结合	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	–
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

发表于2023年5月11日由上海金畔生物科技有限公司

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

重组蛋白纯化检测用

TARGET标签系统

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

◆特点

●　通过树脂再生，降低运作成本

●　温和洗脱、清洗，实现高纯度

●　在动物细胞表达系（HEK293T细胞、CHO细胞等）中有效纯化蛋白

　　TARGER标签系统使用的是可识别肽标签（21个氨基酸残基）的单抗（P20.1），是日本开发的亲和纯化标签系统。

　　TARGET标签系统实践证明，即使在传统系统都难以进行高纯度蛋白纯化的动物细胞表达系中，也可有效地进行亲和纯化。

◆TARGET标签系统

　　A rapid screening method for cell lines producing singly-tagged recombinant proteins using the“ TARGET tag”system. Tabata S. et al., J. Proteomics, 2010 Aug 5;73(9):1777-85.

◆TARGET 标签表达载体示意图

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

产品选择

载体	表达模式	宿主细胞	MCS启动子
pEBMulti	非整合型稳定表达	灵长类（人、猴）、狗细胞等贴壁细胞	CAG
pCAG	瞬时表达	灵长类（人、猴）、狗细胞等贴壁细胞、大/小鼠等动物细胞	CAG

富士胶片和光还推出除上述抗性基因载体外的其他载体。（请点击查看）

测序用引物序列、其他载体序列的相关详细信息，已附在产品随货说明书中。

另外可点击富士胶片和光主页/TARGET标签，查看序列信息、多克隆位点(MCS)信息。

TARGET标签融合蛋白的免疫沉淀

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

通过Transient 载体，

表达TARGET标签融合重组蛋白

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

培养上清（培养第7天）

每10 mL中，分别添加0.1 mL（net 0.05 mL）的抗体磁珠（①抗TARGET标签抗体琼脂糖珠、②抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠，其他公司产品），4℃条件下，进行2小时免疫沉淀。

清洗后，在回收的各珠中分别添加0.5 mL 0.2 mg/mL

TARGET标签肽/TBS和0.2 mg/mL DYKDDDDK肽/TBS，4℃条件下，平稳震动0.5小时。离心后回收上清。

再分别在各珠中添加0.5 mL 0.1 M Glycine-HCl (pH 2.7)，室温下，平稳震动5分钟。离心后，回收上清并用1M Tris-HCl (pH 9.0)中和。

上图为SDS-PAGE处理后的银染结果。

与传统DYKDDDDK tag相比，背景更低

→高纯度！

　M：M.W. Marker

　1.仅转染载体的培养上清

　2.转染了蛋白Y-TARGET 标签表达质粒的细胞培养上清

　3.转染了TARGET标签-蛋白Y 表达质粒的细胞培养上清

　　也可使用市售的Transient载体

确认非整合型载体TARGET tag C端融合重组蛋白的表达

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

利用可编码表达人源生理活性蛋白基因的质粒转染 HEK293N 细胞后，从初期细胞数 3×10⁵cells/mL 开始培养，回收 0/3/7 日的培养上清。

用 20 μL/lane 的培养上清进行 SDS-PAGE 处理，通过银染和 Western blotting，检测出蛋白的表达。

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

可确认到与市面售卖的 Tag 系统有相同的表达量和检测灵敏度。

◆TARGET 标签系列

产品名称	子类克隆号		适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗TARGET标签，单抗 Anti TARGET tag，Monoclonal Antibody		小鼠 IgG₁ P20.1	IP, WB	免疫化学用	016-25481	200 μg
					012-25483	1 mg
HRP标签单抗
抗 TARGET tag，单抗，过氧化酶结合 Anti TARGET tag, Monoclonal Antibody (P20.1) Peroxidase conjugated		小鼠 IgG₁ P20.1	WB	免疫化学用	015-25571	200 μL
					011-25573	1 mL

产品名称	子类克隆号	规格	产品编号	包装
抗体结合琼脂糖珠
抗 TARGET 标签抗体琼脂糖珠 Anti TARGET tag Antibody Beads	小鼠 IgG₁ P20.1	免疫化学用	018-25561	2 mL (Net 1 mL)
			014-25563	10 mL (Net 5 mL)
			012-25564	50 mL (Net 25 mL)
识别 N 端、C 端的 TARGET 标签使用载体：4% 琼脂糖溶液组成：1×TBS (pH 7.5)，0.05 w/v%叠氮化钠抗体结合量：2.0 mg/mL 结合容量：1 mL 本品可结合约 0.1-1.0 mg 的 TARGET 标签融合蛋白

产品名称	备注	规格	产品编号	包装
肽
TARGET标签肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	200-19673	5 mg
TARGET标签肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	208-19674	25 mg
清洗液
TARGET标签清洗液 TARGET tag Washing Solution	已过滤消毒即用型	基因研究用	208-19831	50 mL

产品名称	可选 Marker		产品编号	包装
	大肠杆菌	动物细胞
瞬时表达载体
C端插入TARGET标签的pCAG-Ble载体 pCAG-Ble TARGET tag-C	博莱霉素		165-26381	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Ble载体 pCAG-Ble TARGET tag-N	博莱霉素		162-26391	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Bsd载体 pCAG-Bsd TARGET tag-C	杀稻瘟素S		165-26401	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Bsd载体 pCAG-Bsd TARGET tag-N	杀稻瘟素S		162-26411	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Hyg载体 pCAG-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		169-26421	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Hyg载体 pCAG-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		166-26431	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Neo载体 pCAG-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	163-26441	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Neo载体 pCAG-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	160-26451	20 μg
游离载体
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Ble载体 pEBMulti-Ble TARGET tag-C	博来霉素		167-26461	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Ble载体 pEBMulti-Ble TARGET tag-N	博来霉素		164-26471	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Bsd载体 pEBMulti-Bsd TARGET tag-C	杀稻瘟素S		161-26481	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMultI-Bsd载体 pEBMulti-Bsd TARGET tag-N	杀稻瘟素S		168-26491	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Hyg载体 pEBMulti-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		161-26501	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Hyg载体 pEBMulti-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		168-26511	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体 pEBMulti-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	165-26521	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体 pEBMulti-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	162-26531	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Puro载体 pEBMulti-Puro TARGET tag-C	氨苄青霉素	嘌呤霉素	169-26541	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Puro载体 pEBMulti-Puro TARGET tag-N	氨苄青霉素	嘌呤霉素	166-26551	20 μg

◆相关产品

内参照

下表为 Western Blot 实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白，单抗 Anti α-Tubulin，Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin，Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白，单抗	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody 抗GAPDH，单抗	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated 抗GAPDH，单抗，过氧化酶结合	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	–
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级

Multitope, Denatured, recombinant, Solution 表位标签（变性）重组溶液品牌：Wako

发表于2023年3月13日由上海金畔生物科技有限公司

品牌：Wako
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–

产品编号 (生产商编号)	等级	规格	运输包装	零售价(RMB)	库存情况	参考值
139-16371	for Immunochemistry	500 ul	–	2,970.00	–	–

* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用

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Lumiprobe中国代理商lumiprobe荧光染料授权代理商

标签归档：标签

Anti DYKDDDDK tag Antibody Magnetic Beads DYKDDDDK标签抗体磁珠品牌：Wako

Anti DYKDDDDK tag Magnetic Beads 抗DYKDDDDK标签磁珠品牌：Wako

PA tag Washing Solution PA 标签洗涤溶液品牌：Wako

Multitope, Denatured, recombinant, Solution 表位标签（变性）重组溶液品牌：Wako

DYKDDDDK标签蛋白质免疫沉淀 Buffer Set(FLAG标签)酶试剂盒Takara

His-标签蛋白质检测抗体酶试剂盒Takara

HAT-标签酶试剂盒Takara

His-标签酶试剂盒Takara

亲和性标签肽重组蛋白提取用

亲和标签抗体系列重组蛋白纯化检测用

PA标签系统重组蛋白纯化检测用

TARGET标签系统重组蛋白纯化检测用

Multitope, Denatured, recombinant, Solution 表位标签（变性）重组溶液品牌：Wako