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性能卓越的单细胞mRNA分析酶试剂盒Takara

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性能卓越的单细胞mRNA分析
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 634888 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 12 Rxns ￥13,966 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
Clontech 634889 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 24 Rxns ￥23,654 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
Clontech 634890 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 48 Rxns ￥37,852 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
Clontech 634891 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 96 Rxns ￥66,839 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
Clontech 634892 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 192 Rxns ￥116,774 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
Clontech 634893 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 480 Rxns ￥232,084 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析 性能卓越的单细胞mRNA分析
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SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing
· SMART-Seq2 和 LNA 技术完美结合—LNA技术提高了模板转换效率
· 灵敏度高—可以单细胞或10 pg总RNA起始（起始量： 1-1,000 个细胞或10 pg-10 ng 总RNA)
· 高质量测序数据—检测更多基因，保留全长信息，低rRNA比率，高GC-rich转录本代表性
· 适用于多种测序平台—cDNA文库兼容Illumina或Ion Torrent NGS平台
· 操作简便—直接以细胞起始的单管操作流程，有利于保留样品的完整信息
 
SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 是第4代的SMARTer Ultra Low 试剂，也是Clontech目前灵敏很高的单细胞和微量样品mRNA-seq 试剂。试剂结合了SMART-Seq2和LNA（locked nucleic acid）技术，将SMART (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术推向了新水平，称为“SMARTer-seq® Chemistry”。基于此，本试剂的表现超越了SMART-Seq2技术和前几代的SMARTer 试剂，可以检测更多的转录本。 Clontech不断创新的传统赋予了本试剂不断提升的性能，可以1-1,000个细胞（或低至10 pg-10 ng总RNA）直接起始进行cDNA合成，并获得高重复再现性，均一的转录本覆盖度和出色的GC-rich转录本代表性的测序结果。利用本试剂制备的全长cDNA文库，可以兼容Illumina® 和 Ion Torrent 测序平台。
本试剂的核心技术-SMART技术，是非常强大的全转录组研究技术，包括细胞内剪接点，可变剪接事件研究，并提供全长信息。Oligo(dT)可以从高品质总RNA(RIN >8)或完整细胞中捕获扩增mRNA，LNA技术提升了模板转换效率，使得本试剂可以检测到比以往SMARTer Ultra Low kit更多的基因。
 
性能卓越的单细胞mRNA分析
图1. SMART-Seq v4 模板转换机制
 
性能卓越的单细胞mRNA分析
表1. 1、100、1000个Hela细胞主要mRNA-Seq数据 (Illumina® MiSeq® platform)
 
性能卓越的单细胞mRNA分析
图2. 转录本覆盖度分析
 
 
Technote：
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操作简便的单细胞mRNA分析酶试剂盒Takara

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操作简便的单细胞mRNA分析
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 634436 SMART-Seq® HT Kit 480 Rxns ￥118,883 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634437 SMART-Seq® HT Kit 96 Rxns ￥30,910 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634438 SMART-Seq® HT Kit 192 Rxns ￥57,064 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
Clontech 634439 SMART-Seq® HT Lysis Components 96 Rxns ￥1,199 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析 操作简便的单细胞mRNA分析
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操作简便的单细胞mRNA分析 ↗
 
 
SMART-Seq HT Kit & SMART-Seq HT Plus Kit：自动化友好型的单细胞mRNA全长分析
· 自动化友好型 - 兼容自动化工作站，更少的时间分析更多的样本
· 高灵敏度 - 可以从单细胞或10 pg总RNA起始（起始量：1-100个细胞或10 pg-1 ng总RNA）
· 高质量的RNA-Seq数据 - 保留全长基因信息，低rRNA比率，高基因检出数，有效扩增GC-rich转录本
· 单管操作流程 - SMART-Seq HT PLUS Kit包含完整的cDNA合成和文库构建流程，分别在单管中进行，减少样品损失与混淆，降低手动操作误差
· 增强的测序性能 - SMART-Seq HT PLUS Kit整合双端特殊index（UDI），即便多个文库pool后用高通量型illumina测序仪（如Novaseq）分析，也能得到正确结果
· 更高的文库产量 - 更便于使用高通量型illumina测序仪测序（如Novaseq），或保存剩余的文库用于多次测序
 
■ 产品说明
SMART-Seq HT Kit（SS-HT）和SMART-Seq HT Plus Kit（SS-HT PLUS）均兼容自动化移液工作站，采用oligo(dT)引物，支持1-100个细胞或10 pg-1 ng总RNA起始。
SS-HT试剂盒是从第4代的SMARTer Ultra Low试剂（SMART-Seq v4）发展而来的，具有简化的操作流程，将原有的反转录和PCR扩增步骤整合为一步，且不影响性能。细胞分离或RNA提取后，仅通过一步RT-PCR扩增双链cDNA，然后进行纯化完成操作。cDNA合成可在4小时内完成，整个文库构建方案可在2天内完成。而且，SMART-Seq HT试剂盒具有与SMART-Seq v4试剂盒相同的灵敏度和可重复性。核心的SMART技术，是一种对全转录组研究，以及包括细胞内剪接位点，可变剪接研究的非常强大的工具，且可以检测全长基因。 Oligo（dT）可以从高品质总RNA（RIN> 8）或完整细胞中特异性扩增mRNA。 通过采用LNA技术，提升了模板转换的效率与基因检出数等性能。
SS-HT PLUS Kit在包含核心的cDNA合成试剂基础上，同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术（U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823）及单次使用的双端特殊index（UDI），提供完整的单细胞cDNA合成到文库构建的实验体验。建库试剂中包含片段化酶，以实现对合成cDNA的片段化，接着利用特别的茎环形接头构建高品质illumina文库。在建库阶段，单管两步操作、过程中无需纯化、2 h即可建成文库！
 
■ SS-HT Kit：流程缩短、性能不变！
操作简便的单细胞mRNA分析
图1 SMART-Seq HT的技术流程
 
操作简便的单细胞mRNA分析
图2 SMART-Seq v4和SMART-Seq HT工作流程的比较
 
SMART-Seq HT（右）是由SMART-Seq v4方法（左）经过改进而来的一个手动操作时间更短的高通量工作流程。使用FACS方法获得单细胞，SMART-Seq HT试剂盒只需3个操作步骤即可制备cDNA，而SMART-Seq v4试剂盒需要6步。SMART-Seq HT工作流程的一个重要步骤是一步RT-PCR，即使用一步RT-PCR缓冲液，进行高效的反转录和PCR扩增cDNA的过程。
 
操作简便的单细胞mRNA分析
图3 使用SMART-seq v4 kit和SMART-Seq HT kit从FACS分选的293T细胞中获得的高重复性的基因表达数据
 
使用SMART-Seq v4试剂盒（SSv4_1-SSv4_12）和SMART-Seq HT试剂盒（ HT_1-HT_9）（上图）从21个293T细胞单细胞制备文库，并对每个细胞获得的基因表达性进行评估。层次聚类热图展示了所有细胞之间的Euclidean distances，并显示从0.74到0.97的Pearson相关性。不仅用相同试剂盒制备的细胞之间可以观察到非常高的相关性，而在两种试剂盒之间的相关性也非常高。这些数据表明，SMART-Seq HT的工作流程与SMART-Seq v4相比，在基因表达分析中没有显著的偏差。
 
■ SS-HT PLUS Kit：不只是一个Kit，更是完整的单细胞RNA-Seq建库体验！
为了使单细胞cDNA合成、文库构建实验“一步”到位，我们全新推出了SS-HT PLUS Kit。
操作简便的单细胞mRNA分析
 
操作简便的单细胞mRNA分析
 
从高灵敏度、高重复性的cDNA合成出发，构建更高品质illumina文库
 
Takara科学家从10 pg小鼠脑total RNA起始，采用SMART-Seq HT Kit完成cDNA合成。随后分别使用SS-HT Plus Kit中的SMART-Seq Library Prep Kit模块与市面上较常用的A公司试剂盒构建文库，并比较性能差异。
 
操作简便的单细胞mRNA分析
(比较数据来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
从测试数据中可以看出，SS-HT PLUS Kit所建文库的产量是A公司Kit产量的5倍，而更高的文库产量更适于高通量型Illumina测序仪，如Novaseq。
 
两种方法所建文库随后用Nextseq 500完成测序，并对TPM(Transcripts per million)≥0.1的基因数进行统计。SS-HT PLUS文库能比A公司文库多检出10%的基因，从同样的cDNA起始能“捕获”更全的信息！
 
 
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更多实验数据：
SS-HT Kit
SS-HT Plus Kit
 
延伸阅读：
单细胞NGS解决方案
 
 

页面更新：2022-03-18 16:39:25

高灵敏度的单细胞全长mRNA分析酶试剂盒Takara

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高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 634470 SMART-Seq Single Cell Kit 12 Rxns ￥13,341 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
Clontech 634471 SMART-Seq Single Cell Kit 48 Rxns ￥37,759 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
Clontech 634472 SMART-Seq Single Cell Kit 96 Rxns ￥65,697 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析 高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
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高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
SMART-Seq Single Cell Kit
· 简便的工作流程-可以FACS或其他方法分选的单细胞起始
· 灵敏度高、一致性好-非常适用于单细胞（尤其是RNA含量非常低的细胞和细胞核）RNA-Seq的研究，可检测更多基因
· 可靠的全长cDNA制备Kit-优于许多现有的单细胞全长cDNA合成方法，例如SMART-Seq2
· 高度灵活的工作流程-可与自动化设备兼容
 
SMART-Seq Single Cell Kit（SSsc）是一个具有高灵敏度和可再现的cDNA制备试剂盒，适用于单细胞和细胞核的RNA-Seq分析。该试剂盒可以从已知具有低RNA含量的单个细胞（例如，PBMC）直接生成高质量的全长cDNA。该试剂盒基于SMART-Seq技术进行优化改良，具有更高的灵敏度和再现性。远远超过许多现有的单细胞全长cDNA合成方法，例如SMART-Seq2和Takara Bio现有试剂盒（SMART-Seq V4）。
 
高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
图1. 与Smart-seq2法的比较
 
以淋巴母细胞系GM12878单细胞为样本制备文库，分别采用SMART-Seq Single Cell Kit（SSsc,18个重复）和Smart-seq2法（Smart-seq2，20个重复）合成cDNA（均进行19个PCR循环扩增），然后制备RNA-Seq文库并进行测序分析（所有样本都均一化至1.75M paired-end reads）。
 
Panel A cDNA的制备方法不同，结果也不同。相比而言，Smart-seq2结果中比对到线粒体基因组的比率较高，而检测到基因鉴别的reads数相对较少。
 
Panel B SMART-Seq Single Cell Kit能检测到比Smart-seq2更多的基因。
 
高灵敏度的单细胞全长mRNA分析
图2. 与SMART-Seq v4的比较
 
Panel A 以淋巴母细胞系GM22601单细胞为样本制备文库，分别采用SMART-Seq Single Cell Kit（SSsc）和SMART-Seq v4（SSv4）合成cDNA（均用19个PCR循环扩增）。所有样本都均一化至1.25M paired-end reads。使用SSsc建库，能获得更高的文库产量。
 
Panel B 从一位健康供体收集到约50个PMBC单细胞，分别采用SSv4 和 SSsc制备cDNA，然后制备RNA-Seq文库并进行测序分析。不论测序深度如何，SMART-Seq Single Cell Kit检测的基因数均是SMART-Seq v4的1.6倍以上。
 
 
Technote：
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Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System酶试剂盒Takara

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Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6141 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System 1 Kit ￥4,973 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
Takara 6143 Cloning Kit for mRNA Template 10 Rxns ￥1,531 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
Takara 6144 Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit 20 Rxns ￥3,442
￥2,926 		Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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一款合成高质量、高产量mRNA的体外转录（IVT）试剂盒
·通过体外转录（IVT）合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA；
·优化的T7 RNA聚合酶用于IVT反应，RNA合成效率高、产量大；
·独立包装的NTPs，方便修饰NTPs替换，且不影响mRNA产量；
·采用In-Fusion无缝克隆，轻松构建模板质粒DNA；
·使用氯化锂（LiCl）溶液进行RNA纯化，可立即进行下游应用。
 
■ 制品说明
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System是能够简便、高效合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA的体外转录试剂盒。它包含以下两种制品：
① Cloning Kit for mRNA Template（Code No. 6143）：
本试剂盒用于将模板DNA无缝克隆到预线性化载体（包含在本试剂盒中）中构建用于体外转录反应的模板质粒。预线性化载体中包含T7 启动子、转录起始序列 (AGG)、5′-UTR（非编码区）、3′-UTR、和105-base Poly(A) 序列。试剂盒还包含用于将目标DNA无缝克隆到预线性化载体的In-Fusion Snap Assembly Master Mix和FLuc对照片段（包括15 bp，3′ In-Fusion sequence；FLuc CDS；和15 bp，5′ In-Fusion sequence）。
 
② Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit（Code No. 6144）：
本试剂盒以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板，使用优化的高效T7 RNA聚合酶，通过体外转录可合成大量mRNA。除此以外，还包含用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I和用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液。真核细胞翻译蛋白质需要RNA的5’端有Cap结构，本试剂盒配合使用CleanCap Reagent AG（TriLink公司的Cap类似物）可以高效制备具有Cap结构的mRNA。另外，试剂盒包含单独的NTPs，方便优化或使用修饰NTPs如假尿苷替换，而且不会明显降低mRNA的产量。使用本产品，每次反应（20 μl 反应体系）可以合成高达 200μg 或更多的RNA。可以根据需要放大反应体系，即使使用10倍（200μl）反应体系也不影响mRNA预期产量（请参考说明书实验例）。※Cap类似物不包含在本产品中，请另外准备CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。
 
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
 
使用Takara IVTpro™ 系统合成 mRNA时，通过In-Fusion方法克隆目标基因（GOI）后，使用不会在 Poly (A) 下游留下额外序列的限制性内切酶切割是非常重要的。强烈建议使用 Hind III（Code No. 1060A/B）对用于mRNA合成的质粒进行线性化（请参考说明书和载体图谱信息）。
 
■ 用途
· 用于体外转录（IVT）模板质粒DNA的构建
· 配合使用TriLink公司的CleanCap Reagent AG体外转录合成mRNA
· 使用其它Cap类似物如Anti-Reverse Cap Analog (ARCA)合成带帽结构的mRNA
(* 请注意，使用ARCA时，需要设计与本产品不同的模板序列。)
· 用于长链非编码RNA（Long non-coding RNA）的合成
· 向导RNA（guide RNA）的合成
· siRNA前体的合成
· 用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成
· RNA探针的合成
 
■ 制品内容
Cloning Kit for mRNA Template（Code No. 6143）（10次反应）
 
产品组分 体积量 件数/Kit
1. Linearized Template Vector (50 ng/μl)  10 μl 1
2. FLuc Control Fragment (100 ng/μl) ＊1  10 μl 1
3. 5X In-Fusion Snap Assembly Master Mix  20 μl 1
 
*1：由 In-Fusion 序列 (15 bp) + FLuc-CDS + In-Fusion 序列 (15 bp) 组成的对照片段 (1,683 bp)
 
Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit（Code No. 6144）（20次量、20 μl反应体系）
 
产品组分 体积量 件数/Kit
1. 10X Transcription Buffer  40 μl 1
2. 10X ATP  40 μl 1
3. 10X CTP  40 μl 1
4. 10X GTP  40 μl 1
5. 10X UTP  40 μl 1
6. 10X Enzyme Mix  40 μl 1
7. Nuclease-Free Water  1 ml 3
8. DNase I  80 μl 1
9. Lithium Chloride Precipitation Solution  600 μl 1
10. Positive Control Template (FLuc) (0.5 μg/μl)＊2  10 μl 1
 
*2：由T7 启动子 + 5’UTR + FLuc-CDS + 3’UTR + Poly (A) 序列组成的线性质粒DNA。
 
■ 实验操作注意事项
· 本制品是通过IVT反应合成RNA的试剂。如果双链DNA模板、试剂、试管、微量移液器吸头或反应中使用的其他材料混入RNase污染，会导致使用本试剂盒获得的RNA收量降低或片段化。在反应中使用专用试管和微量移液器吸头，并戴上新的一次性手套以防止RNase污染。
· 10X Enzyme Mix 不要剧烈搅拌。
· 使用前将Lithium Chloride Precipitation Solution在室温下融化。融解后，如果充分混合后仍可见沉淀，可37℃保温溶解。如果仍有沉淀物，请直接使用，对性能没有影响。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外的其它必要试剂（主要试剂）
· CleanCap Reagent AG（TriLink公司）
· 修饰NTPs
· 限制酶（Hind III等等）
 
■ 序列信息 FLuc Control Fragment
序列信息（fasta格式）：点此进行下载
该序列与Positive Control Template（FLuc）中2,685～4,367（1,683 bp）的序列相同。
 
■ 序列信息 Linearized Template Vector
序列信息（fasta格式）：点此进行下载
Linearized Template Vector（2,921 bp）
 
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System
 
NeoR/KanR: 53～847
Ori: 1,172～1,760
CMV enhancer: 1,861～2,240
CMV promoter: 2,241～2,444
 
T7 promoter sequence: 2,489～2,505
Transcription start sequence (AGG): 2,506～2,508
5’UTR: 2,509～2,559
Upstream In-Fusion region (15 bp): 2,545～2,559
 
In-Fusion cloning site (linearized site): between 2,559 and 2,560
 
Downstream In-Fusion region (15 bp): 2,560～2,574
3’UTR: 2,560～2,672
Poly(A)105: 2,673～2,777
Restriction enzyme sites for plasmid linearization: 2,776～2,801(Hind III, Xho I, Sal I, Avr II, BamH I)
 
Poly(A) Forward Primer: 2,570～2,589
Poly(A) Reverse Primer: 2,863～2,882
 
<T7启动子后序列的详细信息>
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
■ 载体信息 Positive Control Template（FLuc）
序列信息（fasta格式）：点此进行下载
 
Positive Control Template（FLuc）（4,574 bp）
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
NeoR/KanR: 193～987
Ori: 1,312～1,900
CMV enhancer: 2,001～2,380
CMV promoter: 2,381～2,584
 
T7 promoter sequence: 2,629～2,645
Transcription Start Sequence (AGG): 2,646～2,648
5’UTR: 2,649～2,699
FLuc CDS: 2,700～4,352
3’UTR: 4,353～4,465
Poly(A)105: 4,466～4,570 (FLuc Control Fragment-derived sequence: 2,685～4,367)
 
Linearized site by Hind III (5′ overhangs) : 4,569 (4,573)
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
＜T7启动子后序列的详细信息＞
Takara IVTpro&trade; mRNA Synthesis System
 
 

页面更新：2022-09-28 14:03:20

mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase酶试剂盒Takara

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mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2470A mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase 2,500 U ￥684 mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
Takara 2470B（A×4） mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase 10,000 U ￥2,601 mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
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■ 制品内容（Code No. 2470A）mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase
mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase (50 U/μl) 2,500 U  
10× Capping Buffer 100 μl  
S-adenosylmethionine (SAM) (32 mM) 100 μl  
 
■ 制品说明
mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase是一种来源于牛痘病毒的甲基化酶，该酶特异性地甲基化5’端具有7-甲基鸟苷酸结构的Cap-0 RNA第一个核苷酸的2’-O，从而产生Cap 1 RNA。
已知Cap-1 RNA有助于抑制体内先天免疫应答并促进翻译。该产品还包括反应缓冲液和作为甲基供体的S-adenosylmethionine (SAM)，可以把Cap 0 高效的转化成Cap 1 RNA。此外，和Vaccinia Capping Enzyme （Code No. 2460A/B）一起使用，可以经一步反应把未加帽的RNA（5’-三磷酸RNA）加帽生成Cap 1 RNA。
 
■ 用途
Cap 1 mRNA的制备
 
■ 保存
-20℃
 
■ 来源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for vaccinia virus mRNA cap 2’-O-methyltransferase
 
■ 性质
分子量：约40 kDa
 
■ 活性定义
37℃条件下，1小时内甲基化10 pmol Cap 0 RNA所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
 
■ 使用注意
1. 混匀时，不要剧烈振荡。
2. 如果试剂、试管或微量移液器吸头被RNase污染，就会导致RNA产量减少或降解。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染，如戴一次性手套以及使用专用于RNA实验的试管及微量移液器吸头。
 
 

页面更新：2022-09-28 14:28:18

Wakosil® C18 (for mRNA Purification) 硅胶C18（用于mRNA纯化） 品牌：FUJIFILM Wako

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Wakosil® C18 (for mRNA Purification)

硅胶C18（用于mRNA纯化）

品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.：
储存条件： –
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

235-02391

 for Genetic Research 100 g –

Wakosil® C18 (for mRNA Purification) 硅胶C18（用于mRNA纯化） 品牌：FUJIFILM Wako

 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

mRNA Interferase™ -MazF酶试剂盒Takara

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mRNA Interferase™ -MazF
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2415A mRNA Interferase™ -MazF 1,000 U ￥2,003
￥1,502 		mRNA Interferase&trade; -MazF mRNA Interferase&trade; -MazF mRNA Interferase&trade; -MazF

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■ 制品内容
mRNA Interferase-MazF(20 U/μl) 1,000 U
5X MazF Buffer 1 ml
   
 
■ 制品说明
MazF是E. coli 毒素-抗毒素系统中的毒素蛋白，特异性切断单链RNA中ACA序列5’末端的核酸内切酶，不能切断双链RNA、双链DNA及单链DNA。本制品mRNA Interferase-MazF是E. coli 来源的MazF和E. coli来源的伴侣蛋白质基因Trigger factor的融合蛋白质。 
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 5X MazF Buffer组成
  200 mM   Sodium phosphate, pH7.5
  0.05%   Tween 20
 
■ 用途
限定消化ssRNA。 
 
■ 注意事项
1. 本酶特异性切断含ACA序列的ssRNA，但是也会受AC位点两侧序列的影响可能切断AC位点。
2. 本酶不能切断dsRNA。因此，由于RNA二级结构的影响，本酶不能切断所有的ACA位点序列。
3. 在反应液中添加盐，特别是Mg2+等二价阳离子时，本酶的活性会受到抑制。DTT不影响反应液中的酶活性。
4. 本酶切断的片段不能使用RNA Ligase直接进行连接反应，因为片段的两个末端分别是2’, 3’-cyclic phosphate和5’-OH。
 
 

页面更新：2020-02-27 11:42:36

Stemgent® mRNA 重编程试剂盒 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

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Stemgent® mRNA 重编程试剂盒Stemgent® mRNA 重编程试剂盒 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

◆产品概况

Stemgent® mRNA 重编程试剂盒与 microRNA Booster 试剂盒（00-0073）配套使用可以迅速，安全，有效制备人 iPS 细胞。该方法不发生整合，不含病毒，与临床研究相关。与慢病毒，仙台病毒和其他方法相比，16天内制备 iPS 细胞，３周内细胞可进行传代培养。慢病毒，仙台病毒和其他方法还需要花20周时间确认没有病毒残留。该系统完全免除了病毒相关的生物污染问题的顾虑。

 Stemgent® mRNA 重编程试剂盒包括５种重编程因子，监测转染效率的细胞核 GFP 标记蛋白，Stemgent Pluriton™ 重编程培养基， B18R 蛋白。试剂盒和操作方法都经过充分的检测和验证。该试剂盒已经能够将人 BJ 成纤维细胞进行重编程，该细胞可作为对照。Stemgent® mRNA 重编程试剂盒可以使研究正更容易调控蛋白表达水平的时间，量化控制重编程因子。



◆优势

●　非整合-无需进行基因组整合

●　快速重编程，至少 12 天制备克隆

●　量化控制各种重编程因子

●　不需要进行多次传代和细胞克隆筛选

●　在正常细胞和疾病细胞上进行验证

●　提供培训课程（收费）和在线支持

Stemgent® mRNA 重编程试剂盒 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

Stemgent® mRNA 重编程试剂盒 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit


 使用 mRNA 重编程系统制备 iPS 时程图片。在第 6-10 天观察到的 

 iPS细胞形态（放大 10×）。


 使用 mRNA 重编程系统制备 iPS 时程图片，第 12 天和第 14 天。

 第14天用 TRA-1-60 荧光染色（10×）。

◆相关产品


货号

名称

规格

00-0073

microRNA Booster Kit

microRNA增强试剂盒

1kit

00-0071

Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

mRNA 重编程试剂盒

1kit

00-0075

Stemgent® StemRN™ SR Reprogramming Kit

StemRNATM -SR重编程试剂盒

1kit

 

注：本品已停产，升级版本已推出：Stemgent® StemRNA™ 3rd Generation Reprogramming Kit（又名 StemRNA-NM Reprogramming Kit，产品编号：00-0076）。

视频

Stemgent® mRNA 重编程试剂盒 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

Stemgent mRNA 重编程试剂盒使用技巧

Kit Contents

●    2 vials – Stemgent Oct4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0014), 20µg

●    1 vial – Stemgent Klf4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0015), 20µg

●    1 vial – Stemgent Sox2, Human(Cat. No. 05-0016), 20µg

●    1 vial – Stemgent Lin28 mRNA, Human(Cat. No. 05-0017), 20µg

●    1 vial – Stemgent c-Myc mRNA, Human(Cat. No. 05-0018), 20µg

●    1 vial – Stemgent nGFP mRNA (Cat. No. 05-0019), 20µg

●    B18R Recombinant Protein, Carrier-Free (Cat. No. 03-0017), 50µg

●    0.2 ml of Pluriton™ Supplement 2500X (Cat. No. 01-0016)

●    500 ml of Pluriton™ Medium (Cat. No. 01-0015)

 

Storage and Stability

1.      Store the box (Part 1 of 2) containing the 7 vials of mRNA, the 1 vial of B18R, and the 1 vial of Pluriton Supplement at or below -70°C. 

2.      Store the bottle (Part 2 of 2) of Pluriton Medium at -20°C.

3.    All kit components are stable for a minimum of 3 months from date of receipt, when stored as directed.

 

Quality Control

The Stemgent mRNA Reprogramming Kit is functionally tested for successful mRNA-based reprogramming of BJ human fibroblasts. Complete reprogramming of iPS cell colonies is confirmed by continued expression of pluripotency markers and expansion of primary iPS colonies into stable lines. All components are sterile and have tested negative for mycoplasma.


Recommended Usage

Refer to the Stemgent Protocol “Reprogramming Human Fibroblasts using the Stemgent mRNA Reprogramming Kit” for detailed instructions on material handling and productive use of the Stemgent mRNA Reprogramming Kit.


Documents

Limited Use License MIT

Limited Use License iPS Academia Japan


Related Products

●   Stemgent Oct4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0014)

●   Stemgent Klf4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0015)

●   Stemgent Sox2 mRNA, Human(Cat. No. 05-0016)

●   Stemgent Lin-28 mRNA, Human(Cat. No. 05-0017)

●   Stemgent c-Myc mRNA, Human(Cat. No. 05-0018)

●   Stemgent nGFP mRNA (Cat. No. 05-0019)

●   Stemedia™ NutriStem™ XF/FF Culture Medium (Cat. No. 01-0005)

●   Stemolecule™ Y27632 (Cat. No. 04-0012)

●   Stemfactor™ Fibroblast Growth Factor-basic (Human Recombinant) (Cat. No. 03-0002)

●   microRNA Booster Kit (00-0073)

      ●   RNA Transfection Kit (00-0069)

      ●   mRNA Reprogramming Factors Set: hOKSML (00-0067)

      ●   NuFF-RQ™ IRR (GSC3002G)

●   FGF-basic, Human Recombinant (03-0002)

●   XF/FF Culture Medium (01-0005)

      ●   TRA-1-60 Antibody (DyLight™ 488), Mouse anti-Human (09-0068)

      ●   TRA-1-81 Antibody (DyLight™ 488), Mouse anti-Human (09-0069)

      ●   TRA-1-81 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0011)

      ●   TRA-1-60 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0010)

●   Nanog Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0020)

●   Oct4 Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0023)

●   SSEA-4 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0006)

●   StemRNA™-SR Reprogramming Kit (00-0075)


Specification Sheets

●    00-0071 Product Specification Sheet

Safety Data Sheets

●   03-0017 Safety Data Sheet

●   00-0071 Safety Data Sheet

●   01-0015 Safety Data Sheet

●   05-XXXX mRNA Safety Data Sheet

●   01-0016 Safety Data Sheet

Manuals

●   User Manual: Stemgent mRNA Reprogramming System (updated January 2012)

Application Notes

●   Generation of Safe, Integration-free Human Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells using the mRNA Reprogramming System

Brochures

●   Brochure: Stemgent mRNA Reprogramming System

Other Documents

●   Scientific Poster: mRNA Reprogramming SLAS 2011

●   FAQs: mRNA Reprogramming

●   Limited Use License MIT

●   Limited Use License iPS Academia Japan

Product Sheets

●   mRNA Reprogramming System: The fastest and safest non-integrating reprogramming technology

 

  [1]    Pankaj K Mandal and Derrick J Rossi. (2013) Reprogramming human fibroblasts to pluripotency 

       using modified mRNA. Nature Protocols, 8: 568 – 582.

  [2]     Angel, M., and Yanik, M.F. (2010) Innate immune suppression enables frequent transfection with 

       RNA encoding reprogramming proteins. PLoS One 5: e11756.

  [3]     Warren, L., Manos, P.D., Ahfeldt, T., Loh, Y.H., Li, H., Lau, F., Ebina, W., Mandal, P.K., Smith, Z.D.,

        Meissner, A., Daley, D.Q., Brack, A.S., Collins, J.J., Cowan, C., Schlaeger, T.M., and Rossi, D.J. (2010)

       Highly efficient reprogramming to pluripotency and directed differentiation of human cells with 

       synthetic modified mRNA. Cell Stem Cell 7: 618-630.

  [4]     Yakubov, E., Rechavi, G., Rozenblatt, S., and Givol, D. (2010) Reprogramming of human fibroblasts

       to pluripotent stem cells using mRNA of four transcription factors. Biochem Biophys Res Commun.

      394: 189-193.


Additional Publications

●     Paull D; Sevilla A; Zhou H; Hahn AK; Kim H; Napolitano C; Tsankov A; Shang L; Krumholz K; 

 Jagaseesan P; Woodard CM; Sun B; Vilboux T; Zimmer M; Forero E; Moroziewicz DN; 

Martinez H; Malicdan MCV; Weiss KA; Vensand LB; Dusenberry CR; Polus H; Sy KTL; 

Kahler DJ; Gahl WA; Solomon SL; Chang S; Meissner A; Eggan K; Noggle SA. "Automated,

 high-throughput derivation, characterization and differentiation of induced pluripotent 

stem cells." Naure Methods 12:885 (2015)

●        Briggs SF; Dominguez AA; Chavez SL; Reijo Pera RA. "XIST in human preimplantation 

embryos and iPSCs." Stem Cells 33:1771 (2015)

 ●     Josowitz R, Lu J, Falce C, D’Souza SL, Wu M, Cohen N, Dubois NC; Zhao Y; Sobie EA; Fishman

 GI; Gelb BD. Identification and purification of human induced pluripotent stem cell-derived

 atrial-like cardiomyocytes based on sarcolipin expression. PLoS ONE 9(7): e101316 (2014)

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
00-0071 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit
Stemgent® mRNA 重编程试剂盒		 1kit –