标签归档：dam

λ DNA (dam-, dcm-)酶试剂盒Takara

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

λ DNA (dam–, dcm–)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3019 λ DNA (dam–, dcm–) 400 μg ￥171 λ DNA (dam-, dcm-) λ DNA (dam-, dcm-) λ DNA (dam-, dcm-)
收藏产品 加入购物车
 
□ 浓度 300-500 μg/ml
□ 包装量 400 μg
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Bacteriophage λcI857 Sam7 (from a heat-inducible E. coli (dam–, dcm–) lambda lysogen)
 
■ 链长
48,502 bp
 
■ 纯 度
1) OD260 nm/OD280 nm＞1.8。
2) 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 在Mbo I 酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 用Mbo I 酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现十余条清晰的DNA电泳带。
 

页面更新：2020-08-04 10:03:47

E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息。

E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9129 E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10 ￥407 E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Ttryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×106 cfu/μg。
E.coli HST04 dam–/dcm–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA+菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST04 dam–/dcm–： F–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2020-12-14 14:12:25