Wakopak Wakosil 10SIL-120 4.0*200mm 硅胶柱Wakopak Wakosil 10SIL-120 品牌:FUJIFILM Wako


Wakopak Wakosil 10SIL-120 4.0*200mm

硅胶柱Wakopak Wakosil 10SIL-120

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

233-59081

No grade 1 column(D)

Wakopak Wakosil 10SIL-120 4.0*200mm                                                      硅胶柱Wakopak Wakosil 10SIL-120            品牌:FUJIFILM Wako


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Smart-SPE C18-30 品牌:Asti Sci


品牌:Asti Sci
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

307-94971

100 pcs 咨询


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ExoTrap Exosome Isolation Spin Column Kit for protein research 外泌体分离亲和柱套装,蛋白研究用 品牌:Cosmo Bio


品牌:Cosmo Bio
CAS No.:
储存条件:+4℃ DNF
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

CSR-SHI-EXO-K010

10 Preps 咨询


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本产品是特异性识别外泌体marker CD9,CD63,CD81的抗体,运用免疫沉淀法,分离血清、培养上清液的外泌体。

*已获得专利,号码为:PCT/JP2012/083612

1-(3-Isothiocyanatobenzyl)-4-[2-(3,4-dihydro-2H-1-benzopyran-6-yl)-5-oxazolyl] pyridinium bromide 品牌:Chemodex


品牌:Chemodex
CAS No.:155863-01-7
储存条件:-20°C
纯度:>90% (HPCE)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

CDX-I0034-M025

25 mg 1,130.00


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pEBMulti-Neo TARGET tag-N N端插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体 品牌:Wako


品牌:Wako
CAS No.:
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

162-26531

for Genetic Research 20 ug

pEBMulti-Neo TARGET tag-N                                                      N端插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体             品牌:Wako


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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 pEBMulti是哺乳动物(人,猴子)细胞系的表达载体。该载体插入了TARGET tag,该tag位于多克隆位点的N末端。该载体有oriP和EBNA1(EB病毒细胞核抗原1),所以pEBMulti可以稳定遗传。该载体不整合到染色体DAN而是附着在染色体DNA上。可用于构建稳定的表达细胞系。载体大小:10 kbp 组成: 10 Mm Tris-HCl, 1mM EDTA 浓度: 0.5 μg/μl
抗生素标志:G418(哺乳动物细胞),卡那霉素(E.coli)

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)酶试剂盒Takara

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息。

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632640 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 3 × 100 μg ¥6,845 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
Clontech 632641 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 100 μg ¥2,701 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
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Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation Ready)(Code No. 632641/632640)产品名称变更为Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) ,产品内容没有发生变化。(2021年5月)
 
 
          基因敲除    
          重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)            
  基因敲入        
          重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)        
 
 
降低脱靶效应,可用于in vivo基因编辑实验
Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)
· 适用于电穿孔方法的低甘油含量、高浓度的Cas9蛋白质溶液
· 与质粒导入系统相比较,脱靶效应受到明显抑制
· NLS(核定位信号)有助于实现快速高效突变导入
· 与Guide-it Complete sgRNA Screening System组合使用实现高效率的基因编辑
 
■ 产品说明:
Guide-it Recombinant Cas9(3 μg/μl)是来源于野生型酿脓链球菌Streptococcus pyogenes,适用于CRISPR/Cas9基因编辑实验的重组Cas9蛋白质溶液。
高浓度Cas9蛋白质溶液中甘油浓度比其他公司低,特别适用于电穿孔导入方法。与借助质粒导入Cas9基因序列方法相比较,避免了残留Cas9基因的持续表达,有效抑制了脱靶效应。
无需经过蛋白质转录·翻译·表达过程,C末端的NLS(核定位信号)可以实现快速有效的突变导入。
Cas9导入细胞首先需要形成Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物,sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit(Code No. 632635)或者Guide-it Complete sgRNA Screening System(Code No. 632636)。
 
■ 实验例:
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
图1. AAVS1或者CXCR4基因同源重组修复(HDR)效率
Guide-it Recombinant Cas9(3 μg/μl)和修复模板复合物通过电穿孔的方式导入至CD34+造血干细胞中检测同源重组修复(HDR)效率。将包含Hind III酶切位点的修复模板插入至AAVS1 基因中,包含Hind III和BamH I酶切位点的修复模板插入至CXCR4基因中。之后通过对细胞内靶基因进行PCR扩增和限制酶剪切分析,确认突变导入效率。基因编辑效率标注在凝胶阳性孔处。在基因编辑前野生型CXCR4基因已包含1处BamH I位点,因此BamH I剪切CXCR4基因后额外多显示一条条带。
 
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
图2. 不同公司Cas9产品在hiPS細胞中基因敲除效率比较
剪切后电泳条带的强弱可以半定量估计发生基因编辑细胞的百分数。Guide-it Recombinant Cas9(3 μg/μl)与Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA相结合,通过电穿孔的方法导入Cellartis hiPSC-18细胞,采用Guide-it Mutation Detection Kit(Code No. 631448)确认突变导入效率,%即表示基因编辑效率。如图所示,Guide-it Recombinant Cas9(3 μg/μl)在多数靶基因位点均显示有效的基因编辑。
  * 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.
 
 
■ 浓度
3 μg/μl
 
■ 保存
-70℃
(注意)避免反复冻融。首次溶解之后,建议按照使用量分装保存。
 
■ 所需要的其它产品(主要产品)
· 电穿孔装置:
Neon Transfection System(Thermo Fisher Scientific)或者 4-D Nucleofector System(Lonza)
*各装置的导入条件请阅读使用说明书。

· sgRNA制备及筛选
Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit(Code No. 632635):用于sgRNA制备及纯化
Guide-it Complete sgRNA Screening System(Code No. 632636):用于确认制备的sgRNA的有效性

 
 
产品详情请点击:重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
 
 
■ 关联资料
相关资料:
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页面更新:2021-07-19 12:52:26

Wakogel® 60N, 150~425μm 硅胶60N,150~425μm 品牌:FUJIFILM Wako


Wakogel® 60N, 150~425μm

硅胶60N,150~425μm

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:63231-67-4
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

233-02691

for Column Chromatography 500 g

Wakogel® 60N, 150~425μm                                                      硅胶60N,150~425μm            品牌:FUJIFILM Wako


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alpha-Cyclodextrin alpha-环化糊精 品牌:Wako


品牌:Wako
CAS No.:10016-20-3
储存条件:室温
纯度:97.0+% (HPLC)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

033-08332

Wako 1st Grade 25 g 840.00


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钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 货号21058-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐    货号21058 货号 21058 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1236
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 751.59 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,尽管Fura-2已被广泛用作首选的可激发比率的钙指示剂,但它具有一定的局限性,例如,与单波长钙染料(如Fluo-8®和Cal-520®)相比,灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8,以进一步改善Fura-2的钙反应。Fura-8的发射转变为更长的可见光波长,与普通滤光片组兼容。它具有与Fura-2相当的钙亲和力。与Fura-2 AM相比,Fura-8 AM对钙的敏感性更高,信号/背景比更高。例如,通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐。

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM,Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ,Cal-590 或Cal-630 AM酯:

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下,AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

a)在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b)在实验当天,将Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液(0.04%Pluronic®F-127)中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意:非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c)如果您的细胞(如CHO细胞)含有有机阴离子转运蛋白,可将丙磺舒(1-2 mM)加入染料工作溶液中(最终浓度为0.5-1 mM)以减少渗漏去酯化指标。

d)将等体积的染料工作溶液(来自步骤b或c)加入细胞板中。

e)将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟,然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意:孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f)用HHBS或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如1mM丙磺舒,如果适用)替换染料工作溶液,以去除多余的探针。

g)在Ex / Em = 490 / 525nm(对于Cal-520 AM),540 / 5000nm(对于Cal-590 AM)或600 / 640nm(对于Cal-630 AM)进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应:

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd,使用以下等式:

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光,Fmin是不存在钙时的荧光,Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数(Kd)是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比,荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者,细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 Cat#21026
钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐 Cat#21057

说明书
钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐.pdf

TF-200 0.2 um Plain 25 mm 品牌:Pall


品牌:Pall
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

368-04571

100 plates 咨询


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Polychlorinated Biphenyls and Organochlorine Pesticides in Marine Sediment (High Pollutant Concentrations) 海洋沉积物中的多氯联苯和有机氯农药(高污染浓度) 品牌:AIST


品牌:AIST
CAS No.:
储存条件:2-10℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

633-05351

60 g 咨询


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Carbomix H-NP 4.6×250 mm(交联度5%) 利巴韦林专用柱 品牌:Sepax


品牌:Sepax
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

261005-4625

1根 咨询


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Wakosil 7SIL-120 全多孔硅胶填料(粒径:7微米,孔径:12nm) 品牌:FUJIFILM Wako


Wakosil 7SIL-120

全多孔硅胶填料(粒径:7微米,孔径:12nm)

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:63231-67-4
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

237-01131

for High Performance Liquid Chromatography 10 g

Wakosil  7SIL-120                                                      全多孔硅胶填料(粒径:7微米,孔径:12nm)            品牌:FUJIFILM Wako


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Smart-SPE set of B method 品牌:Asti Sci


品牌:Asti Sci
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

307-95071

3 types×30 咨询


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pCAG-Neo TARGET tag-C C端插入TARGET标签的pCAG-Neo 载体 品牌:Wako


品牌:Wako
CAS No.:
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

163-26441

for Genetic Research 20 ug

pCAG-Neo TARGET tag-C                                                      C端插入TARGET标签的pCAG-Neo 载体             品牌:Wako


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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产品描述相关资料下载相关产品浏览记录 该载体可转染动物细胞进行短暂表达,载体上的TARGET Tag位于多克隆位点的C端。载体大小: 5.2 kbp 组成: 10 Mm Tris-HCl, 1mM EDTA 浓度: 0.5 μg/μl 抗生素标记:G418/卡那霉素(E. coli)

N-Phenylhydroxylamine N-苯基羟胺 品牌:Chemodex


品牌:Chemodex
CAS No.:100-65-2
储存条件:-20°C
纯度:>98% (HPLC)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

CDX-P0103-G001

1 g 1,060.00


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重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)酶试剂盒Takara

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重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632678 Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl) 200 μg ¥4,755
¥3,804
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
Clontech 632679 Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl) 500 μg ¥8,868
¥7,094
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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          基因敲除    
          重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl) 重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)            
  基因敲入        
          重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)        
 
 
Guide-it Recombinant Cas9是一种重组野生型酿脓链球菌Cas9核酸酶,在C-端进行了核定位信号(NLS)修饰,可用于CRISPR/Cas9介导的基因编辑实验。通过电穿孔的方式将Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物导入至哺乳动物细胞,在使脱靶效应最小化的同时,更容易实现高效率的基因编辑实验
 
Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl)甘油含量为50%,这款Cas9蛋白质溶液已被证实是无菌的,并且无论是和单向导RNA(sgRNA)形成核糖核蛋白复合物(RNP)通过电穿孔的方式导入用于基因敲除实验,还是作为RNP与供体修复模板一起导入用于基因敲入实验,都具有良好的哺乳动物细胞耐受性。
 
sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit(Code No. 632635)或者Guide-it Complete sgRNA Screening System(Code No. 632636)
 
GMP级别的重组Cas9蛋白质Recombinant Cas9 Protein GMP grade(Code No. T230)请点击这里查看。
 
■ 概览
· 这款Cas9蛋白质溶液是无菌的,且哺乳动物细胞耐受性良好
· 与Guide-it Complete sgRNA Screening System配合使用可实现高效率编辑
· 优于质粒导入系统,脱靶效应更低
· 对难转染细胞系效果好
 
■ 实验例:
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
人诱导多能干细胞(hiPSC)CD81基因敲除效果。在本实验中,将Cas9-sgRNA RNP复合物通过电穿孔方式导入至hiPSC-18 和hiPSC-22两种诱导多能干细胞中敲除CD81基因。CD81抗体染色后流式细胞术检测结果显示,电穿孔10天后hiPSC-18的敲除效率为91%,hiPSC-22的敲除效率为85%,显示出非常高的基因编辑效率。
 
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
AAVS1和CXCR4基因同源定向修复。Panel A. 这些图表展示了CD34+造血干细胞的HDR实验是如何完成的。将含有Hind III酶切位点的ssDNA模板插入AAVS1基因中,将同时含有Hind III和Bam HI酶切位点的模板插入CXCR4基因中。每侧同源臂长度为90 bp。Panel B. 将修复模板和Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入后,用PCR扩增靶细胞中各目标基因,并进行酶切分析。编辑效率显示在凝胶上每个阳性孔上面。CXCR4基因经过BamH I酶切后显示出一条额外条带,原因是基因编辑前野生型基因中已经存在一个BamH I位点了。基因编辑5天后,我们证实98%的造血干细胞CD34+染色阳性。
 
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
数据来源于Takara Bio USA, Inc.
Cellartis hiPSC-18细胞系基因敲除。通过剪切后条带的强度可以对编辑细胞所占的百分比进行半定量估计。与其他品牌推荐的制备向导RNA的方法相比,Guide-it Recombinant Cas9与Guide-it In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA结合使用,可以为许多靶点提供一致且有效的基因编辑。凝胶底部的每个数字代表所示RNP的基因编辑效率(以百分比表示)。
 
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
CD3+ Pan T细胞治疗相关基因的敲除。在本实验中,电穿孔导入Cas9/sgRNA RNPs至 CD3+Pan T细胞进行单基因敲除(B2MPD-1)或双基因敲除(B2M+PD-1TRAC+TRBC)。细胞解冻后,在LymphoONE培养基中生长,并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9(10 μg/μl)操作指南,将RNP复合物通过电穿孔方式导入至细胞,设置3个平行实验组。对于双基因敲除,单独制备靶向各目标基因的RNP复合物,然后与细胞混合进行电穿孔。电穿孔7天后,使用流式细胞仪检测基因敲除频率。
 
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
CD3+ Pan T细胞中B2M基因的敲除。在本实验中,将Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入至CD3+ Pan T细胞中,以敲除B2M基因。细胞解冻后,在LymphoONE培养基中生长,并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9(10 μg/μl)操作指南,将RNP复合物通过电穿孔导入至细胞,设置3个平行实验组。电穿孔7天后,用流式细胞仪检测基因敲除频率和细胞活力。
 
Technical Notes
Improved CRISPR/Cas9 genome editing in hard-to-transfect mammalian cells using AAV
 
Guide-it™ Recombinant
Cas9(10 μg/μl)
重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
 
产品详情请点击:重组Cas9蛋白质(10 μg/μl)
 
 

 

页面更新:2021-08-16 10:56:34

磷酸化ALK (Tyr1586) (3B4) 兔单克隆抗体 Phospho-ALK (Tyr1586) (3B4) Rabbit mAb

磷酸化ALK (Tyr1586) (3B4) 兔单克隆抗体

Phospho-ALK (Tyr1586) (3B4) Rabbit mAb

详细描述:

应用范围:W; 反应种属:Human; 标记:无标记。

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3348S 磷酸化ALK (Tyr1586) (3B4) 兔单克隆抗体 100µl 咨询客服