无需Polybrene的慢病毒快速转导酶试剂盒Takara

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无需Polybrene的慢病毒快速转导
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631256 Lenti-X Accelerator 400 μl ¥4,245 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
Clontech 631257 Lenti-X Accelerator 1,000 μl ¥9,743 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
Clontech 631254 Lenti-X Accelerator Starter Kit Each ¥12,183 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
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Lenti-X Accelerator是一项基于磁珠的技术,其作用是加快慢病毒转导实验速度。传统的慢病毒转导需要将细胞和病毒与Polybrene孵育过夜,但是Lenti-X Accelerator可以让您在30分钟内完成这个过程,并且避免使用Polybrene。带电荷的磁珠与慢病毒包装上清液中的病毒粒子结合,并在磁场作用下拉近并与细胞接触。
 
Lenti-X Accelerator非常适合转导慢病毒和MMLV逆转录病毒,包括MSCV逆转录病毒制剂。它是Polybrene敏感细胞类型的理想选择。Lenti-X Accelerator reagent (Code No.631256 & 631257)和Magnetic Separator for Cell Culture (Code No.631255)可以单独购买,也可以购买套装Lenti-X Accelerator Starter Kit (Code No.631254)。低滴度慢病毒样品在转导前可以使用Lenti-X Concentrator进行浓缩,提高病毒滴度。
 
我确实需要使用磁力分选器吗?
Lenti-X Accelerator磁珠足够大,即便不使用磁铁,单依靠重力也可进行转导。与Polybrene(过夜)相比,转导仍然是非常快速的(15分钟),然而使用磁力分选器可以将转导时间缩短至5分钟,并且转导效率可以提高10%。磁力分选器还可以轻松地从转导细胞培养板中去除磁珠-比如,胰蛋白酶消化后分离细胞,可以将细胞短暂暴露于磁铁,然后再将它们吸到另一个培养皿中。
 
概述/特点
· 使用磁珠仅需30分钟即可完成慢病毒转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型的理想选择
· 转导前使用Lenti-X Concentrator浓缩低滴度慢病毒样品
 
应用
· 慢病毒和MMLV逆转录病毒,包括MSCV逆转录病毒制剂的转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型
 
实验例
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图1. Lenti-X Accelerator与Polybrene的转导作用对比。将结合了病毒的磁珠放置于磁场中,可大大提高单层细胞表面的局部病毒浓度。这样可以将预孵育后的转导时间缩短至5分钟,预孵育时间为20分钟,在这段时间中磁珠将与病毒进行结合,而使用Polybrene则需要转导过夜。加速转导也降低了敏感靶细胞在病毒上清液中的暴露时间。
 
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图2. 使用Lenti-X Accelerator(25分钟)进行慢病毒转导要比使用Polybrene(16小时)快得多。使用表达ZsGreen1的慢病毒载体转染HT1080细胞。Lenti-X Accelerator磁珠(8 μl)与200 μl(approx. 1×106 total IFU)病毒上清液在室温下预孵育20分钟,然后添加到HT1080细胞中并放置在磁力分离器上孵育5分钟。同样也使用等量病毒、6 μg/ml Polybrene转导HT1080细胞5分钟或者过夜。37℃培养72小时后,使用流式细胞仪测定转导细胞数量。
 
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图3. 磁力分离器适用于96孔、6孔、24孔、12孔细胞培养板
 
 
产品详情请点击:无需Polybrene的慢病毒快速转导
 
 

页面更新:2020-04-10 16:07:10

ISOSPIN Cell & Tissue RNA 从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

从动物细胞和组织提取RNA试剂盒ISOSPIN Cell & Tissue RNA                              从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Cell & Tissue RNA

ISOSPIN Cell & Tissue RNA                              从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

◆特点


 高纯度RNA

 离心法去除杂物和硅基质膜上的DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

 无需使用过滤器进行前处理

 无需使用过滤器对样品均匀化或过滤。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

 无需苯酚、氯仿

 无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

 包装附有DNase I

 试剂盒内含有DNase I (RNase free),无需另外购买。

◆产品列表

ISOSPIN Cell & Tissue RNA (50次用量)


产品

包装

保存

备注

PT Extraction Buffer(组织用)

30 mL × 1 支

室温

C Extraction Buffer(细胞用)

30 mL × 1 支

室温

PT Binding Buffer

40 mL × 1 支

室温

含有乙醇

PT Wash1 Buffer

40 mL × 1 支

室温

含有乙醇(清洗液)

PT Wash2 Buffer

40 mL × 1 支

室温

含有乙醇(清洗液)

DNase I (RNase free)

2,000 units × 1 支

-20°C

10× DNase I Buffer

1 mL × 1 支

室温/ -20°C

ddWater (RNase free)

1 mL × 8 支

室温

配制DNase I 溶液・洗脱

Spin Column

50 支 × 1 袋

冷藏

上端组成:吸附柱
下端组成:收集管

运送方法


NIPPON GENE 提供直送服务,将室温品和冷藏品的试剂盒、-20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱,在常温下进行运输。

◆使用实例

步骤

  动物培养细胞:往动物细胞(不超过3×106 cells)里加入600 μL的C Extraction Buffer(细胞用),用移液器溶解细胞。

  动物组织: 取新鲜动物组织(不超过10 mg)或冷冻组织置于1.5 mL微量离心管,加入600 μL PT Extraction Buffer(组织用),直接用研磨

                         杵捣碎。涡旋30 秒以上。

  ▶ 提取步骤如下:

ISOSPIN Cell & Tissue RNA                              从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

Data 1 RNA的回收量标准和吸光谱

RNA的回收量标准

HeLa细胞

15 μg RNA/10cells

Jurkat细胞

10 μg RNA/10cells

Vero 细胞

15 μg RNA/106 cells

小鼠脑

1.0 μg RNA/mg tissue

小鼠肝脏

3.5 μg RNA/mg tissue

小鼠肾脏

3.0 μg RNA/mg tissue

小鼠精巢

1.5 μg RNA/mg tissue

RNA的吸光度

ISOSPIN Cell & Tissue RNA                              从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

Data 2 从培养细胞(HeLa)中提取RNA

ISOSPIN Cell & Tissue RNA                              从动物细胞和组织提取RNA试剂盒


1%凝胶琼脂糖 S

右端: Marker 6

泳道 1, 2, 3

各0.5μg


  从1×106 HeLa细胞中提取出RNA后,进行吸光值测定和电泳(n = 3)。

260/280

260/230

µg/106 cells

2.035±0.019

2.254±0.028

19.30± 4.69

◆备注


  本产品仅用于实验研究,不能作医药及其他目的使用。

◆资料 Data Sheet

产品指南

  · ISOSPIN Cell & Tissue RNA(PDF 356KB)

SDS(Safety Data Sheet)

  · ISOSPIN Cell & Tissue RNA (PDF)

宣传册子

  · ISOSPIN Cell & Tissue RNA 手册(PDF 1MB)

◆相关产品

  · Collection Tube (收集管单品套装)

  · ISOGEN II (total RNA和small RNA提取试剂)

  · ISOGEN、ISOGEN-LS(RNA提取试剂)

  · ISOGEN with Spin Column(RNA提取试剂)

  · ISOSPIN Plant RNA (从植物组织提取RNA试剂盒)

  · ISOSPIN Plasmid (从大肠杆菌中提取质粒)

  · ISOSPIN PCR Product (PCR产物的纯化)

  · ISOSPIN Agarose Gel (琼脂糖凝胶中DNA的纯化)

  · ISOSPIN Blood & Plasma DNA (从血液、血清、血浆中提取DNA)


Q:与RNA提取试剂 ISOGEN 的使用区别是?

A:两者有以下的区别,请根据实验目的进行选择。

  • ISOGEN 含有苯酚等抑制RNase活性的成分,样品溶液(匀浆)可中途冷冻保存。
  • 虽然在步骤过程中,不可保存ISOSPIN Cell & Tissue RNA,但无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

  • ISOGEN 是在溶液分层后使用乙醇沉淀提取RNA,能简单地扩大提取。
  • ISOSPIN Cell & Tissue RNA 使用离心柱进行提取,操作简单,适合多样品处理。

Q:用 RNA later®(RNA稳定剂)保存的样本也可使用本试剂盒提取RNA吗?

A:可以提取。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
314-08211 ISOSPIN Cell & Tissue RNA 50次用量