Q1: 我对 TAB 列举法有些问题。
a. YSG 灭菌水是什么意思,我想知道制备的比率。
b. 阳性/阴性测试:样品制备步骤提到的用 YSG 培养基稀释,稀释比例是多少?
c. 如果是水样品的话,是不是用相同方法?
A1: (a,b)回答:
"YSG distilled water"是错误说法,正确的说法是“灭菌水”。制备比例的话,请参考下面的信息,不过具体案例具体分析。
(参考数据来自日本果汁联合会R)
——————————————————–
果汁 〔Brix 值〕 参考比例
———————————————————
苹果 〔70〕 ・・・・・・・・ 10 倍
橙子 〔65〕 ・・・・・・・・ 10 倍
红葡萄 〔65〕 ・・・・・・・・ 20-50 倍
白葡萄 〔65〕 ・・・・・・・・ 20 倍
胡萝卜 〔40〕 ・・・・・・・・ 10 倍
柠檬 〔50〕 ・・・・・・・・ 10 倍
葡萄柚 〔55〕 ・・・・・・・・ 20 倍
桃子 〔55〕 ・・・・・・・・・10 倍
———————————————————
c. 水样品的话,是不是用相同方法?
回答(c):对不起,我们不能明确告知是否可以运用,我们手头没有相关记录。
有一种软饮料“near water",来自调味品,不是果汁(或者少量)和水。我们听说该款产品可用于检测该类饮料。
Q2: 果糖能够作为样品吗?
A2: 非常抱歉,我们这边没有关于愈创木酚检测糖果(果糖)样品的相关知识。所以我们建议参考简单流程,该流程修改自
“Japanese spore counting method of sugar samples”。如果你们有预处理微生物测试的流程,请按照你们的操作流程操作代替操作
流程中的“样品制备“。该流程中有制备 YSG 液体培养基的方法。如果 您使用我们提供的流程,不需要使用接种环和 YSG 琼脂板。
Q3: 我们使用该试剂盒鉴定 Alicyclobacillus acidoterrestris。我们的客户是做墨西哥沙拉的,它们也有类似愈创木酚的异味。我们是否可
以用该试剂盒去检测沙拉中的愈创木酚(主要西红柿,红色)?红色是否会干扰?
A3: 我们这边没有数据是关于愈创木酚检测试剂盒检测沙拉酱的案例。如果您考虑观察方法,请参考下面的"注意事项" 。
注意事项(1):来自样品的固体如果样品的固体中有 AAT,必须采取胃部处理或者匀浆去除固体的致病菌。
注意事项(2):材料中多酚的影响多酚是 AAT(Alicyclobacillus acidoterrestris)生长抑制剂。因此,检测 AAT 必须稀释样品 20~50
倍。否则,无法检测出来。我们不清楚沙拉中有多少多酚。但是西红柿是含有多酚的。一般稀释 10 倍。可以考虑沙拉稀
释超过 20 倍。
注意事项(3):关于样品的粘度。稀释降低粘度。因子样品必须适当稀释。请参考微生物稀释比例检测样品,不包括抗热嗜酸性细菌。
注意事项(4):关于样品到标本上携带的颜色如果最终采用过氧化物酶方法,如果样品带有棕色的话,可能判断起来很麻烦。如果样品
稀释的话,我认为不会引起大问题。
注意事项(5):其他干扰材料如果使用过氧化物酶方法,通过过氧化物酶反应会使愈创木酚(AAT 产物,会引起异味)聚合并且变成棕
色。我们认为沙拉酱包括不同的香味料可以作为材料。因此,如果有材料抑制过氧化物酶反应或者含有的物质可以起过氧
化酶作用,通过过氧化物酶反应变成棕色,会引起假阳性或者假阴性的结果。
Q4: 如何接种 TAB 到 YSG 琼脂板上面?请提供流程。
A4: 根据 Japan Fruit Juice Association,有3种方法
1)倾注平皿的方法
2)用曲面玻璃棒涂布平板的方法
3)MF 方法
如果告知客户的样品和检测方法,我们可以推荐方法。
对于您的信息,请让我们知道在我们手册里面 TAB 检测的流程。
Q5: 是否提供不含香草酸的 YSG 培养基?
A5: 是的,我们提供不含香草酸的 YSG 培养基。然而售价会高,也需要额外时间考虑生产。另外,小批量生产会比较难。
Q6: 是否有数据或者参考文献显示 Guaiacol detection kit 的准确性? 我们的客户希望提供上述信息。
A6: 关于产品的准确性,Japan Institute of fruit juice 认可检测操作手册还有手册上提到的批次准确性的数据。
然后,英文版的操作搜出不提供准确性的信息。
关于您的要求,请参考下面有研发者 by developer(Motohiro Niwa)写的论文 "Development of a rapid detection method of
A. acidoterrestiris, Hazardous bacteria to acidic beverage"。
Q7: 我们需要下面两者之一的微生物菌株 A.acidobacillus 或者 A.acidoterrestris 去完成分析,制定质量政策。是否可以从你们那边获得?
A7: 非常抱歉我们不能提供细菌菌株。您可以通过 ATCC 和 DSMZ 的当地经销商联系购买。
http://www.atcc.org/About/tabid/138/Default.aspx
http://www.dsmz.de/
下面的菌株是分泌愈创木酚的。
———————————————————-
・ A.acidoterrestris ATCC49025
・ A.acidoterrestris DSM2498
・ A.acidoterrestris DSM3923
・ A.acidoterrestris DSM3924
Q8: 该试剂盒是否可用于牛奶或者啤酒?
A8: 关于牛奶和啤酒,我们没有相关的信息。
Q9: 该试剂盒可以检测多少愈创木酚?
A9: Va-YSG 培养基 和 Guaiacol detection kit 能够检测 25 ppm 愈创木酚。
Q10: 是否与关于假阳性结果的信息?
A10: 如果样品中有过氧化物酶或则过氧化氢酶的话,我们试剂盒可能还有假阳性的结果。
Q11: 是否可用 BAT 培养基代替YSG琼脂?
A11: 他们的 YSG 琼脂用这个试剂盒是可以的。我们推荐使用 Va-YSG(KYO- 08901)用于下一步实验室(在 YSG 琼脂上孵育后)。我们的
试剂盒是基于 Japan Fruit Juice Association 的操作流程, 不推荐使用 BAT 培养基。所以不能保证使用 BAT 培养基的结果。
Q12: 是否可用来检测糖果?
A12: 对不起我们这边没有这方面信息。可以参考“Japanese spore counting method of sugar samples”。
如果您与细菌检测的预处理流程,请使用您的实验流程代替样品处理。该流程中,有 YSG 液体培养基的制备方法。如果您使用我们建议
的流程,需要接种环和 YSG 琼脂板。如果不适合您的样品,建议修改。
Q13: 该试剂盒是否可以检测 Ethylvanillin 到 Ethoxyphenol 转变?Ethoxyphenol 也会类似愈创木酚,会有异味?
A13: 该试剂盒有比色法的结果,通过过氧化物酶反应愈创木酚转变成四-愈创木酚检测愈创木酚。关于2-Ethoxyphenol, 也会发生过氧化物酶反
应,会有比色法结果。然而我们之前没有测试过,也没有看到相关的文献,不能确定。在很多化学物质数据库中我们也没有找到关于异味是
由 Ethoxyphenol 引起的信息。
Q14: 该试剂盒可检测蜂蜜吗?
A14: 对不起,我们没有做过类似实验。