Individual Proti-Ace & Proti-Ace 2 Reagents蛋白结晶试剂盒Hampton Research

Hampton Research蛋白结晶试剂盒

Individual Proti-Ace & Proti-Ace 2 Reagents
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Individual Proti-Ace & Proti-Ace 2 Reagents

Applications

  • In situ proteolysis and proteolytic screening of protein samples for crystallization and structure determination
  • Individual reagents from Proti-Ace & Proti-Ace 2 kits

Features

  • Lyophilized enzymes for enhanced stability

Description

Individual reagents from the Proti-Ace and Proti-Ace 2 kits. Each protease is supplied in a stable, lyophilized format in an optimized digest buffer. Simply add water when ready to use.

The unique freeze dried formulation of the Proti-Ace kit offers a much improved protease stability compared to liquid protease formulations. Each tube contains 0.1 mg of lyophilized enzyme and digest buffer as shown below. Add 100 microliters of deionized water (Type 1+) to each tube of lyophilized content to create a 1 mg/ml protease solution in digest buffer. Proti-Ace Dilution buffer is supplied as a ready to use solution.

Proti-Ace Reagent 1* (Qty 3):
• 1 mg/ml a-Chymotrypsin, 1 mM Hydrochloric acid, 2 mM Calcium chloride dihydrate
Proti-Ace Reagent 2* (Qty 3):
• 1 mg/ml Trypsin, 1 mM Hydrochloric acid, 2 mM Calcium chloride dihydrate
Proti-Ace Reagent 3* (Qty 3):
• 1 mg/ml Elastase, 200 mM Tris pH 8.0
Proti-Ace Reagent 4* (Qty 3):
• 1 mg/ml Papain, 2 mM EDTA, 2 mM TCEP hydrochloride, 2 mM L-Cysteine
Proti-Ace Reagent 5* (Qty 3):
• 1 mg/ml Subtilisin, 10 mM Sodium acetate trihydrate pH 7.5, 5 mM Calcium acetate hydrate
Proti-Ace Reagent 6* (Qty 3):
• 1 mg/ml Endoproteinase Glu-C (in deionized water)
* When 100 µl of deionized water is added to each Proti-Ace freeze dried reagent

Proti-Ace Dilution Buffer (Qty 3):
• 1.6 ml of 10 mM HEPES pH 7.5, 500 mM Sodium chloride

Proti-Ace 2 Reagent 1* (Qty 3):
• 1 mg/ml Proteinase K, 10 mM TRIS hydrochloride pH 7.5, 1 mM Calcium acetate hydrate
Proti-Ace 2 Reagent 2* (Qty 3):
• 1 mg/ml Clostripain (Endoproteinase-Arg-C), 10 mM HEPES pH 7.5, 2 mM TCEP hydrochloride, 2 mM L-Cysteine, 1 mM Calcium chloride dihydrate
Proti-Ace 2 Reagent 3* (Qty 3):
• 1 mg/ml Pepsin, 1 mM Hydrochloric acid
Proti-Ace 2 Reagent 4* (Qty 3):
• 1 mg/ml Thermolysin, 10 mM Calcium acetate hydrate pH 8.0, 50 mM Sodium chloride
Proti-Ace 2 Reagent 5* (Qty 3):
• 1 mg/ml Bromelain, 5 mM HEPES pH 7.5, 2 mM L-Cysteine, 1 mM Ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt dihydrate
Proti-Ace 2 Reagent 6* (Qty 3):
• 1 mg/ml Actinase, 5 mM HEPES pH 7.5, 10 mM Sodium chloride
* When 100 µl of deionized water is added to each Proti-Ace 2 freeze dried reagent

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CAT NO

HR2-429-01

NAME

Proti-Ace™ Reagent 1

DESCRIPTION

a-Chymotrypsin – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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CAT NO

HR2-429-02

NAME

Proti-Ace™ Reagent 2

DESCRIPTION

Trypsin – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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CAT NO

HR2-429-03

NAME

Proti-Ace™ Reagent 3

DESCRIPTION

Elastase – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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CAT NO

HR2-429-04

NAME

Proti-Ace™ Reagent 4

DESCRIPTION

Papain – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-429-05

NAME

Proti-Ace™ Reagent 5

DESCRIPTION

Subtilisin – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-429-06

NAME

Proti-Ace™ Reagent 6

DESCRIPTION

Endoproteinase Glu-C – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-429-07

NAME

Proti-Ace™ Dilution Buffer

DESCRIPTION

pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-01

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 1

DESCRIPTION

Proteinase K – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-02

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 2

DESCRIPTION

Clostripain (Endoproteinase-Arg-C) – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-03

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 3

DESCRIPTION

Pepsin – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-04

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 4

DESCRIPTION

Thermolysin – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-05

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 5

DESCRIPTION

Bromelain – pack of 3 tubes

PRICE

$65.00

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HR2-432-06

NAME

Proti-Ace™ 2 Reagent 6

DESCRIPTION

Actinase E – pack of 3 tubes

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$65.00

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Support Material(s)

Individual Proti-Ace & Proti-Ace 2 Reagents HR2-429-** Individual Proti-Ace Reagents SDSIndividual Proti-Ace & Proti-Ace 2 Reagents HR2-432-** Individual Proti-Ace 2 Reagents SDS

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  • Proti-Ace • Proti-Ace 2

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Hampton Research, first in crystallization since 1991, developing and delivering crystallization and optimization screens, reagents, plates, and other tools for the crystallization of biological macromolecules, including proteins (antibody), peptides (insulin), and nucleic acids (DNA).

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营养加强型果蝇培养基(10L) Nutri-Fly GF, Makes 1L, German Food Formulation, 10 Packets/Unit

营养加强型果蝇培养基(10L)

Nutri-Fly GF, Makes 1L, German Food Formulation, 10 Packets/Unit

详细描述:
German Food 培养基较标准培养基含有更多的营养成分, 特别适合繁殖能力弱的果蝇品种。使用German Food培 养的果蝇繁殖能力是使用普通“玉米粉-糖浆-酵母”配方 的10倍。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
66-115 营养加强型果蝇培养基(10L) 10 Packets/Unit 咨询客服

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20100-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 绿色荧光     货号20100 货号 20100 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 3840
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞半胱天冬酶活性检测试剂盒基于半胱天冬酶的荧光抑制剂。这些抑制剂具有细胞渗透性和非细胞毒性。一旦进入细胞,半胱天冬酶抑制剂与活性半胱天冬酶共价结合。胱天蛋白酶3/7的激活对于细胞凋亡的起始是重要的。已经证明胱天蛋白酶3/7对肽序列Asp-Glu-Val-Asp(DEVD)具有底物选择性。该试剂盒使用TF3-DEVD-FMK作为半胱天冬酶3/7活性的荧光指示剂。TF3-DEVD-FMK在凋亡细胞中不可逆地结合活化的胱天蛋白酶3/7。一旦与胱天蛋白酶3/7结合,荧光试剂保留在细胞内。结合抑制caspase 3/7,但不会阻止细胞凋亡的进行。

有多种参数可用于检测细胞凋亡。这种Cell Meter 活细胞半胱天冬酶3/7活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中胱天蛋白酶3/7的活化来检测细胞凋亡。它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 3/7活性,或用于筛选caspase 3/7抑制剂。TF3-DEVD-FMK,红色标记试剂,允许通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶3/7。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。

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适用仪器


流式细胞仪  
参数 见表1
荧光显微镜  
推荐孔板: 黑色透明
通道: 见表1
荧光酶标仪  
推荐孔板: 黑色孔板
通道: 见表2

表1:用于流式细胞仪和荧光显微镜的荧光强度检测

  流式细胞仪 荧光显微镜
FAM-DEVD-FMK FL1 通道 FITC 通道
Propidium Iodide FL2 通道 TRITC 通道
Hoechst Dye 紫色激光 DAPI 通道

表2:荧光酶标仪的荧光强度检测

  激发 发射 cutoff
FAM-DEVD-FMK FL1 通道 FITC 通道 515nm
Propidium Iodide FL2 通道 TRITC 通道  
Hoechst Dye 紫色激光 DAPI 通道  

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用测试化合物制备细胞,密度为5×105至2×106个细胞/ mL

将TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中

在室温下孵育1小时

沉淀细胞,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 550 / 595nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

 

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向TF3-DEVD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液。 将150×TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1小时。

注1:对于TF3-DEVD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用TF3-DEVD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

3.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:TF3-DEVD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤5。

4.如果需要,用DNA染色标记细胞(例如用于死细胞的Nuclear Green DCS1,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

5.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 550/595 nm处检测荧光强度(对于Nuclear Green DCS1,Ex / Em = 490/525 nm,对于Hoechst染料,Ex / Em = 350/461 nm)

5.1对于流式细胞仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(用于Nuclear Green DCS1染色的FL1通道)的通道监测荧光强度。

5.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。 将100μL细胞悬浮液置于96孔黑色微量滴定板的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。 如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

5.3使用TRITC通道(用于Nuclear Green DCS1染色的FITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)在荧光显微镜下观察细胞。

5.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(在570 nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

 

参考文献

An inner activation gate controls TMEM16F phospholipid scrambling
Authors: Trieu Le, Zhiguang Jia, Son C Le, Yang Zhang, Jianhan Chen, Huanghe Yang
Journal: Nature communications (2019): 1846

Drosophila Subdued is a moonlighting transmembrane protein 16 (TMEM16) that transports ions and phospholipids
Authors: Trieu Le, Son C Le, Huanghe Yang
Journal: Journal of Biological Chemistry (2019): jbc–AC118

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 红色荧光 Cat#20101

说明书
Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 绿色荧光 .pdf

T3 DNA 连接酶–NEB酶试剂

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

T3 DNA 连接酶                              收藏

T3 DNA 连接酶--NEB酶试剂 T3 DNA 连接酶--NEB酶试剂 T3 DNA 连接酶--NEB酶试剂 T3 DNA 连接酶--NEB酶试剂 T3 DNA 连接酶--NEB酶试剂

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#M0317L
750,000 units
3,219.00元

#M0317S
100,000 units
799.00元

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特性

 连接粘性末端或平末端
 高盐耐受力
 dsDNA 切刻修复 

概述

T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶,可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍,因此,当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时,就多了一个选择。 

来源

重组 E. coli 质粒,含有 T3 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl,1 mM ATP,10 mM MgCl2,1 mM DTT,7.5% PEG 6000(pH 7.6 @ 25℃)],25℃ 温育。 

质保声明

T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中,1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下,25℃ 温育 1 分钟,能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时,可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液,但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验,建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。
65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG,该酶不能加热失活,否则会抑制后续转化实验。 

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

POMP (D2X9S) 兔单克隆抗体 POMP (D2X9S) Rabbit mAb

POMP (D2X9S) 兔单克隆抗体

POMP (D2X9S) Rabbit mAb

详细描述:
Species predicted to react based on 100% sequence homology: Bovine。POMP (D2X9S) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total POMP protein.Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the amino terminus of human POMP protein.

应用范围:W IP; 反应种属:Human,Mouse,Rat,Monkey; 灵敏度:Endogenous; MW (kDa):16; Isotype:Rabbit IgG; 标记:无标记。

货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
15141S POMP (D2X9S) 兔单克隆抗体 100µl 咨询客服

Antistatic PE wide-mouth bottle 250ml 抗静电PE广口瓶 250ml 品牌:Sanplatec


Antistatic PE wide-mouth bottle 250ml

抗静电PE广口瓶 250ml

品牌:Sanplatec
CAS No.:
储存条件:室温
纯度:
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(生产商编号)

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* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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SrfI–NEB酶试剂

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

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价 格
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#R0629L
2,500 units
4,209.00元

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500 units
929.00元

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识别位点

SrfI--NEB酶试剂

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反应条件:

 CutSmart 缓冲液,37℃。

热失活:65℃ 20 分钟。

浓度:

 20,000 units/ml。

甲基化敏感性:

 对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基

化敏感(见 347 页)。

lumiprobe荧光染料TAMRA phosphoramidite, 5-isomer

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TAMRA phosphoramidite, 5-isomer

Oligonucleotide synthesis Phosphoramidite TAMRA (TMR, tetramethylrhodamine)
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