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镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635710 Capturem™ His-Tagged Purification Miniprep Kit 20 Purifications ￥2,545
￥2,036 		镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635713 Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Kit 6 Purifications ￥3,316
￥2,653 		镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635715 Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Columns 25 Columns ￥7,311 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635719 Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Columns 50 Columns ￥13,160 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635714 Capturem™ His-Tagged Purification 96 96 well ￥4,691
￥3,753 		镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635724 Capturem™ His-Tag Large Volume 4 Purifications ￥5,462
￥4,370 		镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635730 Capturem™ His-Tagged Purification 24-Well Plate 24 well ￥4,888
￥3,910 		镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 产品简介
Capturem™ His-Tagged Purification Kit是以镍离子为配基，结合Capturem™ 新型膜技术开发的用于His标签蛋白质快速分离纯化的产品。与传统的固定化金属离子树脂相比，Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对His标签蛋白质的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，比传统树脂的应用范围更加灵活广泛。有小量（miniprep）、中量（maxiprep）、大量（large volume）以及高通量（24 well和96 well）五种规格可供选择。
 
■ 产品特点
· 室温下操作，可应用于哺乳动物细胞和细菌样品
· 操作简单快速，蛋白质小量纯化5 min即可完成，大量纯化也仅需15-30 min
· 操作时间短，有利于蛋白质样品保持活性
· 柱床体积小、带入污染少，与传统的镍离子树脂相比，产物纯度更高
· 一次性使用纯化柱，避免样品之间交叉污染
· 除了部分产品中提供的xTractor Buffer以外，还兼容其他的裂解buffer，通用性强
· 兼容多种添加剂（如β-ME、EDTA、DTT、甘油、TCEP等），可在变性或非变性条件下进行纯化
 
■ Capturem™ 膜原理
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
*收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型（isotype）。
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
上图A图红色方框部分为Capturem His-Tagged Purification Large Volume Units（白底的瓶顶装置），B图红色方框部分为滤瓶螺纹接头 (可用于33-45 mm直径的瓶口)。图A为纯化装置直接与直径为33 mm的螺纹滤瓶直接连接。图C为纯化装置通过螺纹接头连接了45 mm的滤瓶。图D为纯化装置与50 ml的tube直接连接。
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
上图为使用Capturem™ His-Tagged Purification Large Volume Unit从细菌裂解液中纯化过表达的6×His-GFPuv的演示示例。图A.将纯化装置与直径为33 mm的螺纹滤瓶直接连接。图B.将含有目的蛋白质的澄清裂解液上样。图C.膜在上样和洗涤操作后结合了目的蛋白质，因此呈现出绿色荧光蛋白（GFP）特征性的黄绿色，在洗脱操作之后恢复为初始的白色。图D.目的蛋白质6×His-GFPuv被洗脱进50 ml的收集tube中。
 
■ 操作流程
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 实验例
实验例1
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Capturem纯化柱对不同浓度的多种类添加试剂有良好的兼容性。上图为使用miniprep kit对不同种类不同浓度添加剂的检测结果，操作按照产品说明书进行。每项实验的样品、平衡液、洗涤液及洗脱液中均有所要检测的添加试剂，样品最终进行两次300 μl的洗脱操作。
 
兼容试剂一览表
 
Reagent Compatibility*
  MOPS 200 mM
  HEPES 200 mM
  Tris 200 mM
  EDTA 10 mM
  Beta-mercaptoethanol 30 mM
  DTT 10 mM
  TCEP 5 mM
  Guanidine-HCl 6 M
  Urea 8 M
  Nonionic detergent (Triton X-100) 2%
  Nonionic detergent (Tween 20) 2%
  Anionic detergent (SDS) 1%
  Arginine 500 mM
  Glycine 100 mM
  Histidine 20 mM
  Sodium chloride 2 M
  Imidazole 40 mM
  Glycerol 10%
 
* 表中数据为本产品经测试能够兼容的试剂的最高浓度。
 
实验例2
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Capturem纯化柱在变性条件下纯化效果良好。使用miniprep kit按照产品说明书进行操作。根据变性和非变性条件添加适当的buffer，每个纯化柱上样均为800 μl表达6×his-GFPuv的细胞裂解上清液，样品中按需要添加8 M尿素或6 M盐酸胍。
 
实验例3
 
镍离子快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Capturem纯化柱纯化哺乳动物细胞表达的6×His标签蛋白质。图A和B，将编码6×his-tagged MAPK1或 6×his-tagged ADRB2的质粒转染293T细胞进行培养。细胞裂解后取澄清的上清液上样，然后用400 μl wash buffer洗涤，再使用300 μl elution buffer洗脱。将各步骤组分通过4-20%的聚丙烯凝胶电泳检测，并做硝酸纤维素膜印记检测。图A左图，丽春红染色显示不同组分中的所有蛋白质。图A右图，用MAPK1特异性抗体做免疫印迹实验可检测到对应条带。图B左图，丽春红染色显示不同组分中的所有蛋白质。图B右图，用ADRB2特异性抗体做免疫印迹实验可检测到产物中富集的ADRB2。图C，使用编码DsRed-Express2和6×his-tagged Metridia luciferase的双顺反子质粒转染293T细胞，在10 cm的培养皿中培养。取细胞培养上清液用maxiprep柱纯化，6 ml wash buffer洗涤，1 ml elution buffer洗脱。所有离心操作的参数为2,000×g离心5 min，最后通过Ready-to-Glow™ 对各组分中的荧光素酶的活性进行分析。
 
■ 各种试剂盒组成
· Capturem™ His-Tagged Purification Miniprep Kit （635710）
Capturem His-Tagged Purification Miniprep Column 20 个
xTractor Buffer 15 ml × 2
Wash Buffer 10 ml
Elution Buffer 10 ml
 
· Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Kit （635713）
Capturem His-Tagged Purification Maxiprep Column 6 个
Capturem Maxiprep Filters 6 个
xTractor Buffer 200 ml
Wash Buffer 40 ml
Elution Buffer 15 ml
 
· Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Columns（635715）*
Capturem His-Tagged Purification Maxiprep Column 25 个
 
· Capturem™ His-Tagged Purification Maxiprep Columns（635719）*
Capturem His-Tagged Purification Maxiprep Column 50 个
 
· Capturem™ His-Tagged Purification 96（635714）*
Capturem His-Tagged Purification 96-Well Plate 1 块
 
· Capturem™ His-Tagged Purification Large Volume（635724）*
Capturem His-Tagged Purification Large Volume Unit 4 个（每个盒子中2个）
Bottle Thread Adaptor 1 个
 
· Capturem™ His-Tagged Purification 24-Well Plate（635730）*
Capturem His-Tagged Purification 24-Well Plate 1 块
 
*注：Capturem™ His-Tagged Purification 24-well、96-well、Maxiprep Columns以及Large Volume中不含buffer，请使用以下组分的buffer：
 
 
 
缓冲液 组成
Lysis Buffer   推荐使用xTractor Buffer（Code No. 635625），
  也可使用其他标准的裂解buffer
Wash Buffer   150 mM NaCl,20 mM Na3PO4,pH7.6
Elution Buffer   500 mM NaCl,20 mM Na3PO4,500 mM imidazole, pH7.6
 
参考文献
[1] Stephanie S. Pavlovich, Sean P. Lovett,Galina Koroleva, et al. The Egyptian Rousette Genome Reveals Unexpected Features of Bat Antiviral Immunity[J]. Cell, 2018, 173(5):1098–1100.
[2] Sandra Luz Martínez-Hernández, Daniel Cervantes-García, Martín Munoz-Ortega, et al. An anti-amoebic vaccine: generation of the recombinant antigen LC3 from Entamoeba histolytica linked to mutated exotoxin A (PEDIII) via the Pichia pastoris system[J]. Biotechnology Letters, 2017, 39 (8):1149-1157.
[3] Min Kong, Fengjuan Wang, Liuying Tian, et al. Functional identification of glutamate cysteine ligase and glutathione synthetase in the marine yeast Rhodosporidium diobovatum[J]. Science of Nature, 2018, 105 (1-2):4.
[4] Ariana Kariminejada, Mohammadreza Barzgarb, Bita Bozorgmehra, et al. Novel mutations and a severe neurological phenotype in Sjogren-Larsson syndrome patients from Iran[J]. European Journal of Medical Genetics, 2018, 61 (3):139.
[5] Naho Mugita, Takayuki Nambu, Kazuya Takahashi, et al. Proteases, actinidin, papain and trypsin reduce oral biofilm on the tongue in elderly subjects and in vitro[J]. Archives of Oral Biology, 2017, 82:233-240.
[6] Xiao-Xiao Cheng, Li-Hong Zhao, Steven J.Klosterman, et al. The endochitinase VDECH from Verticillium dahliae inhibits spore germination and activates plant defense responses[J]. Plant Science, 2017, 259:12.
 
 
实验操作视频：
https://www.takarabio.com/learning-centers/protein-research/his-tag-purification/protocols/video-capturem-his-miniprep
 
 
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Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635733 Capturem™ Streptavidin Miniprep Columns 20 Columns ￥4,638 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635734 Capturem™ Streptavidin 96-Well Plate 1 × 96 well plate ￥8,935 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
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■ 产品简介
Capturem™ Streptavidin——利用链霉亲和素快速富集和纯化生物素化物质。
链霉亲和素是一种来源于链霉菌Streptomyces avidinii的细胞壁蛋白质，与生物素有非常强的亲和力，这一互作特性在生命科学领域被广泛应用于富集等相关研究。Capturem™ Streptavidin mini 纯化柱和96-well 纯化板是将链霉亲和素固定在高容量的Capturem膜上，从而在室温条件下就可以对生物素化的靶标实现快速、高质量的纯化和富集，整个操作从上样到洗脱仅需5～15分钟。此外，还可以利用Capturem™ Streptavidin来捕获或pull down靶标分子或复合物。
 
■ 产品特点
· 简单、快速的操作流程：室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，96-well板仅需15 min
· 产物浓度高：少量的洗脱液即可实现高浓度洗脱
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了样品聚集、失活，或者样品中复合物解离
· 高重复性：每个纯化柱的纯化结果有高度的一致性
· 一次性使用：新型膜技术搭配一次性离心柱有效降低了污染和残留的风险
 
■ 应用
· 生物素化蛋白质的纯化或富集
· Pull down与生物素化的配体相结合的蛋白质或oligo
 
Capturem Streptavidin对不同样品的载量和操作时间
  生物素标记的抗体 生物素标记的BSA 生物素标记的ssDNA 游离的生物素 纯化时间
Capturem Streptavidin mini纯化柱和96-well 纯化板 20-40 μg >15 μg 1,000-1,500 ng >4,000 pmol 15 分钟
 
实验例
例1
Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
使用Capturem Streptavidin连续三次捕获抗体。图A–C.首先将含48 μg生物素化兔IgG的Binding Buffer上样至平衡好的Capturem Streptavidin spin column中，这时32.0 ± 1.4 μg (图B)的抗体被成功固定在膜上。然后洗涤一次，再将使用Binding Buffer稀释的含20%小鼠血清且同时加入spiked-in靶抗体（约100 μg山羊抗兔抗体）的杂交瘤培养基加入到Capturem Streptavidin spin column中，分别使用Binding Buffer和PBS先后洗涤两次，最后使用1.0 M甘氨酸洗脱3次，从生物素化的捕捉抗体上洗脱获得高纯度的靶抗体，收量约为42 ± 5 μg (图C)。
 
例2
Streptavidin标记物快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Capturem Streptavidin 96-well纯化板具有高度重复性。分别对生物素化oligo（图A）和生物素化BSA（图B）进行8次技术重复上样，并使用离心的方法进行靶标捕获。通过测定样品上样前后的OD值来对结合的分子进行定量。捕获操作按照标准的流程进行，15 min之内完成。
 
 
 
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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635717 Capturem™ Protein A Miniprep 12 Columns ￥2,545
2,036(终卖) 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635720 Capturem™ Protein A Maxiprep 6 Columns ￥3,803
￥3,042 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635731 Capturem™ Protein A 24-Well Plate 1 × 24-well plate ￥5,777
￥4,622 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635743 Capturem™ Protein A 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ￥7,788 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635746 Capturem™ Protein A Buffer 100 ml ￥934
￥747 		protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日 *635717从即日起停止销售，推荐使用中等规格纯化柱635720进行替代。

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■ 产品简介
Capturem™ Protein A 系列产品是基于Protein A* 原理，结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱，特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量（miniprep）、中量（maxiprep）以及高通量（24 well和96 well）四种规格可供选择。
*Protein A是金黄色葡萄球菌的表面蛋白质，对许多物种（如人、大小鼠）的IgG型抗体的Fc片段有很强的亲和力。ProteinA与抗体的结合能力根据抗体同种型（isotype）的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 快速方便：从上样到洗脱，室温下操作小量纯化仅需5 min，无需孵育
· 一次性使用：有效减少样品间的交叉污染，受protein A性质影响，纯化抗体的产量因物种
   和抗体同种型的不同而有所差别
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了抗体降解及失活，保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度：柱床体积小，带入污染少，可实现大体积洗涤，小体积洗脱
· 高灵活性：可从广泛来源的样品中纯化抗体，如动物血清、腹水、细胞培养基等
注：Capturem™ Protein A 24-Well Plate-HC（Code No. 635743）经过优化，与旧版本产品（Code No. 635731）相比，收量更高。
 
■ Capturem™ 膜原理
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
* 注：Maxiprep需要50 ml tube使用的离心机，24 well、96 well 需要24孔板、96孔板使用的离心机或真空过滤装置
 
Capturem Protein A Miniprep与不同物种来源的抗体的结合能力
 
物种 亲和力 (μg/column)*
Goat 100-150
Horse >150
Human >150
Mouse 100-150
Rabbit 50-100
Rat >150
Sheep >150
 
*使用磷酸盐结合缓冲液(pH8.0)对不同物种来源的总血清进行稀释然后经Capturem Protein A Miniprep 纯化，产物的量通过测定其在280 nm处的吸光度进行计算。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

 Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + – +
lgD – – –
lgA1 + – +
lgA2 + – +
Fab + + +
scFv + – +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM – – –
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a – +++ +++
lgG2b – + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 操作流程
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品性能
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 实验例
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
从杂交瘤培养上清液中筛选Cas9的单克隆抗体。所有克隆均是小鼠IgG1同种型，所以使用高盐法进行纯化。选择Capturem™ Protein A Maxiprep，使用6 ml buffer (配方10 mM sodium borate, pH 8.9, 3 M NaCl)进行平衡，2,000 x g 离心3 min。向抗体上清原液中加入1/10体积的1 M sodium borate（pH8.9）将NaCl浓度调节至3.3 M。取20 ml上清液上样，2,000 x g 离心3 min，流出液重复上样一次，尽可能多的结合抗体。然后使用10 ml wash buffer（配方3 M NaCl, 10 mM sodium borate, pH8.9）洗涤，最后用0.5 ml的elution buffer(配方100 mM glycine, pH3.0)洗脱，收集管中需预先添加有50 μl 的中性buffer（配方1 M tris, pH8.5），使用少量elution buffer洗脱以便获得高浓度抗体产物。图A，SDS-PAGE 凝胶电泳检测纯化产物。图B，将Cas9表达量低(lane #1)和高(lane #2)的细胞裂解液分别进行凝胶电泳并转膜，再使用Capturem™ Protein A Maxiprep纯化得到的抗体对其进行免疫印迹反应。图C，使用筛选到的抗体，对不同比例稀释(从左至右: 20 ng, 10 ng, 5 ng, 2.5 ng, 1.25 ng, 0.625 ng)的Cas9 蛋白质进行免疫印迹反应
 
 
实验操作视频：
https://www.takarabio.com/learning-centers/protein-research/his-tag-purification/protocols/video-capturem-his-miniprep
 
 
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protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara

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protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635725 Capturem™ Protein G Miniprep 10 Columns ￥2,545
￥2,036 		protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635726 Capturem™ Protein G 96-Well Plate 1 × 96-well plate ￥5,499 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635727 Capturem™ Protein G Maxiprep 6 Columns ￥3,803 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635732 Capturem™ Protein G 24-Well Plate 1 × 24-well plate ￥5,777
￥4,622 		protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635745 Capturem™ Protein G 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ￥7,788 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635744 Capturem™ Protein G 24-Well Plate – HC 4 × 24-well plate ￥26,358 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 产品简介
Capturem™ Protein G 系列产品是基于Protein G* 原理，结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱，特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量（miniprep）、中量（maxiprep）以及高通量（24 well、96 well）四种规格可供选择。
*Protein G是来源于Staphylococcus aureus的细胞壁蛋白质，与许多物种（人、大小鼠等）的单克隆或多克隆IgG型抗体分子的Fc段有高亲和性。本制品使用的是重组protein G，去掉了白蛋白结合结构域、细胞壁和细胞膜结合结构域，从而提高了与抗体Fc片段的结合特异性。
 
■ 产品特点
· 快速方便：从上样到洗脱，室温下操作小量纯化仅需5 min，无需上样后孵育
· 结合力强：膜与抗体的结合能力≥75 mg/cm3
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了抗体降解及失活，保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度：柱床体积小，带入污染少，可实现大体积洗涤，小体积洗脱
· 高灵活性：可从广泛来源的样品中纯化多种类型的抗体，如动物血清、腹水、细胞培养基等
· 一次性使用：有效减少样品间的交叉污染，单孔的纯化产量因样品类型、物种以及抗体同种型的不同而有所差别。
注：Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（Code No. 635745/635744）经过优化，与旧版本产品（Code No. 635732）相比，收量更高
 
■ Capturem™ 膜原理
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 操作流程
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
 
  Capturem™ Protein G Miniprep Capturem™ Protein G Maxiprep Capturem™Protein G 24-Well Plate-HC Capturem™Protein G 96-Well Plate
包装量 10次 6次 24 well 96 well
样品上样量*1 100～800 μl 2～20 ml 0.5～4.3 ml/well 200～1,000 μl/well
操作时长 5 min 15 min 15 min 15 min
收量*2 60 μg
protein/column 		1.2 mg
protein/column 		600 μg*3
protein/well		 60 μg
protein/well
洗脱液使用量 100-300 μl 0.5-1.5 ml 1.8 ml 100-300 μl
 
*1. 样品与binding buffer的稀释比例为1:2～1:15。建议杂交瘤样品1:2～1:4稀释，血清样品1:15稀释。
*2. 收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型（isotype）。
*3. 这是在HEK293细胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1时获得的收量。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

 Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + – +
lgD – – –
lgA1 + – +
lgA2 + – +
Fab + + +
scFv + – +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM – – –
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a – +++ +++
lgG2b – + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 各试剂盒组成
 
Capturem™ Protein G Miniprep（635725）
Miniprep Column      10个
 
Capturem™ Protein G Maxiprep（635727）
Maxiprep Column      6个
 
Capturem™ Protein G 96-Well Plate（635726）
96 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate（635732）
24 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635745）
24 well plate          1块
 
Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635744）
24 well plate          4块
 
【注】由于Capturem Protein G系列产品不包含buffer和收集管，请按以下建议配制buffer和准备材料。
1. 纯化buffer
本制品可搭配使用磷酸盐、柠檬酸盐缓冲液等抗体纯化常用试剂。标准的buffer配方请参考说明书中内容，需要注意的是，buffer的盐浓度和pH值对纯化抗体的收量和纯度的影响会因抗体的同种型不同而不同。
2. 收集tube/plate
使用Miniprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个2 ml tube
使用Maxiprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个50 ml tube
使用96 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个96 well collection plate
使用24 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个24 well collection plate
 
 
更多产品信息请点击：protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
 
 
 

页面更新：2020-05-29 08:59:04