PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*
货号 |
21665 |
存储条件 |
在2-8度冷藏保存, 避免光照 |
规格 |
1000 Tests |
价格 |
2544 |
Ex (nm) |
650 |
Em (nm) |
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分子量 |
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溶剂 |
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产品详细介绍 |
简要概述
PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测磷酸盐的试剂盒,磷酸盐参与许多生物反应。例如,磷酸酶,ATP酶和几种其他酶催化无机磷酸盐(Pi)从底物释放的反应。 这种PhosphoWorks 磷酸盐检测试剂盒是为测量任何产生磷的酶的活性而开发的。 该试剂盒的配方可灵敏检测Pi,为危险的放射性方法和其他灵敏度较低的比色分析提供了替代方案。 Pi的测量基于在钼酸盐存在下孔雀石绿衍生物的吸光度变化。 与其他孔雀石染料配方不同,该试剂盒可提供完全稳定的终点信号,不易沉淀。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒。
适用仪器
分光光度计 |
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吸收: |
600-660nm |
推荐孔板: |
透明底板 |
光吸收酶标仪 |
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吸收: |
600-660nm |
推荐孔板: |
透明底板 |
产品说明书
操作步骤
简要概述
准备测试样品或磷酸盐标准品(80μL)
添加MG Plus 试剂(组分B)(20μL)
在室温下孵育10-40分钟
监测600-660nm的吸光度或分光光度计
制备标准溶液
磷酸盐标准配制
在950μL去离子水或酶反应缓冲液中加入50μL1mM磷酸盐标准品(组分A),得到50μM磷酸盐标准溶液(PS7)。 取50μM磷酸盐标准溶液(PS7)并进行1:2连续稀释,用去离子水或酶反应缓冲液获得连续稀释的磷酸盐标准品(PS6-PS1)。
样品实验方案
表1.透明96孔微孔板中磷酸盐标准品和测试样品的布局。
PS =磷酸盐标准品(PS1-PS7,0.78至50μM),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL |
BL |
TS |
TS |
PS1 |
PS1 |
… |
… |
PS2 |
PS2 |
… |
… |
PS3 |
PS3 |
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PS4 |
PS4 |
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PS5 |
PS5 |
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PS6 |
PS6 |
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PS7 |
PS7 |
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表2.每个孔的试剂组成。
孔 |
规格 |
试剂 |
PS1-PS7 |
80ul |
连续稀释液(0.78至50μM) |
BL |
80ul |
不含磷酸盐的水或缓冲液 |
TS |
80ul |
测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备磷酸盐标准品(PS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用40μL试剂代替80μL。
2.使用前摇匀MG Plus 试剂(组分B)。
3.向磷酸盐标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入20μLMGPlus™试剂(组分B),使总磷酸盐测定体积为100μL/孔。彻底混合试剂。对于384孔板,在每个孔中加入10μLMGPlus™试剂(组分B),总体积为50μL/孔。
4.在含磷酸盐的孔中将在10至40分钟内产生蓝绿色。使用吸光度酶标仪在600 – 660 nm处监测吸光度或使用分光光度计。注意:在高磷酸盐浓度(>100μM)下,可能会形成沉淀。稀释样品并重新进行分析。注意:对于需要总体积大于100μL的比色皿测定,在测量吸收之前,将样品体积和MG Plus 试剂(组分B)按比例加倍或用1M H 2 SO 4或1M HCl稀释最终反应混合物。
数据分析
从空白标准孔获得的读数(吸光度)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算磷酸盐样品。 我们建议使用在线线性回归计算器(点击查看)
图1.使用SpectraMax Plus酶标仪(Molecular Devices),在透明的96孔板上用PhosphoWorks 比色磷酸盐测定试剂盒测量磷酸盐剂量响应。
参考文献
Modulating bone regeneration in rabbit condyle defects with three surface-structured tricalcium phosphate ceramics
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Florence de. groot, Joost de. bruijn, Huipin Yuan
Journal: ACS Biomaterials Science & Engineering (2018)
Variation of bone forming ability with the physicochemical properties of calcium phosphate bone substitutes
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Xiaoman Luo, Jie Weng, Chongyun Bao, Joost De Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Biomaterials Science (2017)
Influence of surface microstructure and chemistry on osteoinduction and osteoclastogenesis by biphasic calcium phosphate discs.
Authors: NL Davison, J Su, H Yuan, JJJP van den Beucken, JD de Bruijn
Journal: (2015)
Submicron-scale surface architecture of tricalcium phosphate directs osteogenesis in vitro and in vivo
Authors: NL Davison, X Luo, T Schoenmaker, V Everts, H Yuan, F Barrere-de Groot, JD de Bruijn
Journal: Eur Cell Mater (2014)
Zinc in calcium phosphate mediates bone induction: in vitro and in vivo model
Authors: Xiaoman Luo, Davide Barbieri, Noel Davison, Yonggang Yan, Joost D de Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Acta biomaterialia (2014): 477–485
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货号 |
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说明书
PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*.pdf